本发明专利技术提供了一种预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液及其制备方法.本发明专利技术提供了以有益菌群发酵中草药作为饲料添加剂来预防鱼虾细菌病的一种方法。所述中草药包含黄芪，党参，仙人掌，黄莲，黄芩，板蓝根，栀子，穿心莲，大叶桉，知母，丹皮，桔梗，生山楂，木香等。上述中草药经挑选、粉碎、浸泡、煎煮、发酵而制得预防鱼虾细菌病的饲料添加剂，在发酵过程中使用有效益生菌种主要为特基拉芽孢杆菌，紫色链霉菌，布拉氏酵母菌，保加利亚乳杆菌，球形红假单胞菌等。本发明专利技术的中草药活性发酵液具有预防鱼虾细菌病兼具促生长、增强免疫力的功效，并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及到一种预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液及其制备方法，特别是涉及一种利用有益生物菌群发酵植物中草药制成的具有预防鱼虾细菌病效果的高效活性发酵液及其制备方法。
技术介绍
近几十年来，以抗生素、激素、防腐剂为主的饲料药物添加剂给鱼虾等水产养殖业生产带来了很大的效益。然而，随着它们的广泛应用，也出现了一些弊端，比如耐药菌株的产生、抗生素在畜禽，鱼虾水产品中的残留及二重感染等，这些问题受到国际社会的普遍关注与担忧，越来越多的国家已纷纷禁止或限制多种抗生素、激素、防腐剂作为饲料添加剂。抗生素、激素、防腐剂等药物饲料添加剂的应用受到严重的挑战。因此，开发和推广一种既能有效替代抗生素、激素、防腐剂又能有效地保健、防疫、促生长的新型绿色饲料添加剂已成为当务之急。鱼虾细菌病害（如弧菌）的病害问题始终是阻碍鱼虾养殖业可持续发展的瓶颈制约，特别是随着鱼虾养殖的快速发展和集约化养殖程度的提高，以及采用人工饲料喂常用的抗病化合药如抗生素、激素、防腐剂又存在着较易产生耐药性且副作用大的缺点。而在医学领域，中药可以抗细菌与病毒已被临床和实验所证实，能抗细菌与病毒的中草药多属于解表药和清热药。表证相当于现代医学临床的上呼吸道感染和传染病初期的症状；里热证则主要包括现代医学的多种急性传染病、感染性热性病。中草药可以通过发汗、解热、镇静镇痛、镇咳祛痰平喘、抗炎、抗过敏、抗菌、抗病毒及促进机体免疫功能（解表药）和抗病原微生物、抗细菌毒素、解热抗炎、促进机体免疫功能及抗血凝、抗DIC、改善血液流变性、保肝利胆（清热药）等药理作用达到防治流感病的目的。现有防治鱼虾细菌病的专利基本上都是将中草药或直接加入饲料中或进行煎取提取，但都存在有效成份利用率低，添加量高等缺点。直接利用益生菌群发酵中草药，能破坏中草药的细胞壁，大大提高中草药的有效成份的利用率，并在发酵过程中产生多种促生长因子与益生菌，对鱼虾的生长发育能够有效改善肉质，提高抗病力，增强免疫力的功效，并具有易于使用，中草药用量少，活菌含量高以及具有无残留、无耐药性等优点；结合中草药与益生菌的功效。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供具有预防鱼虾细菌病效果的中草药活性发酵液及其制备方法。本专利技术的另外一个目的提高中草药的有效成份的利用率，减少中草药的用量。本专利技术的另一个目的提供本专利技术中草药活性发酵液在预防鱼虾细菌病的应用。本专利技术用于预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液是在大量调查的基础上，根据产品的设计功用要求对220多种中草药进行筛选，依据传统的中药的君臣佐使、七情配伍、十八反、十九畏等理论，逐个筛选并对筛选出的中草药有效成份、抑菌作用进行提取、验证，最终确实配方。再从420多种有益微生物中筛选出5种能够共生共存，并且能够大大提高中草药的有效成份的利用率，在发酵过程中产生多种促生长因子的益生菌。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液，由以下重量份的原料制成：黄芪3-10份，党参5-10份，仙人掌6-12份，黄莲4-8份，黄芩4-8份，板蓝根5-10份，栀子5-10份，穿心莲5-10份，大叶桉5-10份，知母5-10份，丹皮5-10份，桔梗5-10份，生山楂12-30份，木香12-20份，糖蜜40-60份，水850份，100亿CFU/ml特基拉芽孢杆菌5-15份，1亿CFU/ml紫色链霉菌5-15份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份，100亿CFU/ml保加利亚乳杆菌5-15份，10亿CFU/ml球形红假单胞菌5-15份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液。其中，预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液的制备方法，包括如下步骤：⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪3-10份，党参5-10份，仙人掌6-12份，黄莲4-8份，黄芩4-8份，板蓝根5-10份，栀子5-10份，穿心莲5-10份，大叶桉5-10份，知母5-10份，丹皮5-10份，桔梗5-10份，生山楂12-30份，木香12-20份，糖蜜40-60份，水850份。浸泡30分钟后，加热至95℃，保温两小时，冷却至30℃；⑶、在步骤⑵制取的冷却液加入100亿CFU/ml特基拉芽孢杆菌5-15份，1亿CFU/ml紫色链霉菌5-15份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份；30℃-33℃，开搅拌120-160r/min，每分钟通无菌空气量与发酵液体积比为1：1-1.5:1；发酵36小时后，再向发酵罐中加入100亿CFU/ml保加利亚乳杆菌5-15份，10亿CFU/ml球形红假单胞菌5-15份，30-35℃静止培养120-150小时，检测其pH低于4.0，活菌含量达到10亿CFU/ml，即可结束发酵；⑷、放出菌液，包装成品。其中，预防鱼虾细菌病的使用方法为添加在日常饲料中搅拌均匀，添加比例控制在0.1%-0.2%；或直接全池泼水，添加量为1-2L/亩。其中，在步骤⑶中的特基拉芽孢杆菌、紫色链霉菌、布拉氏酵母菌、保加利亚乳杆菌、球形红假单胞菌的生产可采用现有技术，本专利技术提供以下方法：①、特基拉芽孢杆菌液体菌种的制备取出菌种保藏管，用LB固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升LB培养基中，在培养箱中30℃震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至装有2L的特基拉芽孢杆菌液体菌种培养基的5L大三角瓶中，30℃震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，芽孢含量超过100亿CFU/ml，即可作为特基拉芽孢杆菌液体菌种接种。其中所述LB固体培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂20g，水1000mL，pH7.2。其中所述特基拉芽孢杆菌液体菌种培养基：葡萄糖5g/L，玉米粉25g/L，豆粕粉30g/L，硫酸镁0.2g/L，硫酸锰0.5g/L，磷酸二氢钾0.2g/L，碳酸钙5g/L，pH7.2。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。②、紫色链霉菌菌种的制备取出菌种保藏管，用PDA固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落划线至装有PDA固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中30℃培养3-5天，待菌种产生大量的孢子后，用无菌生理盐水刮下，调整紫色链霉菌孢子浓度为1亿CFU/ml，即为紫色链霉菌菌种。其中所述的PDA固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，琼脂20g，水1000mL。③、布拉氏酵母菌液体菌种的制备取出菌种保藏管，用PDA固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升PDA培养基中，在培养箱中30℃震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至装有布拉氏酵母菌种子培养基的5L大三角瓶中，每个装液量为2L，30℃震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过10亿CFU/ml，即可作为布拉氏酵母菌液体菌种接种。其中所述的PDA固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，琼脂20g，水1000mL。其中所述的布拉氏酵母菌种子培养基：葡萄糖20g/L，酵母膏5g/L，蛋白胨5g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁0.5g/L。各培养基灭菌的条本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液，其特征在于，由以下重量份的原料制成：黄芪3‑10份，党参5‑10份，仙人掌6‑12份，黄莲4‑8份，黄芩4‑8份，板蓝根5‑10份，栀子5‑10份，穿心莲5‑10份，大叶桉5‑10份，知母5‑10份，丹皮5‑10份，桔梗5‑10份，生山楂12‑30份，木香12‑20份，糖蜜40‑60份，水850份，100亿CFU/ml特基拉芽孢杆菌5‑15份，1亿CFU/ml紫色链霉菌5‑15份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5‑15份，100亿CFU/ml保加利亚乳杆菌5‑15份，10亿CFU/ml球形红假单胞菌5‑15份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液。
【技术特征摘要】
1.一种预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液，其特征在于，由以下重量份的原料制成：黄芪3-10份，党参5-10份，仙人掌6-12份，黄莲4-8份，黄芩4-8份，板蓝根5-10份，栀子5-10份，穿心莲5-10份，大叶桉5-10份，知母5-10份，丹皮5-10份，桔梗5-10份，生山楂12-30份，木香12-20份，糖蜜40-60份，水850份，100亿CFU/ml特基拉芽孢杆菌5-15份，1亿CFU/ml紫色链霉菌5-15份，10亿CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份，100亿CFU/ml保加利亚乳杆菌5-15份，10亿CFU/ml球形红假单胞菌5-15份；将上述中草药经粉碎、浸泡、加热保温、发酵而制得预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液。2.根据权利要求1所述的预防鱼虾细菌病的中草药活性发酵液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：⑴、将从市场上购买的各种中草药单独粉碎成100目细粉；⑵、在发酵罐中依次加入：黄芪3-10份，党参5-10份，仙人掌6-12份，黄莲4-8份，黄芩4-8份，板蓝根5-10份，栀子5-10份...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋常德，胡艳晖，
申请(专利权)人：佛山市艳晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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