一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法；利用金纳米粒子和甲胎蛋白标记抗体以及辣根过氧化物酶的静电吸附作用，制备多酶标记的金纳米粒子甲胎蛋白免疫探针，对甲胎蛋白(alpha fetoprotein AFP)，这种广泛存在原发性肝癌的蛋白标志物进行定性定量的检测，建立蛋白标志物检测的新方法，极大程度提高了检测灵敏度。本发明专利技术的特点在于：整个制备过程简单，适合于产业化生产；金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体，检测探针将同时具有免疫活性和酶催化活性，所得检测探针为多酶标记探针，实现了纳米领域的纳米增强效应，可有效提高检测灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纳米材料制备
，更具体的是涉及一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法。
技术介绍
近年来，随着人们的生活方式发生了急剧变化，精神压力也不断增大，我国肿瘤的发病率逐年攀升。在我国部分城市和农村，恶性肿瘤已成为导致居民死亡的“第一杀手”。世界卫生组织已经作出最新的权威性的结论，恶性肿瘤患者如果能在发病早期发现，治愈率可以达到80％以上，肿瘤的早期诊断与治疗已经成为近年来研究的热点。血清蛋白标志物检测肿瘤已经越来越引起人们的关注，蛋白标志物检测肿瘤简便无创，检测结果直观且可以定量，可以动态监测肿瘤患者，在临床上具有很高的应用价值。蛋白标志物可以是在恶性肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的，存在于细胞、组织或体液中，能够用一定方法来定量且能证实肿瘤存在的物质；也可以是由于机体对肿瘤产生反应，导致体内异常产生或升高的，可以反映肿瘤存在和生长的、能够监测肿瘤治疗和预后的一类物质，这些物质在正常人的体内不存在，或者在正常人体内出现的水平显著低于肿瘤患者体内的水平。甲胎蛋白是一种糖蛋白，正常情况下，这种蛋白主要来自胚胎的肝细胞，胎儿出生后本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法；其特征是步骤如下：(1)将氯金酸加入到反应器，加热煮沸后注入柠檬酸钠，冷却至室温，得到金纳米粒子(AuNPs)；(2)将上述金纳米粒子加入反应器，通过碳酸钾水溶液调节金纳米粒子pH为8.3～8.5，将甲胎蛋白标记抗体(Ab1)和辣根过氧化物酶(HRP)混合液与金纳米粒子混合，所得AuNPs、HRP和Ab1混合液在旋转混合架上旋转混匀后静置处理；(3)将牛血清白蛋白(BSA)加入到上述AuNPs、HRP和Ab1混合液封闭处理，离心得到多酶标记AuNPs‑HRP‑Ab1检测探针。

【技术特征摘要】
1.一种金纳米粒子偶联辣根过氧化物酶和甲胎蛋白标记抗体的制备方法；其特征是步骤如下：(1)将氯金酸加入到反应器，加热煮沸后注入柠檬酸钠，冷却至室温，得到金纳米粒子(AuNPs)；(2)将上述金纳米粒子加入反应器，通过碳酸钾水溶液调节金纳米粒子pH为8.3～8.5，将甲胎蛋白标记抗体(Ab1)和辣根过氧化物酶(HRP)混合液与金纳米粒子混合，所得AuNPs、HRP和Ab1混合液在旋转混合架上旋转混匀后静置处理；(3)将牛血清白蛋白(BSA)加入到上述AuNPs、HRP和Ab1混合液封闭处理，离心得到多酶标记AuNPs-HRP-Ab1检测探针。...

【专利技术属性】
技术研发人员：常津，武玉东，宫晓群，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12