一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基制造技术

技术编号:14028666 阅读:297 留言:0更新日期:2016-11-19 14:44
本发明专利技术提供一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基,所述培养基由以下质量体积百分含量的各组分组成:1%普通葡萄糖蛋白胨水,1%的肌酐。应用本发明专利技术的培养基进行VP试验能够加速细菌生长,从而减少VP试验所需时间,使时间缩短至4‑6个小时。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基
技术介绍
VP试验的反应原理为:有些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸,再进一步将丙酮酸脱羟变为乙酰甲基甲醇,在碱性环境中被空气中的氧氧化为二乙酰,二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的胍基发生反应生成红色的化合物。主要用于肠杆菌属细菌的鉴别。沙雷氏菌、阴沟肠杆菌等VP反应阳性,大肠埃希菌、沙门氏菌、志贺氏菌等VP反应阴性。现有的VP试验方法为:根据实验室使用量,配制300-500ml 1%普通葡萄糖蛋白胨水,取2ml分装于12×150mm试管中,加盖硅胶塞,115℃ 10磅15分钟高压灭菌。试剂冷却后,装塑料袋扎口,4℃冰箱保存。反应试剂:甲液:6% α-萘酚酒精溶液;乙液:40% 氢氧化钾。试验方法:挑取纯培养物接种培养基。于35℃培养,培养18~24h。结果观察:培养后,加入Barritt VP试剂甲液和乙液各3滴,振摇后观察结果,于数分钟内呈红色时为阳性,如无红色出现即为阴性。质控菌株:阳性菌株: ATCC700603 肺炎克雷伯菌;阴性菌株: ATCC25922大肠埃希菌。上述VP试验传统方法检测时间长,需用培养基18-24小时后,方能查看结果,耗时长。
技术实现思路
本专利技术提供了一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基,能够加速细菌生长,从而减少VP试验所需时间。本专利技术的第一个目的是提供一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基,所述培养基由以下质量百分含量的各组分组成:1%普通葡萄糖蛋白胨水,1%的肌酐。质量体积百分比的单位是g/ml。本专利技术的第二个目的是提供用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基的制备方法,在1%普通葡萄糖蛋白胨水中加入1%的肌酐,高压灭菌即得。本专利技术的第三个目的是提供用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基在VP试验中的应用。本专利技术的第四个目的是提供一种VP试验方法,步骤如下:(1)制备培养基:在1%普通葡萄糖蛋白胨水中加入1%的肌酐,高压灭菌;(2)配制反应试剂:甲液:6% α-萘酚酒精溶液;乙液:40% 氢氧化钾;(3)进行试验:挑取待检测的纯培养物接种步骤(1)制备的培养基,于35℃培养,培养4~6h;(4)结果观察:培养后,加入甲液和乙液各3滴,振摇后观察结果,于数分钟内呈红色时为阳性,如无红色出现即为阴性。应用本专利技术的培养基进行VP试验能够加速细菌生长,从而减少VP试验所需时间,使时间缩短至4-6个小时。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术,但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为市售。如无特殊说明,本专利技术中“%”为质量体积百分比。实施例1本专利技术提供一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基,配方为:1%普通葡萄糖蛋白胨水,1%的肌酐。本专利技术的一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基的制备方法为:根据实验室使用量,配制1%普通葡萄糖蛋白胨水300~500ml,再加入1%的肌酐,为加速反应、快速准确鉴定,本申请人在普通1%葡萄糖蛋白胨水基础培养基中另加1%肌酐。取0.5ml加入2ml西林瓶中,封口。115℃10磅15分钟高压灭菌。试剂冷却后,室温保存。应用本专利技术的改良培养基进行VP试验的具体方法为:反应试剂:甲液:6% α-萘酚酒精溶液;乙液:40% 氢氧化钾。试验方法:挑取待检测的纯培养物接种本专利技术的改良培养基,于35℃培养,培养4~6h。结果观察:培养后,加入Barritt VP试剂甲液和乙液各3滴,振摇后观察结果,于数分钟内呈红色时为阳性,如无红色出现即为阴性。质控菌株:阳性菌株: ATCC700603 肺炎克雷伯菌;阴性菌株: ATCC25922大肠埃希菌。分别应用不同的培养基,相同的VP试验条件及方法,对不同待检菌株进行试验,培养时间如表1所示,检测结果均相同。表1最后应说明的是:以上所述仅为本专利技术的优选实施例而已,并不用于限制本专利技术,尽管参照前述实施例对本专利技术进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本专利技术的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基,其特征在于:所述培养基由以下质量体积百分含量的各组分组成:1%普通葡萄糖蛋白胨水,1%的肌酐。

【技术特征摘要】
1.一种用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基,其特征在于:所述培养基由以下质量体积百分含量的各组分组成:1%普通葡萄糖蛋白胨水,1%的肌酐。2.权利要求1所述的用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基的制备方法,其特征在于:在1%普通葡萄糖蛋白胨水中加入1%的肌酐,高压灭菌即得。3.权利要求1所述的用来进行VP试验的改良葡萄糖蛋白胨水培养基在VP试验中的应用。4.一种VP试验方法,其...

【专利技术属性】
技术研发人员:车团结魏莲花邹凤梅刘刚常运朝张莹冯海霞
申请(专利权)人:兰州百源基因技术有限公司
类型:发明
国别省市:甘肃;62

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