一种微生物菌剂及其在防治便秘上的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种微生物菌剂及其在防治便秘上的应用，具体是一种是由解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciensYHSH‑58发酵制备而成微生物菌剂及其在防治便秘上的应用，其中，解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciensYHSH‑58菌种已在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC NO．13664，保藏日期为2017年2月16日。本发明专利技术不仅扩大了解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciensYHSH‑58的应用范围，提高了其应用价值，而且给便秘的防治带来了更好的效果。

A Microbial Bacterial Agent and Its Application in the Prevention and Treatment of Constipation

The invention discloses a microbial agent and its application in the prevention and treatment of constipation, in particular a microbial agent prepared by fermentation of Bacillus amyloliquefaciens YHSH 58 and its application in the prevention and treatment of constipation. Among them, Bacillus amyloliquefaciens YHSH 58 strains of Bacillus amyloliquefaciens have been used in No. 3 Hospital of Beichen West Road, Chaoyang District, Beijing, China. The General Microbial Center of the Microbial Species Preservation and Management Committee has the number CGMCC NO. 13664 and the date of preservation is February 16, 2017. The invention not only enlarges the application scope of Bacillus amyloliquefaciens YHSH_58, improves its application value, but also brings better effect to the prevention and treatment of constipation.

【技术实现步骤摘要】
一种微生物菌剂及其在防治便秘上的应用
本专利技术属于微生物
，涉及一种微生物菌剂及其在防治便秘上的应用，具体是一种由解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensYHSH-58制备而成的微生物菌剂在防治便秘上的应用。
技术介绍
便秘是临床上最常见的消化系统疾病，其发病情况在不同地区和学者的报道中各有不同，总体而言是西方高于东方，女性高于男性，老年人高于青年人，儿童患病也普遍存在。据调查，西方人群便秘的发病率约在6%-23%，我国地域范围辽阔，各地发病率调查结果不尽相同:北京市常住人口1870岁城乡居民6.07%人群患有便秘，男女比例为l:4.59;天津市15岁以上常住人口的便秘患病率为4.43%，男女比例1:2.75;广州市的调查结果显示，便秘患者随年龄增长而明显增加，60岁以上老人总患病率为7.3%。北京、上海、广州、沈阳、西安、成都6个城市中60岁以上老人便秘的发病率高达15%-20%，并且发病率随年龄增长而增加，乡村(12.3%)>城市(10.9%)，北方(17.5%)>南方(7.0%)，女性(12.2%)>男性(10.5%)。便秘是指各种原因引起的排便困难、排便次数减少、或排便不尽感，可分为功能性便秘和继发便秘两类。便秘的发生可能与饮食中纤维素含量少、液体量摄入不足、遗传易感、胃肠运动、胃肠激素、环境影响、精神心理等多种因素有关。现代先进技术大量运用于便秘这种常见疾病的研究加深了人们对于其发病原因发病机制的认识。西医对于便秘的诊断较为明确，治疗方法主要采用口服药物治疗，常用药物包括容积性泻剂、刺激性泻剂、渗透性泻剂、润滑性泻剂、促动力药物等。这些药物对于缓解便秘近期疗效令人满意，但是远期疗效相对较差。部分药物长期不合理使用容易导致不良反应，如葱酮类药物长期使用可致水、电解质失去和结肠功能障碍，还可造成患者对药物的依赖性;盐类泻药中的镁离子大约20%可被肠道吸收，肾功能障碍病人或中枢抑制的病人可能发生毒性反应。中医治疗功能性便秘具有中医的特色和优势，但是常用的中药（如大黄，番泻叶，芦荟等含有恩醌类的刺激性泻药），这些药物对于缓解便秘近期疗效令人满意，但是远期疗效相对较差。长期使用普遍疗效不佳，而且在治疗上忽视本虚标实这一基本病机，有的单纯祛邪，有的单纯补虚，效果不理想。近年来功能性便秘的治疗有了新的发展，出现了心理疗法、生物反馈治疗等方法，临床上颇有疗效，但这些只可作为药物治疗便秘的辅助手段。近年来，对益生菌的研究和应用越来越广泛，在人类健康中起了非常重要的作用。解淀粉芽孢杆菌是一种产芽孢、需氧的革兰氏阳性菌，具有抗逆性强、抑菌谱广、代谢产物丰富等特点，作为益生菌添加在饲料中，通过抑制病原菌粘附、生物夺氧、拮抗病原菌、分泌多种消化酶等，营造健康肠道环境，促进营养物质吸收利用，提高畜禽健康水平。但其还没有被应用到人用益生菌上，本专利技术通过大量试验发现一株解淀粉芽孢杆菌，对防治便秘效果非常好的一株动物肠道分离菌。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种微生物菌剂在防治便秘上的应用，具体是提供一种由解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensYHSH-58制备而成的微生物菌剂在防治便秘上的应用。该菌种已在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNO．13664，保藏日期为2017年2月16日（在专利号CN2017114966711中已经公开）。其中,包括解淀粉芽孢杆菌YHSH-58制备的菌剂单独应用或与其他药物联合应用。其中，所述菌剂包括药品、保健食品、食品、饮品。其中，所述菌剂所指有效剂量是指解淀粉芽孢杆菌YHSH-58总活菌数不能低于5×106CFU/g。其中，本专利技术的微生物菌剂（也可称解淀粉芽孢杆菌制剂）的制备可以按以下步骤制备（也可以用其它方法制备）：一、取出菌种保藏管，用LB固体培养基划平板进行复苏，37℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升LB培养基中，在培养箱中37℃震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至装液量为2LLB培养基的5L大三角瓶中，37℃震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，活菌含量超过20亿/毫升，即可作为解淀粉芽孢杆菌液体菌种；二、将步骤一培养的解淀粉芽孢杆菌液体菌种作为种子，接种至600L发酵培养基，接种量为10%，开搅拌120r/min，每分钟通气量液气比1：1，37℃培养24-36小时，待芽孢含量不低于200亿CFU/ml，即可结束发酵，无菌灌装得到成品解淀粉芽孢杆菌菌剂；或得到发酵液后加上糊精进行喷雾干燥，得到解淀粉芽孢杆菌粉剂，其粉剂芽孢含量不低于100亿CFU/g；其中所述LB培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.2，固体培养基中加入琼脂2%；其中所述发酵培养基：大豆分离蛋白粉60g/L，葡萄糖15g/L，可溶性淀粉10g/L，蛋白胨5g/L，硫酸镁0.3g/L，硫酸锰0.05g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，pH7.2；各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌YHSH-58在专利号CN2017114966711中已经公开了其能够有效预防或治疗孤独症，明显减少孤独症状，且无任何毒副作用，应用依从性好，是预防或治疗孤独症的新方法、新突破。在防治孤独症的过程中，发现服用过解淀粉芽孢杆菌YHSH-58菌剂的人员，其便秘症状能快速转好，而且在长期使用过程中不复发，效果依然显著，因此拓宽了其使用范围。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌制剂能够有效预防或治疗便秘，明显快速减少便秘症状，且无任何毒副作用，应用依从性好，经1-2个疗程，防治便秘总有效可达100%，治愈率达92%，是预防或治疗便秘的新菌株。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌能有效防治便秘可能从下面几个方面起到一定的作用：本专利技术的解淀粉芽孢杆菌YHSH-58能够抑制洛呱丁胺诱导的便秘造成的小鼠粪便重量、颗粒数和含水量下降，且效果优于整肠生地衣芽孢杆菌。（洛哌丁胺具有抑制肠道蠕动、增加粪便排空时间等特性，因此，其诱导的便秘小鼠具有较少粪便粒数、重量等特点。）本专利技术利用肠道推进实验来探索解淀粉芽孢杆菌YHSH-58对肠道蠕动的促进作用。结果显示解淀粉芽孢杆菌YHSH-58组小肠墨汁推进长度能够比便秘模型组至少快153%，提示解淀粉芽孢杆菌YHSH-58能够加快小肠蠕动并具有显著通便效果。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌能够有效提高便秘小鼠粪便短链脂肪酸的含量。主要是可能芽孢杆菌进入小鼠肠道后，快速消耗肠道中的空气或者芽孢杆菌的某些代谢产物，从而促进了肠道中的厌氧菌如乳酵杆菌，丁酸菌的繁殖，从而导致肠道PH下降与短链脂肪酸的增加；能够促进结肠短链脂肪酸的产生，并促进结肠上皮细胞与粘膜损伤的修复。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌可改善胃肠道间质细胞(ICC)的c-kit基因表达，从而增加结肠的蠕动性能，促进排便。解淀粉芽孢杆菌能够影响结肠蠕动速率、抑制致病菌生长，并且能够促进短链脂肪酸的生成短链脂肪酸和乳酸能调节肠道的酸碱度、降低pH，这些因素可能会对结肠蠕动和缓解便秘产生有效的作用。具体实施方式实施例1本专利技术微生物菌剂（解淀粉芽孢杆菌菌液或粉剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微生物菌剂，其特征在于，此微生物菌剂是由解淀粉芽孢杆菌

【技术特征摘要】
1.一种微生物菌剂，其特征在于，此微生物菌剂是由解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensYHSH-58发酵制备而成，其中，解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensYHSH-58菌种已在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋常德，胡艳晖，黄进，
申请(专利权)人：佛山市艳晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44