本发明专利技术公开了一种产二十碳五烯酸的菌株及其应用，属于微生物领域。所述菌株包括：Nocardioides plantarum、Compostimonas suwonensis、Flavobacteriu momnivorum和Shewanella baltica。所述菌株在产二十碳五烯酸中的应用，所述应用包括以下步骤：对所述菌株进行活化，活化条件为：0‑15℃，摇床转速为180±10rpm；对活化后的所述菌株进行发酵，发酵条件为：0‑15℃，摇床转速为180±10rpm。该四株产二十碳五烯酸的菌株均为野生型菌株，能够满足人体对EPA的需要，这四种野生型高产菌株丰富了微生物合成EPA的资源库，为商业化生产EPA提供了潜在的菌株资源和基因资源。此外，该应用方法可进一步提高菌株产二十碳五烯酸的能力，从而通过该菌株获得更多的二十碳五烯酸。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物领域，特别涉及一种产二十碳五烯酸的菌株及其应用。
技术介绍
EPA(EicosapentaenoicAcid，二十碳五烯酸)对于人类健康具有重要意义，研究表明它具有预防心血管疾病、抑制乳腺癌和结肠癌的生理功能。此外，在人体内可转化为前列腺素、血栓素和白三烯等类二十烷酸活性物质。目前EPA的商业来源主要是深海鱼油，但鱼油的生产受鱼类、季节和地点限制，加工成本高且具有鱼腥味，特别是海洋生态环境的污染和渔业资源的日益匮乏，使鱼油很难满足人们对EPA的需求。微生物具有生长速度快、营养需求低、代谢调控简单等优势。许多微生物菌株可以合成其他高附加值的代谢产物，如角鲨烯、植物甾醇和虾青素等。其中，高附加值的代谢产物EPA和DHA(DocosahexaenoicAcid，二十二碳六烯酸)均属于ω-3系列多不饱和脂肪酸。目前，富含DHA的微生物，如破囊壶菌(Thraustochytrium)和裂殖壶菌(Schizochytrium)均已经被用于商业化大规模生产DHA，其代表公司如美国的马泰克(Martek)和中国的嘉必优(Cabio)。然而，还没有发现可用于商业化生产EPA的野生型高产菌株。在实现本专利技术的过程中，专利技术人发现现有技术至少存在以下问题：EPA是人体不可缺少的重要营养素。虽然人体摄入必需脂肪酸亚麻酸后可被转化为EPA或DHA，但此反应在人体中的速度很慢且转化率很低，远远不能满足人体对EPA的需求，尤其是婴幼儿和中老年人。由于目前还没有发现可用于商业化生产EPA的野生型高产菌株，故获得符合商业需求的产EPA的野生型高产菌株迫在眉睫。专利
技术实现思路
为了解决现有技术中没有可用于商业化生产EPA的野生型高产菌株的问题，本专利技术实施例提供了一种产二十碳五烯酸的菌株及其应用。所述技术方案如下：一方面，本专利技术实施例提供了一种产二十碳五烯酸的菌株，所述菌株包括：Nocardioidesplantarum、Compostimonassuwonensis、Flavobacteriumomnivorum、和Shewanellabaltica，其中Nocardioidesplantarum于2016年3月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016309，Compostimonassuwonensis于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016311，Flavobacteriumomnivorum于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016310，Shewanellabaltica于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016312。具体地，所述保藏编号为CCTCCM2016309的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:1所示，所述保藏编号为CCTCCM2016311的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:2所示，所述保藏编号为CCTCCM2016310的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:3所示，所述保藏编号为CCTCCM2016312的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:4所示。另一方面，本专利技术实施例提供了一种上述菌株在产二十碳五烯酸中的应用，所述应用包括以下步骤：对所述菌株进行活化，活化条件为：0-15℃，摇床转速为180±10rpm；对活化后的所述菌株进行发酵，发酵条件为：0-15℃，摇床转速为180±10rpm。具体地，采用液体培养基进行所述菌株的活化和发酵，所述液体培养基包括：酵母提取物、蛋白胨、酪蛋白水解物、葡萄糖、可溶性淀粉、丙酮酸钠、磷酸氢二钾、七水硫酸镁和水，其中，酵母提取物、蛋白胨、酪蛋白水解物、葡萄糖和可溶性淀粉的质量比为1:1:1:1:1，酵母提取物、丙酮酸钠、磷酸氢二钾、七水硫酸镁和水的质量比为5:3:3:180，酵母提取物与水的质量比为1:2000，所述液体培养基的pH值为7.3±0.2。进一步地，所述液体培养基还包括3μg/mL的浅蓝菌素。具体地，取活化后的所述菌株按照体积比为1％的接种量进行发酵。进一步地，所述液体培养基经过121℃灭菌20min。具体地，所述菌株的活化条件为：10℃。具体地，所述菌株的发酵条件为：10℃。具体地，所述菌株活化和发酵时摇床转速均为180rpm。本专利技术实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本专利技术实施例提供了一种产二十碳五烯酸的菌株及其应用，该四株产二十碳五烯酸的菌株均为野生型菌株，能够满足人体对EPA的需要，这四种野生型高产菌株丰富了微生物合成EPA的资源库，并可用于商业化生产，同时为PKS途径的研究提供材料，为高产ω-3VLCPUFAs工程菌株的构建奠定基础，此外，该应用方法可进一步提高菌株产二十碳五烯酸的能力，从而通过该菌株获得更多的二十碳五烯酸。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例提供的菌株6-42的脂肪酸组分的百分比含量与EPA甲酯标品对比图；图2是本专利技术实施例提供的菌株6-42的气相色谱图；图3是本专利技术实施例提供的EPA甲酯标品的气相色谱图；图4是本专利技术实施例提供的琼脂糖凝胶电泳图。本专利技术实施例提供的四种菌株均于2016年6月6日送往中国典型培养物保藏中心进行保藏，保藏地址：中国湖北省武汉市珞珈山武汉大学，四种菌株分类命名分别为：Nocardioidesplantarum、Compostimonassuwonensis、Flavobacteriumomnivorum和Shewanellabaltica；保藏编号分别为：CCTCCM2016309、CCTCCM2016311、CCTCCM2016310和CCTCCM2016312。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术实施方式作进一步地详细描述。实施例本专利技术实施例提供了一种菌株在产二十碳五烯酸中的应用，该应用包括以下步骤：活化和发酵，菌株的活化条件为：0-15℃，摇床转速为180±10rpm；菌株的发酵条件为：0-15℃，摇床转速为180±10rpm。本实施例选取6批菌株，6批菌株均由中国典型培养物保藏中心(Chinacenterfortypeculturecollection，CCTCC)提供，6批菌株均采自挪威斯瓦尔巴群岛新奥尔松地区(Ny-Alesund，SvalbardArchipelago，Norway)。其中，第一批和第二批均采自该地区的冰川前端土壤，地理坐标分别为(78°54’N，12°06’E&78°53’N，12°10’E)；第三批采自该地区的苔原冻土带土壤，位于(78°53’N，12°09’E)；第四批和第五批均采自该地区的Stuphallet悬崖断层，分别位于(78°57.575’N，11°36.288’E&78°57.521’N，11°36.447’E)；第六批采自该地区的MidtreLovenbreen冰川前端溶出区本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种产二十碳五烯酸的菌株，其特征在于，所述菌株包括：Nocardioides plantarum、Compostimonas suwonensis、Flavobacteriu momnivorum、和Shewanella baltica，其中，Nocardioides plantarum于2016年3月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2016309，Compostimonas suwonensis于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2016311，Flavobacteriu momnivorum于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2016310，Shewanella baltica于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2016312。
【技术特征摘要】
1.一种产二十碳五烯酸的菌株，其特征在于，所述菌株包括：Nocardioidesplantarum、Compostimonassuwonensis、Flavobacteriumomnivorum、和Shewanellabaltica，其中，Nocardioidesplantarum于2016年3月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016309，Compostimonassuwonensis于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016311，Flavobacteriumomnivorum于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016310，Shewanellabaltica于2016年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2016312。2.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述保藏编号为CCTCCM2016309的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:1所示，所述保藏编号为CCTCCM2016311的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:2所示，所述保藏编号为CCTCCM2016310的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:3所示，所述保藏编号为CCTCCM2016312的菌株16SrDNA序列如序列表中SEQINNO:4所...
【专利技术属性】
技术研发人员：万霞，彭云峰，陈文超，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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