一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法技术

本发明专利技术属于酒品检测技术领域，具体涉及一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法。本发明专利技术的方法，包括以下步骤：取葡萄酒样加热蒸馏，在容器中预先加入蒸馏水和1%的邻苯二胺溶液，用上述的容器收集蒸出液；混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，加入盐酸，充分混合后，测定其在335nm下的吸光值，在空白测定中，用蒸馏水代替蒸出液，根据测定得到的吸光值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。本发明专利技术以啤酒体系改进的邻苯二胺比色法作参照，建立适合于葡萄酒体系的双乙酰检测方法。应用此方法，分析葡萄酒发酵和陈酿过程中双乙酰含量的变化规律，为葡萄酒生产中双乙酰的有效控制提供参考，有效节约了企业的生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酒品检测
，具体涉及一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法。
技术介绍
双乙酰（2,3-butanedione,C4H6O2）是葡萄酒、啤酒等发酵酒的重要风味物质之一，是乳酸菌苹果酸-乳酸发酵和酵母酒精发酵时产生的副产物。本专利技术涉及一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，本专利技术以啤酒体系改进的邻苯二胺比色法作参照，拟建立适合于葡萄酒体系的双乙酰检测方法，应用此方法，分析葡萄酒发酵和陈酿过程中双乙酰含量的变化规律，为葡萄酒生产中双乙酰的有效控制提供参考。迄今为止，仅检索到一项专利“一种测定白酒中双乙酰含量的方法”，该专利运用静态顶空进样技术和气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术，建立了快速测定白酒中双乙酰含量的方法。此测定方法准确度和灵敏度较高，但对试验条件和仪器要求过高。因此，需要针对上述方法的缺陷进行改进，设计一种准确度和灵敏度较高且对实验条件和仪器要求相对较低的方法。
技术实现思路
为了解决上述的技术问题，本专利技术提供了一种适用于葡萄酒体系双乙酰含量检测的邻苯二胺比色法。本专利技术通过试验确定最佳的蒸馏时间；通过回收率试验确定双乙酰最佳的测定浓度；通过精确度检验确定该方法有较高的重现性，精确度较高；通过试验确定酒精度对双乙酰含量测定的影响。本专利技术的葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）取葡萄酒样加热蒸馏，在容器中预先加入蒸馏水和1%的邻苯二胺溶液，用上述的容器收集蒸出液，蒸馏时间不超过4分钟；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，加入4mol／L的盐酸，充分混合后，测定其在335nm下的吸光值，在空白测定中，用蒸馏水代替蒸出液，根据测定得到的吸光值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。优选的，本专利技术的葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）量取葡萄酒样倒入蒸馏瓶中，电炉加热，用量筒收集蒸出液，所述的葡萄酒样品与蒸出液的体积比为3-6：1，并在量筒中预先加入l％邻苯二胺溶液和蒸馏水，蒸馏时间控制在4min之内，所述的邻苯二胺溶液占葡萄酒样品体积的0.2-0.7%，蒸馏水体积占葡萄酒样品的3.5-5.5%；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，加入4mol／L的盐酸，所述的盐酸的加入体积为混合液体积的1/18-1/12，充分混合，用比色皿测定其在335nm下的吸光值（OD值）；在空白测定中，用蒸馏水代替蒸出物，根据测定所得的OD值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。更优选的，一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）量取葡萄酒样倒入蒸馏瓶中，电炉加热，用量筒收集蒸出液，所述的葡萄酒样品与蒸出液的体积比为4：1，并在量筒中预先加入l％邻苯二胺溶液和蒸馏水，蒸馏时间控制在4min之内，所述的邻苯二胺溶液占葡萄酒样品体积的0.5%，蒸馏水体积占葡萄酒样品的4.5%；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，加入4mol／L的盐酸，所述的盐酸的加入体积为混合液体积的1/15，充分混合，用比色皿测定其在335nm下的吸光值（OD值）；在空白测定中，用蒸馏水代替蒸出物，根据测定所得的OD值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。优选的，葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）量取100mL葡萄酒样倒入蒸馏瓶中，电炉加热，用50mL量筒收集25mL蒸出液，并在量筒中预先加入0.5mLl％邻苯二胺溶液和4.5mL蒸馏水，蒸馏时间控制在4min之内；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，用吸管吸取10mL混合液，放入干净试管中，加入2mL 4mol／L的盐酸，充分混合，用10mm比色皿测定其在335nm下的吸光值；在空白测定中，用25mL蒸馏水代替蒸出物，其它步骤不变。根据测定所得的OD值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。上述的邻苯二胺溶液采用4mol/L盐酸所配制，具体的配制方法为：（1）配制4mol/L盐酸：量取331.6毫升37%体积浓度的浓盐酸，加入到烧杯中，稀释，将稀释后的溶液转移到1000毫升的容量瓶中，再用水洗烧杯1-2次，将洗液也转移到容量瓶中，再加水至刻度，摇匀；（2）配制1%邻苯二胺溶液：称取10g邻苯二胺，加入到烧杯中，加4mol/L盐酸稀释，将稀释后的溶液转移到1000毫升的容量瓶中，再用4mol/L盐酸洗烧杯1-2次，将洗液也转移到容量瓶中，再加4mol/L盐酸至刻度，摇匀，得邻苯二胺溶液。此溶液当天配制当天使用，若配制出来的溶液呈红色，应重新更换新试剂。 邻苯二胺比色法的原理是双乙酰与邻苯二胺反应生成2，3-二甲基喹喔啉，其盐酸盐在335nm波长下有最大吸收峰，其吸光值大小与双乙酰含量成正比。但该法也存在一些不足，如易受加热等外界干扰因素的影响，其准确度和灵敏度尚感不足；其二是只能测定双乙酰和2，3-戊二酮的总量，而不能分别进行测定，因此测定结果往往偏高。虽然其他方法（如气相色谱法）能或多或少的增加准确性和灵敏性，但对试验条件和仪器要求过高。本专利技术通过改进的邻苯二胺比色法在保持基本原理的基础上，对试验条件和方法进行了优化，在不提高成本的前提下，使试验更加准确和简捷。本专利技术以啤酒体系改进的邻苯二胺比色法作参照啤酒体系邻苯二胺比色法未考虑蒸馏时间、回收率、精确度检验、酒精度对双乙酰含量测定的影响。本专利技术通过试验确定最佳的蒸馏时间；通过回收率试验确定双乙酰最佳的测定浓度；通过精确度检验确定该方法有较高的重现性，精确度较高；通过试验确定酒精度对双乙酰含量测定的影响，建立适合于葡萄酒体系的双乙酰检测方法。本专利技术以啤酒体系改进的邻苯二胺比色法作参照，建立适合于葡萄酒体系的双乙酰检测方法。应用此方法，分析葡萄酒发酵和陈酿过程中双乙酰含量的变化规律，为葡萄酒生产中双乙酰的有效控制提供参考，有效节约了企业的生产成本。附图说明 图1 双乙酰反应物吸收峰的检测； 图2 双乙酰标准曲线。 具体实施方式实施例11、吸收峰检测将葡萄酒样蒸馏，用紫外可见分光光度计测定馏出液与邻苯二胺盐酸反应产物(2，3-二甲基喹喔啉)在280-500nm波长处的OD值。对双乙酰与邻苯二胺盐酸反应产物进行波长扫描，从图1可以看到，反应产物只在335nm处有最大吸光峰，因此可选择335nm作为邻苯二胺比色法测定双乙酰反应物的波长。2、标准曲线的制作用蒸馏水配制浓度为0mg/L、1.2mg/L、2.4mg/L、4.8mg/L、9.6mg/L和19.2mg/L的双乙酰标准溶液各25mL，分别加入0.5mL邻苯二胺盐酸溶液和4.5mL蒸馏水，混合均匀，从中取10mL混合液并加入2mL 4mol/L盐酸溶液，于暗处分别放置20min后在335nm处测定其OD值。以双乙酰浓度为横坐标，OD值为纵坐标，制作双乙酰标准曲线，3个独立重复。在此波长下，用双乙酰标准液制备标准曲线。如图2所示，在双乙酰浓度为0-19.2 mg/L范围内，双乙酰浓度与OD值呈极显著的直线相关，相关方程为：y=0.0850431228x+0.0156458333（r=0.9999）（其中x：双乙酰浓度；y：335m处溶液OD值）即双乙酰含量与其反应物在335nm处的OD值大小有极显著的线性正相关关系。3、蒸馏时间的影响分别取100mL酒样、1.2mg/L和19.2m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）取葡萄酒样加热蒸馏，在容器中预先加入蒸馏水和1%的邻苯二胺溶液，用上述的容器收集蒸出液，蒸馏时间不超过4分钟；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，加入4mol／L的盐酸，充分混合后，测定其在335nm下的吸光值，在空白测定中，用蒸馏水代替蒸出液，根据测定得到的吸光值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。

【技术特征摘要】
1.一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）取葡萄酒样加热蒸馏，在容器中预先加入蒸馏水和1%的邻苯二胺溶液，用上述的容器收集蒸出液，蒸馏时间不超过4分钟；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，加入4mol／L的盐酸，充分混合后，测定其在335nm下的吸光值，在空白测定中，用蒸馏水代替蒸出液，根据测定得到的吸光值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。2.如权利要求1所述的一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）量取葡萄酒样倒入蒸馏瓶中，电炉加热，用量筒收集蒸出液，所述的葡萄酒样品与蒸出液的体积比为3-6：1，并在量筒中预先加入l％邻苯二胺溶液和蒸馏水，蒸馏时间控制在4min之内，所述的邻苯二胺溶液占葡萄酒样品体积的0.2-0.7%，蒸馏水体积占葡萄酒样品的3.5-5.5%；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混合液，加入4mol／L的盐酸，所述的盐酸的加入体积为混合液体积的1/18-1/12，充分混合，用比色皿测定其在335nm下的吸光值（OD值）；在空白测定中，用蒸馏水代替蒸出物，根据测定所得的OD值，查标准曲线得到相应的双乙酰含量。3.如权利要求1所述的一种葡萄酒中双乙酰含量的测定方法，包括以下步骤：（1）量取葡萄酒样倒入蒸馏瓶中，电炉加热，用量筒收集蒸出液，所述的葡萄酒样品与蒸出液的体积比为4：1，并在量筒中预先加入l％邻苯二胺溶液和蒸馏水，蒸馏时间控制在4min之内，所述的邻苯二胺溶液占葡萄酒样品体积的0.5%，蒸馏水体积占葡萄酒样品的4.5%；（2）混匀蒸出液和邻苯二胺及蒸馏水，得混...

【专利技术属性】
技术研发人员：张顺涛，李春丽，贺丽娜，马福荣，李艳，于玲，
申请(专利权)人：张顺涛，
类型：发明
国别省市：山东;37