一种长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，先通过紫外‑可见分光光度计进行光谱扫描确定维生素C标准溶液的最大吸收波长λmax；接着配制一组不同浓度的维生素C溶液，在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定各维生素C溶液的色谱峰面积，绘制维生素C溶液浓度与其对应色谱峰面积的标准曲线，求得线性回归方程；同时在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定供试品溶液的色谱峰面积，最后计算出供试品溶液中维生素C含量。本发明专利技术采用HPLC法检测长春西汀注射液中维生素C的含量，检测方法简便易行，专属性强、准确度高，为保证药品的安全、有效、可控提供依据。

Method for detecting vitamin C content in Vinpocetine Injection

The invention discloses a method for detecting the content of vitamin C in Vinpocetine Injection, the first by UV visible spectrophotometer spectral scan to determine the maximum absorption wavelength of lambda max vitamin C standard solution; then prepared a group of different concentrations of vitamin C solution, chromatography peak area determination of vitamin C by high performance solution the liquid in the absorption wavelength of lambda max, drawing the standard curve of vitamin C concentration and the corresponding peak area, the linear regression equation; while the maximum absorption wavelength of lambda max tested by high performance liquid chromatographic peak area solution chromatography instrument, finally calculate the tested solution of vitamin C content. The invention adopts the HPLC method to detect the content of vitamin C in the Vinpocetine Injection, the detection method is simple and convenient, the specificity is strong, and the accuracy is high, so as to provide the basis for ensuring the safe, effective and controllable drug.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分析化学的
，具体地指一种长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法。
技术介绍
长春西汀是从夹竹桃科小蔓长春花提取的一种生物碱的衍生物，其有效成分为阿朴长春胺酸乙酯，长春西汀最早由匈牙利的GedeonRichter药物公司研发并于1978年上市，长春西汀注射液上市以来，因临床效果显著以及安全性和耐受性良好，广泛应用于神经内科、心血管内科、耳科、眼科、神经外科等临床科室，现已成为世界各国脑血管常规用药。长春西汀具有多种作用，能改善大脑代谢、血流量以及血液流变学性质。目前上市的长春西汀注射液中辅料一般为维生素C、焦亚硫酸钠、L-酒石酸、山梨醇、氢氧化钠和注射用水。维生素C作为长春西汀注射液中重要辅料，起到助溶剂和抗氧剂的作用，它能够延缓主成分长春西汀的氧化过程，提高产品的稳定性。但维生素C性质不稳定，在高温条件下易降解，发生氧化反应后容易使溶液颜色变黄，影响产品质量，因此它在长春西汀注射液中的含量变化也应成为该药品的关注重点。目前，《中华人民共和国药典》2015版二部收载的维生素C注射液中维生素C含量的检测方法为滴定法，长春西汀注射液中含有抗氧剂焦亚硫酸钠，对检测结果存在干扰。为此，需要研究简便高效的检测长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，以确保药品的安全性。
技术实现思路
本专利技术的目的就是要提供一种长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，该方法采用HPLC法检测长春西汀注射液中维生素C的含量，检测方法简便易行，专属性强、准确度高，为保证药品的安全、有效、可控提供依据。为实现上述目的，本专利技术所提供的一种长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，先通过紫外-可见分光光度计进行光谱扫描确定维生素C标准溶液的最大吸收波长λmax；接着配制一组不同浓度的维生素C溶液，在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定各维生素C溶液的色谱峰面积，绘制维生素C溶液浓度与其对应色谱峰面积的标准曲线，求得线性回归方程；同时在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定供试品溶液的色谱峰面积，最后计算出供试品溶液中维生素C含量。进一步地，所述确定维生素C标准溶液的最大吸收波长λmax的具体步骤如下：取适量维生素C，加入流动相溶解并定量稀释至浓度为10μg/mL，通过紫外-可见分光光度计在200～400nm范围内进行光谱扫描，确定最大吸收波长λmax。进一步地，所述绘制维生素C溶液浓度与其对应色谱峰面积A的标准曲线具体步骤如下：配制浓度为2.5μg/ml、12.5μg/ml、25.0μg/ml、37.5μg/ml、50.0μg/ml、125.0μg/ml的维生素C溶液，分别取各溶液10μL进样，在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定各维生素C溶液的色谱峰面积，以维生素C的浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标绘制标准曲线，求得到线性回归方程。进一步地，所述供试品溶液中的维生素C含量测定的具体步骤如下：1)称取适量待测长春西汀注射液制剂，制成浓度为25μg/mL的供试品溶液；2)精确称取适量纯维生素C，制成浓度为25μg/mL的对照品溶液；3)分别供试品溶液和对照品溶液取15μl注入高效液相色谱仪中，在最大吸收波长λmax下通过测定供试品溶液和对照品溶液的色谱峰面积；4)根据如下公式计算出供试品溶液中维生素C的含量：式中，C为供试品溶液中维生素C的含量，单位为μg/ml；Ai为供试品溶液的峰面积；Ar为对照品溶液的峰面积；Cr为对照品溶液的浓度，单位为μg/ml。进一步地，所述最大吸收波长λmax为265～282nm。最佳地，所述最大吸收波长λmax为267nm。进一步地，所述高效液相色谱仪测定中色谱柱为InertSustainC18柱(4.6mm×250mm，5μm)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。进一步地，所述高效液相色谱仪测定中柱温为25～35℃。进一步地，所述高效液相色谱仪测定中流动相为醋酸铵溶液与乙腈按体积比为35:65～45:55的混合液，所述醋酸铵溶液的浓度为0.2mol/L，流速为1ml/min。进一步地，所述高效液相色谱仪测定中定量方法采用外标法。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：其一，本专利技术采用HPLC法检测长春西汀注射液中维生素C的含量，所述流动相与长春西汀注射液有关物质检测用流动相相同，焦亚硫酸钠等其他辅料在此检测条件下无吸收，检测方法简便易行，专属性强、准确度高，为保证药品的安全、有效、可控提供依据。其二，本专利技术的测定方法耐用性好，波长、流速等的微小变化对含量测定影响不大，根据长春西汀注射液中各组分在色谱柱固定相和流动相之间分配系数的差别，不同色谱柱均能使维生素C色谱峰与其他色谱峰之间达到较好的分离。其三，在本方法中维生素C经氧化破坏后的降解产物保留时间之前的峰为维生素C降解峰，可见降解产物峰与主峰的分离度良好，不干扰样品的测定，专属性好，但维生素C稳定性较差，高温、碱、氧化等条件都会导致其降解。其四，本专利技术的方法简便易行，结果重现性好，灵敏度高，检测限为0.0301ng；加标回收率稳定，回收率在100.6％～102.92之间，可为维生素C在长春西汀注射液中的含量变化提供关键的技术支持。附图说明图1为本专利技术实施例1的紫外-可见光谱扫描示意图；图2为本专利技术实施例2的维生素C的标准曲线；图3为本专利技术实施例4中专属性实验的测试结果图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的详细说明。实施例1：本专利技术确定维生素C标准溶液的最大吸收波长λmax的具体步骤如下：取适量维生素C，加入流动相溶解并定量稀释至浓度为10μg/mL，通过紫外-可见分光光度计在200～400nm范围内进行光谱扫描，结果见附图1所示，维生素C在波长267nm处具有最大吸收波峰。实施例2：本专利技术绘制维生素C溶液浓度与其对应色谱峰面积A的标准曲线具体步骤如下：精密称取维生素C配制成浓度为2.5μg/ml、12.5μg/ml、25.0μg/ml、37.5μg/ml、50.0μg/ml、125.0μg/ml的维生素C溶液，分别取各待测试样溶液10μl进样，在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定各维生素C溶液的色谱峰面积，各浓度维生素C溶液浓度(μg/ml)与峰面积见表1。高效液相色谱仪的色谱条件：色谱柱为InertSustainC18柱(4.6mm×250mm，5μm)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；最大吸收波长λmax为267nm；柱温为30℃；流动相为醋酸铵溶液与乙腈按体积比为40:60的混合液，所述醋酸铵溶液的浓度为0.2mol/L，流速为1ml/min。表1线性关系考察结果序号123456浓度C(μg/ml)2.512.525.037.550.0125.0峰面积A93172475653994835140348118007054537898以维生素C的浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标绘制标准曲线，如图2所示，以峰面积A对浓度C作线性回归，得线性回归方程：A＝36041C+34228，r＝0.9997，结果表明在2.5～125.0μg/ml范围内，维生素C对照品的浓度与峰面积A线性关系良好。实施例3：本专利技术测定长春西汀注射液中维生素C含量的具体步本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，其特征在于，先通过紫外‑可见分光光度计进行光谱扫描确定维生素C标准溶液的最大吸收波长λmax；接着配制一组不同浓度的维生素C溶液，在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定各维生素C溶液的色谱峰面积，绘制维生素C溶液浓度与其对应色谱峰面积的标准曲线，求得线性回归方程；同时在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定供试品溶液的色谱峰面积，最后计算出供试品溶液中维生素C含量。

【技术特征摘要】
1.一种长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，其特征在于，先通过紫外-可见分光光度计进行光谱扫描确定维生素C标准溶液的最大吸收波长λmax；接着配制一组不同浓度的维生素C溶液，在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定各维生素C溶液的色谱峰面积，绘制维生素C溶液浓度与其对应色谱峰面积的标准曲线，求得线性回归方程；同时在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定供试品溶液的色谱峰面积，最后计算出供试品溶液中维生素C含量。2.根据权利要求1所述的长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，其特征在于，所述确定维生素C标准溶液的最大吸收波长λmax的具体步骤如下：取适量维生素C，加入流动相溶解并定量稀释至浓度为10μg/mL，通过紫外-可见分光光度计在200～400nm范围内进行光谱扫描，确定最大吸收波长λmax。3.根据权利要求1所述的长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，其特征在于，所述绘制维生素C溶液浓度与其对应色谱峰面积A的标准曲线具体步骤如下：配制浓度为2.5μg/ml、12.5μg/ml、25.0μg/ml、37.5μg/ml、50.0μg/ml、125.0μg/ml的维生素C溶液，分别取各溶液10μL进样，在最大吸收波长λmax下通过高效液相色谱仪测定各维生素C溶液的色谱峰面积，以维生素C的浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标绘制标准曲线，求得到线性回归方程。4.根据权利要求1所述的长春西汀注射液中维生素C含量的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液中的维生素C含量测定的具体步骤如下：1)称取适量待测长春西汀注射液制剂，制成浓度为25μg/mL的供试品溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：丛文娟，丁冠军，王世民，黄楚华，
申请(专利权)人：武汉华龙生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42