一种ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物，由ES-2肽分子上的羧基与季铵化壳寡糖分子的氨基通过酰胺键结合，结构式为：(ES-2)n-CO-NH-O-HTCC；式中，n＝1～10；ES-2的分子量为1223Da，等电点为10.42；O-HTCC的分子量为1000Da以上，自由氨基摩尔含量为不小于20％。本发明专利技术还公开了ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物的制备方法。本发明专利技术的ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物与ES-2相比，保留了ES-2分子抗新生血管生成活性和抗肿瘤活性，整合了O-HTCC的良好特性，使其具有稳定性高、半衰期长、细胞亲和性强、靶向性强等的特性；与TMC相比，O-HTCC修饰ES-2的效率更高，因此具有更好的使用效果和应用范围。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物及其制备方法与应用，属于生物医药

技术介绍
内皮抑素(Endostatin，ES)是一种内源性的新生血管生成抑制因子，能够有效地抑制新生血管的形成，从而切断肿瘤的营养供给途径和废物代谢途径，起到抑制肿瘤的生长和转移的作用。ES-2肽(IVRRADRAAVP)是ES结构中一个具有明显抗新生血管生成、抗肿瘤活性的短肽段，更容易进入细胞内部，且更容易获得和改造，但是同ES一样，ES-2肽也存在体内半衰期短和稳定性差等缺点，这些缺点大大的限制了ES-2肽进一步的应用。壳寡糖是目前发现的自然界存在的唯一一种阳离子多糖，结构明确且有靶向性，经季铵化后能进一步提高其带正电荷的能力。N,N,N-三甲基季铵化壳聚糖(TMC)制备过程中，壳寡糖的2-NH2被甲基化后首先生成2-NH(CH3)甚至2-N(CH3)2，然后才能进一步形成2-N(CH3)3+季铵基团，因此，水溶性良好的TMC中的自由氨基数量极少(一般<10％)，导致其对ES-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ES‑2肽的季铵化壳寡糖修饰物，其特征在于，由ES‑2肽分子上的羧基与季铵化壳寡糖分子的氨基通过酰胺键结合，结构式如下：(ES‑2)n‑CO‑NH‑O‑HTCC；式中，n＝1～10；ES‑2的分子量为1223Da，等电点为10.42；O‑HTCC的分子量为1000Da以上，自由氨基摩尔含量为不小于20％。

【技术特征摘要】
1.一种ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物，其特征在于，由ES-2肽分子上的羧基与季铵化
壳寡糖分子的氨基通过酰胺键结合，结构式如下：
(ES-2)n-CO-NH-O-HTCC；
式中，n＝1～10；ES-2的分子量为1223Da，等电点为10.42；O-HTCC的分子量为1000Da
以上，自由氨基摩尔含量为不小于20％。
2.如权利要求1所述的ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物，其特征在于，所述n＝1～5；
O-HTCC的分子量为1000Da～1000Da，自由氨基摩尔含量为不小于50％。
3.权利要求1或2所述的ES-2肽的季铵化壳寡糖修饰物的制备方法，其特征在于，步
骤为：
(1)向ES-2肽溶液中加入EDC和NHS进行羧基活化，ES-2肽与EDC的摩尔比为1：
(1-100)，EDC与NHS的摩尔比为3：(0.1-5)，反应温度为20℃～30℃，缓慢搅拌且避光
反应15～45min；
(2)将步骤(1)反应后的溶液加入到季铵化壳聚糖溶液中，使ES-2肽与季铵化壳寡糖
的质量比为1：(0.1～30)，反应4～8h，得粗品，经分离纯化，即得ES-2肽的季铵化壳寡糖
修饰物。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述ES-2肽溶液的pH
为4.0-6.0，其中ES-2肽的浓度为0.5～5mg/ml。
5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述季铵化壳聚糖溶液
的pH为7.0-9.0，其中季铵化壳聚糖的浓度为1～5mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭海宁，王娟，张丛丛，刘纯慧，于洋，孙凤，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37