本发明专利技术属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药大戟脂抗肿瘤有效提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤药物中的应用。维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，即为该提取物；或维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0-100:1的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:2-0:100的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，体积比100:2-0:100的石油醚：乙酸乙酯洗脱液干燥得到该提取物，或先用体积比100：0-100:3的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用纯甲醇洗脱，纯甲醇洗脱液干燥得到该提取物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药
，具体涉及一种维吾尔药大戟脂抗肿瘤有效提取物及其组合物的制备方法和其在制备抗脑胶质瘤、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌等恶性肿瘤药物中的应用。
技术介绍
本品为大戟科植物多脂大戟的树脂状分泌物，拉丁名：Euphorbium，维文名称：排日非云，别名：法而非荣、法刺夫荣、法刺夫云，等。多脂大戟(Euphorbia resinifera Berger)多年生灌木状草本，原产欧洲，非洲亦产，英国、前苏联等也有分布。大戟脂采收加工是在植物茎的棱缘处，以快刀切伤皮部，收集流出的乳汁，干燥后贮于密闭瓶内，置干燥、阴凉处。本品为不规则块状或滴状物。大小不等，直径可达3cm，暗黄色或黄棕色，新鲜者色略浅。质脆。气微，加热则有香脂样芳香，味辛辣而特异。粉末能强烈刺激黏膜并引起喷嚏。《拜地依药书》载：“大戟脂，是一种树的乳状分泌物。新鲜、气味强烈、透明、黄色者为上品，易溶于橄榄油中，药效期三年；四年以上者，变暗红色，不易在橄榄油中溶化者为次品。”根据上述维吾尔医本草所述药材特征和实物对照，与现代维吾尔医所用大戟脂一致。化学成分含大戟脑，大戟醇约为22％，另外，还含有蒲公英甾醇，大戟脂醇，β-榄香精，大戟酸，大戟双酮酸等。大戟脂具有生干生热，清除异常黏液质，强筋健肌，醒脑除紧，散寒止痛，燥湿退肿，通利肠阻，除白内障等功效，主治湿寒性或黏液质性疾病，如瘫痪，面瘫，昏迷，抽搐，颤动，坐骨神经痛，关节疼痛，腹水，肠梗阻，白内障等。《注医典》：“消除坏死骨质，消除肢体麻木，清除眼部有害物质，解毒虫之毒。治骨质坏死，肢体麻木，眼部有害物质，毒虫咬伤等。”《拜地依药书》：“祛寒健肌，燥湿强筋，开通肠阻，温肾壮腰。治面瘫，关节寒湿，肠梗阻，肾寒腰虚等。”本专利技术通过系统地筛选研究，意外地发现大戟脂提取物具有显著抗肿瘤活性，即大戟脂提取物对脑胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤的具有很好的预防及治疗作用，可以应用于癌症的预防和治疗。
技术实现思路
本专利技术所解决的技术问题是提供一种大戟脂提取物。本专利技术还提供了以大戟脂提取物为主要活性成分的组合物。本专利技术同时提供了大戟脂提取物及其组合物的制备和应用。本专利技术是通过如下技术方案实现的：维吾尔药大戟脂经有机溶剂(如优选甲醇)超声提取，提取液浓缩后，提取液浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现用甲醇提取物具有显著地抗肿瘤活性。该活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图1，TLC色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(6:1:1)，显色方法：香草醛-硫酸显色。维吾尔药大戟脂经有机溶剂(优选甲醇)超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱(石油醚：乙酸乙酯，比例见表1)，各石油醚：乙酸乙酯比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:0-100:1，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:2-0:100，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:2，体积比)洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。优选地，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:1，体积比)洗脱，继用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:2，体积比)洗脱，石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:2，体积比)洗脱液干燥即得，本专利技术抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图2，TLC色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(6:1:1)，显色方法：香草醛-硫酸显色。或维吾尔药大戟脂经有机溶剂(优选甲醇)超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱(石油醚：乙酸乙酯，比例见表1)，各石油醚：乙酸乙酯比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100：0-100:3，体积比)洗脱，继用纯甲醇洗脱，纯甲醇洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。优选地，先用石油醚：乙酸乙酯混合溶剂(石油醚：乙酸乙酯，100:3，体积比)洗脱，继用纯甲醇洗脱，纯甲醇洗脱液干燥即得，本专利技术的抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图3，TLC色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(6:1:1)，显色方法：香草醛-硫酸显色。具体，发现过程如下：1、维吾尔药大戟脂经甲醇超声提取物的制备取维吾尔药大戟脂20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0194A样品2g。2、石油醚：乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱方法和结果取维吾尔药大戟脂20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0194A样品2g上柱，甲醇溶解，共用甲醇15mL。上硅胶柱，拌样硅胶3mg，空白硅胶10g，玻璃柱内径1.8cm，石油醚：乙酸乙酯系统梯度洗脱(条件见表1)，柱体积25mL，每个梯度洗脱200mL，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱提取物，收率见表1，TLC分析结果见图4，图5，TLC色谱条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(6:1:1)，石油醚：乙酸乙酯：丙酮(3:1:1)，显色方法：香草醛-硫酸显色。表1,梯度(石-乙)体积(mL)编号重量(mg)100:00200SN0194A015.1100:01200SN0194A027.9100:02200SN0194A0399.3100:03200SN0194A04130.5100:04200SN0194A0567.9100:05200SN0194A067.9100:06200SN0194A075.3100:08200SN0194A082.8100:10200SN0194A097.0100:12200SN0194A1011.4100:14200SN0194A1112.6100:17200SN0194A1210.6100:20200SN0194A1316.1100:25200SN0194A1424.3100:30200SN0194A1526.1100:50200SN0194A1644.8100:100200SN0194A17111.50:100200SN0194A18161.7纯甲醇200SN0194A19273.43、抗肿瘤活性筛选方法和结果1)实验条件a)细胞株信息大鼠脑胶质瘤细胞株C6购于中国典型培养物保藏中心细胞库b)药品及试剂样品无菌条件下，DMSO溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度(DMSO≤1‰)。RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马生物技术研究本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种维吾尔药大戟脂提取物，其特征为，维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，即为该提取物；或维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0‑100:1的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:2‑0:100的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，体积比100:2‑0:100的石油醚：乙酸乙酯洗脱液干燥得到该提取物；或维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100：0‑100:3的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用纯甲醇洗脱，纯甲醇洗脱液干燥得到该提取物。
【技术特征摘要】
1.一种维吾尔药大戟脂提取物，其特征为，维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，即为该提取物；或维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0-100:1的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:2-0:100的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，体积比100:2-0:100的石油醚：乙酸乙酯洗脱液干燥得到该提取物；或维吾尔药大戟脂经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100：0-100:3的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用纯甲醇洗脱，纯甲醇洗脱液干燥得到该提取物。2.如权利要求1所述的维吾尔药大戟脂提取物，其特征为，提取用有机溶剂为，甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。3.如权利要求1或2所述的一种维吾尔药大戟脂提取物，其特征为，维吾尔药大戟脂经甲醇超声提取，提取液浓缩后，即为该提取物；或维吾尔药大戟脂经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:1的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，继用体积比100:2的石油醚：乙酸乙酯混合溶剂洗脱，体积比100:2的石油醚：乙酸乙酯洗脱液干燥得到该提取物；或维吾尔药大戟脂经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体...
【专利技术属性】
技术研发人员：王金辉，黄健，王书云，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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