中药复方中败酱草的鉴别方法技术

本发明专利技术公开了一种中药复方中败酱草的鉴别方法，特别涉及中药复方中败酱草的薄层鉴别方法。本发明专利技术的鉴别方法包括以下步骤：对照药材溶液的制备；供试品溶液的制备；阴性样品溶液的制备；用毛细管点样器在同一硅胶G薄层板上点样；将薄层板置于层析缸中，用展开剂展开，取出，晾干；检视薄层色谱板，得到结果进行鉴别，供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，阴性样品无此斑点。本发明专利技术的鉴别方法工艺简单，分离效果好，具有极强的专属性，进一步提高了中药复方中败酱草成分鉴定的准确性，在与败酱草有关的药品鉴定领域具有巨大的推广应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药复方中败酱草的鉴别方法，特别涉及中药复方中败酱草的薄层鉴别方法。
技术介绍
为败酱草科植物黄花败酱PatriniascabiosaefoliaFisch.或白花败酱PatriniavillosaJuss.的干燥全草。夏季花开前采挖，晒至半干，扎成束，再阴干。主产于江苏、浙江、湖北、安徽。败酱草具有清热解毒，祛瘀排脓的功效。主治阑尾炎，痢疾，肠炎，肝炎，眼结膜炎，产后瘀血腹痛，痈肿疔疮。败酱草还可与其他药材配伍，制成多种中药复方品种，例如2015年一部收载的癃清片，文献中的败酱片、复方妇炎平胶囊、清宫液、苡仁六妙颗粒等，其处方中也含有败酱草。其中癃清片目前只有一家企业生产，为独家品种，销量可观。中国药典中含败酱草的中药复方品种只有癃清片一种，其标准中尚未建立败酱草的鉴别方法。文献中品种败酱片(文献1：唐燚，董林，余晓琴.败酱片质量标准研究.中成药.2008，30(2):223～226)、复方妇炎平胶囊(文献2：罗玉鸿，梁飞华，黄好武等.复方妇炎平胶囊质量标准控制.中国医院药学杂志.2009，29(1)：73～75)、苡仁六妙颗粒(文献3：曹明成，陈斌，李流兵等.苡仁六妙颗粒质量标准研究.现代中药研究与实践.2004，18(5)：50～52)均建立了败酱草薄层鉴别。申请人曾经使用文献中的鉴别方法对白苦败痢口服液中的败酱草进行薄层色谱鉴别，结果显示这些方法检不出，分离效果也不好。目前，国内外对中药复方品种的质量控制越来越严格，因此急需找到一种稳定、可靠、简便的薄层色谱法，能准确、有效的对中药复方中败酱草成分进行鉴别。
技术实现思路
就现有技术而言，供试品制备方法未用乙酸乙酯，所用展开剂均为混合溶液，但研究发现这些制备方法及展开剂，分离程度达不到理想的鉴别效果。本专利技术的目的在于提供一种供试品制备方法及展开剂，该供试品溶液制备方法为采用乙酸乙酯为溶剂，展开剂采用氨蒸汽饱和，该败酱草薄层色谱的技术方案，具有操作简便快捷、分离效果好、专属性强、应用广泛等优点，解决了现有技术存在的问题，本专利技术同时有助于完善与败酱草有关的药品质量标准。本专利技术涉及一种中药复方中败酱草的鉴别方法，所述鉴别方法包括以下步骤：(1)对照药材溶液的制备：取败酱草对照药材，加水，煎煮，过滤，滤液浓缩，同供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；(2)供试品溶液的制备：取待测样品液体，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；当待测样品中败酱草工艺为原粉时，取待测样品，加水煎煮，过滤，滤液浓缩，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；当待测样品为固体，且败酱草工艺为提取时，取待测样品，加热水溶解，过滤，取滤液，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；(3)阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺败酱草的其他药材，制备不含败酱草的中药复方制剂，取和待测样品相同量，再按照步骤(2)中自“取待测样品”之后起，同法操作，所得甲醇溶解液即为阴性样品溶液；(4)用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各0.1～50μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；(5)取甲苯、乙酸乙酯混合，另槽置等体积氨水饱和，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤(4)得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；(6)检视薄层色谱板，对得到结果进行鉴别；所述待测样品为含败酱草的中药复方制剂。优选地，所述步骤(1)中加入水的量为对照药材质量的1～500倍；滤液浓缩至对照药材质量的1～50倍；两次加入乙酸乙酯的量为浓缩液质量的0.1～10倍。优选地，所述步骤(2)中加入乙酸乙酯的量为待测样品体积的1～100倍。优选地，所述步骤(5)中的展开剂中甲苯、乙酸乙酯的体积比为10:1，用等体积氨水饱和。优选地，所述步骤(6)中检视薄层色谱板为喷显色剂加热后，在日光下检视。优选地，所述鉴别方法按以下步骤进行：(1)对照药材溶液的制备：取败酱草对照药材2g，加水150ml，煎煮半小时，过滤，滤液浓缩至30ml，同供试品溶液制备方法制备，作为败酱草对照药材溶液；(2)供试品溶液的制备：当待测样品为液体时，取相当于含败酱草药材2g的待测样品液体，稀释或浓缩至30ml，加乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；当败酱草工艺为原粉时，取相当于含败酱草药材2g的待测样品粉末，加150ml水，煎煮，过滤，浓缩至30ml，加乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；当败酱草工艺为提取时，取相当于含败酱草药材2g的待测样品粉末，用50ml热水溶解，过滤，取滤液，加乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；(3)阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺败酱草的其他药材，制备不含败酱草的中药复方制剂，再按照步骤(2)中自“取相当于含败酱草药材2g的待测样品液体/粉末”之后起，同法操作，所得甲醇溶解液即为阴性样品溶液；(4)用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各1-20μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；(5)将甲苯、乙酸乙酯按照体积比为10:1混合均匀，另槽置等体积氨水，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤(4)得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；(6)将步骤(5)晾干后的薄层板喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视，得到薄层色谱图，根据所得薄层色谱图判断是否含败酱草。所述待测样品为白苦败痢口服液、癃清片、前列平胶囊、金马肝泰颗粒、痔舒适洗液或白酱感冒颗粒。本专利技术中药复方中败酱草的鉴别方法具有如下优点：1.对于中药复方制剂中败酱草的薄层鉴别方法，展开剂系统较多，如：甲苯-醋酸乙酯-甲酸、正己烷-醋酸乙酯-甲醇-醋酸、正己烷-乙酸乙酯-甲醇、氯仿-甲醇-水等，结合色谱图将本专利技术所述技术方案与败酱草文献中的鉴别方法进行比较。上述文献中的鉴别方法分离效果不好，不适合本制剂中败酱草的鉴别，本专利技术所建立的技术方案，分离效果比上述方法更好，Rf值更适中，阴性无干扰、专属性强，方法简单。2.采用本专利技术的方法对几个己上市的中药复方品种进行了薄层色谱鉴别检验，得到的结果见表1，结果证明本专利技术所述的技术方案可以广泛应用于市场上含败酱草的中药复方品种薄层色谱鉴别，且效果明显优于现有技术。附图说明下面结合附图对本专利技术进行进一步的说明。图1为按照文献1所得到的败酱草薄层色谱照片；其中，1.败酱草对照药材5μl、2.败酱草对照药材10μl、3.供试品2μl、4.供试品3μl、5.供试品4μl、6.供试品4μl、7.阴性(缺败酱草)2μl；展开系统：甲苯﹣乙酸乙酯﹣甲酸(15∶2∶0.5)，检视系统：喷10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，紫外光灯(365nm)下检视。图2为在文献1基础上调整展开剂比例所得到的败酱草薄层色谱照片；其中，1.熊果酸对照品2μl、2.败酱草对照药材2μl、3.阴性(缺败酱草)2μl、4～8.供试品1～5μl；展开系统：正己烷﹣乙酸乙酯﹣甲酸(30∶10∶0.5)，检视系本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中药复方中败酱草的鉴别方法，其特征在于：所述鉴别方法包括以下步骤：(1)对照药材溶液的制备：取败酱草对照药材，加水，煎煮，过滤，滤液浓缩，同供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；(2)供试品溶液的制备：取待测样品；或取待测样品，加水煎煮，过滤，滤液浓缩；或取待测样品，加热水溶解，过滤，取滤液；加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；(3)阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺败酱草的其他药材，制备不含败酱草的中药复方制剂，取和待测样品相同量，再按照步骤(2)中自“取待测样品”之后起，同法操作，所得甲醇溶解液即为阴性样品溶液；(4)用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液0.1～20μL、供试品溶液及阴性样品溶液各0.1～50μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；(5)取甲苯、乙酸乙酯混合，另槽置等体积氨水饱和，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤(4)得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；(6)检视薄层色谱板，对得到结果进行鉴别；所述待测样品为含败酱草的中药复方制剂。

【技术特征摘要】
1.一种中药复方中败酱草的鉴别方法，其特征在于：所述鉴别方法包括以下步骤：(1)对照药材溶液的制备：取败酱草对照药材，加水，煎煮，过滤，滤液浓缩，同供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；(2)供试品溶液的制备：取待测样品；或取待测样品，加水煎煮，过滤，滤液浓缩；或取待测样品，加热水溶解，过滤，取滤液；加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；(3)阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺败酱草的其他药材，制备不含败酱草的中药复方制剂，取和待测样品相同量，再按照步骤(2)中自“取待测样品”之后起，同法操作，所得甲醇溶解液即为阴性样品溶液；(4)用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液0.1～20μL、供试品溶液及阴性样品溶液各0.1～50μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；(5)取甲苯、乙酸乙酯混合，另槽置等体积氨水饱和，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤(4)得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；(6)检视薄层色谱板，对得到结果进行鉴别；所述待测样品为含败酱草的中药复方制剂。2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(1)中加入水的量为败酱草对照药材质量的5～500倍；滤液浓缩至败酱草对照药材质量的1～50倍；加入乙酸乙酯的量为步骤(1)中浓缩液质量的0.1～10倍。3.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(2)中加入乙酸乙酯的量为待测样品体积的0.1～100倍。4.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(5)中的展开剂中甲苯、乙酸乙酯的体积比为9～11:0.1～2，另槽置等体积氨水饱和。5.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(5)中的展开剂中甲苯、乙酸乙酯的体积比为10:1，另槽置等体积氨水饱和。6.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(6)中检视薄层色谱板为喷以5％香草醛硫酸溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛卫宁，梁冰，尹朋，张磊，
申请(专利权)人：中悦民安北京科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11