枳壳挥发油提取物作为制备抗抑郁药物的应用，所述枳壳挥发油提取物从枳壳药材中提取，主要成分为柠檬烯。所述枳壳挥发油提取物的提取工艺为：取枳壳药材，浸泡1～3h，采用水蒸气蒸馏法，加6～10倍体积的水提取5～9h即得。优选工艺为：取枳壳药材，浸泡3h，采用水蒸气蒸馏法，加8倍体积的水提取7h，即得。所述枳壳挥发油提取物可以制备成多种制剂，并可添加药学上可接受的辅料及载体应用于临床抗抑郁新药的开发。本发明专利技术提供的枳壳挥发油提取物作为制备抗抑郁药物的应用，通过体外药效实验，证明枳壳挥发油提取物对缺氧损伤SH-SY5Y神经细胞具有保护作用，具有显著的抗抑郁作用，为抗抑郁方面的新药开发奠定基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中医药
，尤其涉及枳壳挥发油提取物作为制备抗抑郁药物的应用。
技术介绍
抑郁症是一种以持续精神低落为主要症状的精神情志障碍性疾病。临床对抑郁症的治疗主要依靠西药抗抑郁剂，并辅助以心理治疗，但此治疗方法存在起效慢、疗程长、副作用大、药价昂贵等缺点。近年来，中医药在治疗抑郁症实验研究方面取得了丰富的经验和较好的疗效。经大量文献调研可知，许多中药复方、单味药及中药活性成分均具有抗抑郁作用。因此，近年来中医中药在抑郁症的治疗方面日益被人们所关注。枳壳最早载于《神农本草经》，列为中品。枳壳为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种的干燥未成熟果实，性微寒，味苦、辛、酸，入肺、脾、大肠经。功能理气宽中，行滞消胀。主治胸肋气滞、胀满疼痛、食积不化、痰饮内停、胃下垂等。枳壳类药材化学成分比较复杂，目前枳壳药材中已知的成分主要包括挥发油、黄酮类、香豆素类和生物碱等成分。枳壳挥发油中所含的主要化合物为柠檬烯，能够显著抑制胃肠平滑肌收缩，也具有一定的镇痛、抗菌、中枢抑制及溶胆石作用。目前，针对枳壳挥发油抗抑郁症的研究未见报道。体外细胞实验，由于细胞直接来源于机体组织，生物性状尚未发生大的变化，在一定程度上能够反映体内的状态，具有操作简便、周期短、节约成本等优势，广泛应用于药效学研究领域。SH-SY5Y细胞（神经母细胞瘤细胞）在抗抑郁、治疗帕金森病等神经系统疾病研究方面应用较为普遍，SH-SY5Y细胞氧化损伤模型常用于抗抑郁药物的筛选研究。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术提供一种枳壳挥发油提取物作为制备抗抑郁药物的应用，该挥发油提取物从枳壳药材中提取，对缺氧损伤SH-SY5Y神经细胞具有较好的保护作用，可应用于抑郁症的治疗研究。为实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供枳壳挥发油提取物作为制备抗抑郁药物的应用，所述枳壳挥发油提取物的主要成分为柠檬烯。所述枳壳挥发油提取物的提取工艺为：取枳壳药材，浸泡1～3h，采用水蒸气蒸馏法，加6～10倍重量的水提取5～9h，即得。所述枳壳挥发油提取物的提取工艺为：取枳壳药材，浸泡3h，采用水蒸气蒸馏法，加8倍重量的水提取7h，即得。所用的枳壳为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种的干燥未成熟果实。所述枳壳挥发油提取物能制备多种制剂，并可添加药学上可接受的辅料及载体应用于临床抗抑郁新药的开发。药物剂型可以为：糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、蜜丸剂、散剂、丹剂、注射剂、栓剂、硬膏剂、糖浆剂、针粉剂或缓释胶囊剂等。与现有技术相比本专利技术的有益效果。本专利技术提供的枳壳挥发油提取物作为制备抗抑郁药物的应用，通过体外药效实验，证明枳壳挥发油提取物有显著的抗抑郁作用，为该药物抗抑郁方面的新药开发奠定基础。具体实施方式下面结合具体实施例进一步详细说明本专利技术，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于下述的实施例，凡基于本专利技术上述内容实现的技术均属于本专利技术的范围。一实验材料。1实验细胞株。人骨髓神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y（购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心）。2药材与试剂。盐酸帕罗西汀片（中美史克，批号：13030713）；枳壳药材（由辽宁华润本溪三药有限公司提供）；DMEM/F12培养基（美国GIBCO公司）；胎牛血清（FCS）（杭州四季青生物工程材料有限公司）；水为超纯水。3仪器与设备。USAUTOFLOW型CO2培养箱（德国NUAIRE公司）；AE31型倒置相差显微镜（Motic公司）；SUNRISE酶标仪（瑞士TECAN公司）；LEGENDMICRO17R型低温高速离心机（ThermoFisherScientific）。二实验方法与结果。1枳壳挥发油提取工艺研究：取枳壳药材，精密称取50.0g，采用水蒸气蒸馏法，按下述条件进行提取试验。1.1正交试验设计。选取浸泡时间、加水倍数、提取时间三个因素，对主要影响因素各取三个水平，进行L9(34)正交试验考察。以挥发油得率为考察指标，优选其最佳提取工艺。正交试验L9（34）因素水平表见表1，正交试验设计表及直观分析结果见表2，方差分析结果见表3。表1因素水平表。表2正交实验设计表及直观分析结果。表3以挥发油为指标正交试验方差分析。注：F0.05＝19.00；*为P＜0.05。以挥发油含量为指标，直观分析及方差分析影响枳壳挥发油提取工艺的因素顺序为A>B>C，筛选出最佳提取条件为A2B2C3，即浸泡3h，加8倍量的水提取7h。2药物活性研究。2.1实验方法：（1）MTT法药效检测。取对数生长期、生长状态良好的SH-SY5Y细胞，经PBS清洗，用0.25%胰蛋白酶消化，待细胞趋于变圆用含15%进口胎牛血清的DMEM培养液冲洗吹打细胞，制成单细胞悬液。以每毫升1×105个细胞接种于96孔培养板中，每孔100μL（除空白调零孔外），将培养板置于CO2培养箱中继续培养，24h后模型组和给药组加入含H2O2（终浓度为100μmol·L-1）的PBS溶液，构建氧化损伤抑郁模型，空白对照组加无H2O2的PBS溶液，造模2h后空白对照组和模型组加入含10%血清的培养基100μL培养，各给药组分别加入含10%血清的含药培养基100μL。设空白调零组（只加培养基，酶标仪调零用）、空白对照组、模型组（只加细胞）、枳壳挥发油组和盐酸帕罗西汀组,设5个复孔。在37℃、5%CO2培养箱中继续培养24h后，每孔吸取细胞上清液50μL，置-20℃保存，留作测试剂盒用，每孔补加50μL培养液，继续培养3h，每孔加入20μL（5mg/mL）MTT，继续培养4h后吸净孔内上清液，每孔加入150μLDMSO用酶标仪振摇10min，使紫色结晶完全溶解，在492nm处扫描，测定吸光值（OD），结果见表4。其中存活率=OD试验组均值/OD空白对照组均值×100％。表4枳壳挥发油对SH-SY5Y神经细胞的保护作用。组别给药浓度（mg·mL-1）OD值（s）存活率（%）空白对照组-1.0732±0.0845100模型组-0.6184±0.0655**57.62枳壳挥发油组0.50.7954±0.0306#74.11盐酸帕罗西汀0.010.8530±0.1132##79.48注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01。由表4可知，枳壳挥发油对SH-SY5Y神经细胞有很好的保护作用，其作用效果等效于盐酸帕罗西汀，证明枳壳挥发油具有较强的抗抑郁作用，可以开发为以枳壳挥发油为原料的中药抗抑郁药物，便于临床制成不同剂型给药，扩大了枳壳的应用范围，为其抗抑郁新药的开发提供理论依据。本文档来自技高网...
【技术保护点】
枳壳挥发油提取物用于治疗抑郁症。
【技术特征摘要】
1.枳壳挥发油提取物用于治疗抑郁症。
2.如权利要求1所述的枳壳挥发油提取物，其特征在于，所述枳壳挥发油提取物从枳壳药材中提取，主要成分为柠檬烯。
3.如权利要求1所述的枳壳挥发油提取物，其特征在于，所述枳壳挥发油提取物的提取工艺为：取枳壳药材，浸泡1～3h，采用水蒸气蒸馏法，加6～10倍量的水提取5～9h，即得本发明枳壳挥发油提取物。
4.如权利要求3所述的枳壳挥发油提取物，其特征在于，所述枳壳挥发油提取物的提取工艺为：取枳壳药材，浸泡3h，采用水蒸气蒸馏法，加8倍量的水提取7h，即得本发明枳壳挥发油提取物。
5.如权利要求2所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：孟宪生，包永睿，王帅，张丽敏，李天娇，
申请(专利权)人：辽宁中医药大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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