本发明专利技术属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药铁力木抗肿瘤有效提取物及其组合物的制备方法和其在脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤的预防及治疗上的用途。所述的提取物通过如下方法获得：维吾尔药铁力木经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比100:14的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，石油醚：丙酮100:14混合溶剂洗脱液干燥后即得；或先用体积比100:17的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，继用体积比100:100的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，石油醚：丙酮100:100混合溶剂洗脱液干燥后即得。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药
，具体涉及一种维吾尔药铁力木抗肿瘤有效提取物及其组合物的制备方法或/和其在脑胶质瘤、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌等恶性肿瘤的预防及治疗上的用途。
技术介绍
本品为藤黄科铁力木属植物，学名Mesua ferrea L.。铁力木分布于云南，广西的藤县、容县、陆川，广东的信宜等地，至热带北缘。在广东、广西垂直分布多在海拔500-800米，而在云南最高可达1200米，铁力木为喜光性树种，幼苗稍耐萌。具有一定的抗寒、抗病虫害能力。分布区内年平均气温21℃以上。最低气温约零下3℃，能耐轻霜，但不耐严重霜冻。年降雨量1500mm以上。对土壤要求中等，土层深厚、湿润、肥沃的地方种植生长快速，枝叶茂盛。化学成分：种子含油脂为79％，提炼的种子油是西双版纳傣族佛寺里主要琰佛用的植物油，鲜花出油率为0.08％～0.11％，主要成分为β-马榄烯(36.39％)，其次为β-芹子烯(31.14％)，是化妆品或日用化工天然的调香原料。铁力木具有生干生热，温补心脏，爽心悦志，热身壮阳，燥湿补胃，止泻敛创，止血消痔等功效，主治湿寒性或粘液质性疾病，如寒性心虚、抑郁症、神经衰弱、身寒阳痿、湿性胃虚、腹泻及各种湿创、痔疮出血等。本专利技术意外地发现，铁力木除了具有抗食道癌、绒毛膜上皮癌的功效外，亦具有很好的脑胶质瘤、乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤的预防及治疗作用，可以应用到多种癌症的预防和治疗上。但是，对其抗肿瘤的有效成分一直不清楚，本专利技术通过系统地筛选研究，发现了铁力木的有效提取物具有显著的抗肿瘤活性，可以应用于肿瘤的预防和治疗。
技术实现思路
本专利技术所解决的技术问题是提供一种铁力木提取物，该提取物具有抗脑胶质瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、肝癌等恶性肿瘤的作用。本专利技术还提供了以铁力木提取物作为活性成分的药物组合物及其制备方法。本专利技术是通过如下技术方案实现的：维吾尔药铁力木经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：丙酮混合溶剂＝100:0-0:100梯度洗脱(石油醚：丙酮，比例见表1)，各石油醚：丙
酮比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:0，体积比)洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:1-100:14，体积比)洗脱，石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:1-100:14，体积比)洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。优选地，先用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:0，体积比)洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:14，体积比)洗脱，石油醚：丙酮100:14洗脱液干燥即得。本专利技术的抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取物从未见文献报道，其100:1-100:14洗脱液的TLC分析表征如图1，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(8:1:1)，显色方法：香草醛-硫酸显色。维吾尔药铁力木经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：丙酮混合溶剂＝100:0-0:100梯度洗脱(石油醚：丙酮，比例见表1)，各石油醚：丙酮比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:17，体积比)洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:20-100:100，体积比)洗脱，石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:20-100:100，体积比)洗脱液干燥后，具有显著地抗肿瘤活性。优选地，先用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:17，体积比)洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂(石油醚：丙酮，100:100，体积比)洗脱，石油醚：丙酮100:100洗脱液干燥即得。本专利技术的抗肿瘤活性的化合物，可以通过以上方法，得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该活性提取物从未见文献报道，其100:20-100:100洗脱液的TLC分析表征如图2，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(8:1:1)，显色方法：香草醛-硫酸显色。具体，发现过程如下：1、维吾尔药铁力木经甲醇超声提取物的制备取维吾尔药铁力木20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0073A样品1.6503g。2、石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果取维吾尔药铁力木20g，经100mL甲醇超声提取15min，提取液浓缩后，得提取物SN0073A样品1.6503g上柱，甲醇溶解，共用甲醇15mL。上硅胶柱色谱，拌样硅胶200mg,空白硅胶10g,玻璃柱内径2.0cm，石油醚：丙酮系统梯度洗脱(条件见表1)，柱体积11mL，每个梯度洗脱100mL，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：丙
酮梯度洗脱提取物，收率见表1，TLC分析结果见图3，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮(8:1:1)，显色方法：香草醛-硫酸显色。表1梯度(石-丙)体积编号100:00200SN0073A01100:01200SN0073A02100:02200SN0073A03100:03200SN0073A04100:04200SN0073A05100:05200SN0073A06100:06200SN0073A07100:08200SN0073A08100:10200SN0073A09100:12200SN0073A10100:14200SN0073A11100:17200SN0073A12100:20200SN0073A13100:25200SN0073A14100:30200SN0073A15100:50200SN0073A16100:100200SN0073A170:100200SN0073A18纯甲醇200SN0073A193、抗肿瘤活性筛选方法和结果1)实验条件a)细胞株信息大鼠脑胶质瘤细胞株C6购于中国典型培养物保藏中心细胞库b)药品及试剂样品无菌条件下，DMSO溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度(DMSO≤1‰)。RPMI Medium 1640培养基干粉购于美国GIBCO公司。胎牛血清购于北京元亨圣马生物技术研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴盐(MTT)。c)仪器CO2培养箱(SANYO，日本)垂直层流洁净工作台(上海上净净化设备有限公司)倒置生物显微镜(重庆光电仪器有限公司)低/高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)电子天平(奥豪斯仪器有限公司)酶标仪(伯乐生命医学产品有限公司)立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械厂)PH计(SARTORIUS，德国)2)实验方法和过程大鼠脑胶质瘤细胞株C6以4000/孔的密度铺于96孔板，每孔100μL，12小时后使用。各组分以DMSO溶解为100mg/mL储存液，保存于-20℃待用。铺板后本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种维吾尔药铁力木提取物，其特征为维吾尔药铁力木经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0的石油醚：丙酮洗脱，继用体积比100:1‑100:14的石油醚：丙酮洗脱，石油醚：丙酮100:1‑100:14洗脱液干燥后即得；或先用体积比100:17的石油醚：丙酮洗脱，继用体积比100:20‑100:100的石油醚：丙酮洗脱，收集100：20‑100：100的洗脱液，回收有机溶剂，干燥即得。
【技术特征摘要】
1.一种维吾尔药铁力木提取物，其特征为维吾尔药铁力木经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用体积比100:0的石油醚：丙酮洗脱，继用体积比100:1-100:14的石油醚：丙酮洗脱，石油醚：丙酮100:1-100:14洗脱液干燥后即得；或先用体积比100:17的石油醚：丙酮洗脱，继用体积比100:20-100:100的石油醚：丙酮洗脱，收集100：20-100：100的洗脱液，回收有机溶剂，干燥即得。2.如权利要求1所述的一种维吾尔药铁力木提取物，其特征为，所述的提取用有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂或乙醇水混合溶剂，优选甲醇或95%乙醇，提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。3.如权利要求1所述维的维吾尔药铁力木提取物，其特征为，洗脱液的用量为2-50倍柱体积。4.如权利要求1所述的维吾尔药铁力木提取物，其特征为，先用体积比100:0的石油醚：丙酮洗脱10倍柱体积，继用体积比100...
【专利技术属性】
技术研发人员：王金辉，黄健，王书云，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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