一种血清碘定量测定试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种血清碘定量测定试剂盒，其是利用酸消解方法消化血清样品然后利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用,通过测定反应体系中Ce4+吸光度值的变化，利用碘浓度与吸光度值的对数呈线性关系计算碘含量。本试剂盒的建立主要包括消解条件的选择、反应体系的确定、方法验证等三个方面的工作，克服了现有方法试剂配制复杂、污染环境、损害检测者健康、仪器昂贵等缺点。本方法主要用于检测人体及动物血清中碘的含量，便于在我国省级、地市级和县区级疾病预防控制部门和各级医疗机构开展，能够满足疾病控制及临床上个体碘营养评价的需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种定量测定试剂盒，特别涉及一种血清碘定量测定试剂盒，属于应用
中的定量检测类产品。
技术介绍
目前，寻求检测个体碘营养水平的人群日益增多，临床上暂时采用的方法是评价一次随意尿样来检测碘水平，但尿碘只能反映体内碘的排出量，并不能代表被甲状腺利用的具有生物活性的碘离子水平，血清碘浓度才能真实地反映机体的碘营养状况。目前，文献中描述的血清碘定量测定方法有很多，如温和酸消化法测血清总碘含量(胡梅，泽仁拥西等，中国地方病学杂志.2000，19(1)：71-72.)，该方法利用硝酸和氯酸于110℃-115℃消化血清2.5h，然后利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用，通过测定反应体系中吸光度值的变化，利用碘浓度与吸光度值的对数呈线性关系求出碘含量；氯酸法用于血清碘测定的方法学研究(王欣，刘源，孙晓军等，中国卫生检验杂志.2006，16(8)：916-918.)，该方法利用氯酸先于100℃预热10min后升温至130℃消化血清1h,后利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用，通过测定反应体系中吸光度值的变化，利用碘浓度与吸光度值的对数呈线性关系求出碘含量；ICP-MS分析人血清中微量元素(沈雅珍,徐子刚,华伟民等，广东微量元素科学，1996，3(6)：51-55.)，该方法采用多元素内标法校正基体效应引起的误差,加入内标元素Sc、In，分别校正质量数<100和100～180的元素测定，并对一些元素选取其同位素峰测定，以避开多原子离子等的质谱干扰，样品制备为血清样2ml，加入内标元素，用1％稀硝酸稀释至5ml，其中包括血清碘测定。目前，国内外有部分大医院采用ICP-MS方法测定血清碘含量。这些方法存在以下问题：(1)温和酸法消化血清需要用到硝酸，硝酸消化后的分解产物对下一步测定存在一定的干扰。(2)温和酸法、氯酸法测血清碘均需用到氯酸，但是氯酸配制过程较为复杂、易受到污染，如果不严格按照方法配制，氯酸浓度可能达不到要求，并且存放过程易分解，而且氯酸配制过程对于实验人员的健康有损害。(3)前述两种方法在配制亚砷酸溶液时所需有毒试剂三氧化二砷较多。(4)ICP-MS法测血清碘所需实验仪器较为昂贵，实验操作及数据分析需相关专业技术人员进行，难于在基层推广应用；血清用量较大，一般为0.5-2ml。本项目组自主研制了一种新的血清中碘的酸消化定量测定方法，该方法具有易于操作、检测数据可信度高、稳定性好、污染低、血清用量少等优点。鉴于市场上没有血清碘定量检测的相关产品，本项目组在自主研制的血清碘定量测定方法的基础上，研发了一种血清碘定量测定试剂盒。
技术实现思路
针对现有问题，本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种用于测定血清中碘含量的试剂盒。本专利技术的目的在于通过该试剂盒，对血清进行消化，然后利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用,通过测定反应体系中Ce4+吸光度值的变化，利用碘浓度与吸光度值的对数呈线性关系计算碘含量，克服了现有血清碘定量测定方法试剂配制复杂、易污染、易分解、危险性试剂用量多、实验仪器昂贵、所需血清量较多的缺点。为了达到上述目的，本专利技术所采用的技术手段为：一种血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，包括以下组分：100μg/mL的碘标准储备溶液、70％～72％的高氯酸(消解液R1)、2.0mol/L氯酸钠溶液(消解液R2)、0.025mol/L的亚砷酸溶液(还原剂R3)及Ce4+浓度为0.025mol/L的硫酸铈铵溶液(氧化剂R4)。所述的血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，该试剂盒用于检测人体或动物体血清中碘含量。所述的血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，该试剂盒用于血清碘含量测定的方法为：(1)采集不少于2mL血液，室温静置0.5h，于3000r/min离心10min，分离出血清，严密封口，保存；(2)利用100μg/mL的碘标准储备溶液制备不同浓度的碘标准使用系列溶液；(3)取0.1mL不同浓度的碘标准使用系列溶液及血清样于玻璃试管，各管分别加入70％～72％的高氯酸和2.0mol/L氯酸钠溶液，混匀后，置于消化控温加热装置中，消化，冷却至室温；(4)向各管分别加入0.025mol/L的亚砷酸溶液，充分混匀后，静置15min，使其温度达到平衡；(5)秒表计时，依序每管间隔相同时间，向各管分别加入Ce4+浓度为0.025mol/L的硫酸铈铵溶液，立即混匀；(6)待标准系列中碘浓度最高的管的吸光度值达到0.10左右，依序每管间隔相同时间，于400nm波长下，以纯水作参比，测定各管吸光度值；(7)以碘浓度为横坐标，吸光度值的对数为纵坐标绘制标准曲线；(8)用最小二乘法进行线性回归，得回归方程。所述的血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，步骤(3)中，消化控温加热装置温度为130℃±2℃；步骤(5)及步骤(6)中间隔的时间为20～30s。本试剂盒应用过程中所涉及的化学方程式如下：消化阶段：加入亚砷酸溶液：IO3-+3AsO33-→I-+3AsO43-加入硫酸铈铵溶液：本专利技术所用高氯酸为直接购买的试剂，氯酸钠溶液配制简单，存放时间较长并较为稳定；测定过程所需亚砷酸溶液及硫酸铈铵溶液浓度相对现有技术均有较大程度降低，减少了对环境的污染以及对实验人员的危害；检测所需血清量较少；检测结果准确度较高；适合大批量血清样品的检测。本试剂盒的研发，满足了临床上个体碘营养评价以及疾病预防控制部门中血清碘定量测定的需求，为进一步制定血清碘正常值标准提供定量测定基础，进而解决碘缺乏病防治的重要问题，逐步实现因地制宜、分类指导、科学补碘的防治策略，助力实现因人而异、知情选择的补碘方式。同时，本试剂盒也可以用于科研工作中动物血清碘含量的检测，为科研工作中有关血清碘定量检测提供便捷的方法。因此，本产品的研发具有较大的社会效益。附图说明图1为本专利技术血清中碘定量测定试剂盒的示意图。图2为本专利技术标准曲线图，横坐标为碘的浓度(μg/L)，纵坐标为吸光度值的对数。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。本产品试剂配制用纯水符合GB/T6682中二级水规格。实施例1一种血清碘定量测定的试剂盒制备1、100μg/mL的碘标准储备溶液的配制准确称取经105～110℃烘干至恒重的碘酸钾0.1686g于烧杯中，用纯水溶解后定量转移入1000mL容量瓶中，用纯水定容至刻度，避光保存。应用碘标准储备溶液配制的标准系列溶液，在检测时有较好的线性关系及吸光度值范围，能够满足人体及动物血清碘含量的检测。2、70％～72％的高氯酸(消解液R1)及2.0mol/L氯酸钠溶液(消解液R2)的配制2.1消解液选择血清与其他样品相比，其基底成分复杂，无机离子含量广泛，蛋白质含量高。因此消解液的选择对产品的研发尤为重要。通过查阅有关文献及相关知识，本项目组人员试验了多种消解液，包括过硫酸铵和硫酸锌、盐酸与双氧水和过硫酸铵、硝酸和双氧水、硝酸和高氯酸、氯酸钠和盐酸、氯酸钠和硫酸、氯酸钠与硫酸和氯化钠本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，包括以下组分：100μg/mL的碘标准储备溶液、70％～72％的高氯酸、2.0mol/L氯酸钠溶液、0.025mol/L的亚砷酸溶液及Ce4+浓度为0.025mol/L的硫酸铈铵溶液。

【技术特征摘要】
1.一种血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，包括以下组分：100μg/mL的碘标准储备溶液、70％～72％的高氯酸、2.0mol/L氯酸钠溶液、0.025mol/L的亚砷酸溶液及Ce4+浓度为0.025mol/L的硫酸铈铵溶液。2.如权利要求1所述的血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，该试剂盒用于检测人体或动物体血清中碘含量。3.如权利要求1所述的血清碘定量测定的试剂盒，其特征在于，该试剂盒用于血清碘含量测定的方法为：(1)采集不少于2mL血液，室温静置0.5h，于3000r/min离心10min，分离出血清，严密封口，保存；(2)利用100μg/mL的碘标准储备溶液制备不同浓度的碘标准使用系列溶液；(3)取0.1mL不同浓度的碘标准使用系列溶液及血清样于玻璃试管，各管分别加入70％～72％的高氯酸和2.0mol...

【专利技术属性】
技术研发人员：申红梅，陆征，张亚平，纪晓红，姜鹏，刘颖，刘丽香，
申请(专利权)人：哈尔滨医科大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23