一种酚类香料的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种酚类香料的检测方法，包括以下步骤：S1)将待测样品用萃取溶剂进行萃取，得到待测样品液；S2)将所述待测样品液经超高效液相色谱‑串联质谱进行检测，得到待测样品的色谱数据与质谱数据，根据酚类香料的标准曲线与质谱数据，得到待测样品中酚类香料的种类及含量；所述超高效液相色谱的流动相为水与甲醇；流动相洗脱为梯度洗脱。与现有技术相比，本发明专利技术采用超高效液相色谱‑串联质谱法进行检测，通过梯度洗脱可将待测样品液中不同的酚类香料分离，并从二级质谱层面上也进行了定性和定量分析，有效排除干扰物的影响，提高了分析方法的选择性和准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于香料添加剂理化检验
，尤其涉及一种酚类香料的检测方法。
技术介绍
丁香酚，具有抗菌、降血压的作用，由于其强烈的丁香香气，常用于香水香精以及各种化妆品香精和皂用香精配方中，还可以用于食用香精的调配。作为我国规定允许使用的食用香料，被广泛应用于肉类、胶姆糖、调味品、烘烤食品、糖果、饮品等各种领域，同时丁香酚亦可用作杀虫剂和防腐剂。麝香草酚具有百里香油似的辛香和草香香气，因此被广泛应用于止咳糖、漱口水和胶姆糖中，同时具有很强的杀菌、杀螨作用，可以用于治疗气管炎、百日咳等，也可以有效控制蜂螨。我国《食品添加剂使用卫生标准》规定，麝香草酚可按生产需要适量用于配制食品香精，同时FEMA中明确规定了麝香草酚在各类食品中的最高限量。浓馥香兰素可作为香兰素的代用品，有浓烈的奶香气息，香气强度比香兰素可提高1倍，使用中具有用量少的优点，因此被广泛应用于巧克力、坚果、香草兰、奶油司考奇、朗姆、焦糖等调和香料中。但大剂量摄入会导致头痛、恶心、呕吐、呼吸困难，甚至损伤肝、肾等功能。4-乙基愈创木酚是一种相对安全无毒、用途广、效果好、用量极少的理想食品添加剂，是烟草、食品、饮料、肉制品、海鲜、香精、果酒、日用化妆品等良好的香甜味增效剂，对食品的香味改善和增强具有显著效果，对甜食起着增甜作用，且具有抗菌、防腐性能，能延长食品储存期。但过量食入对人体肝脏产生危害，同时诱发骨骼和关节提前脆变癌变等疾病，对人体有较大的危害。由于丁香酚、麝香草酚、浓馥香兰素和4-乙基愈创木酚各自特有的香气，均可用于卷烟配方中，以改善卷烟的香气和吸食品质，但同时又都对人体健康具有一定的危害作用，因此FEMA中也规定了其在各个领域中的最高限用量
和最大允许残留量。因此，建立简单、快速、灵敏的测定这些酚类物质的分析方法对烟用添加剂的质量控制具有重要意义。目前，国内外测定这四中物质中的某一种或两种成分的研究报道较为常见，尚未有关于同时快速检测这四种物质的方法报道。报道中提到的主要检测方法有气相色谱法、气相色谱-质谱法、高效液相色谱法等，但这些方法都有一定的局限性，由于烟用香料的成分较为复杂，气相色谱和高效液相色谱的选择性和特异性差，在实际应用中，容易产生前处理效果不理想，基体干扰大、定性困难等问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种酚类香料的检测方法，该检测方法可同时检测烟用添加剂中的酚类香料且灵敏度较高。本专利技术提供了一种酚类香料的检测方法，包括以下步骤：S1)将待测样品用萃取溶剂进行萃取，得到待测样品液；S2)将所述待测样品液经超高效液相色谱-串联质谱进行检测，得到待测样品的色谱数据与质谱数据，根据酚类香料的标准曲线与质谱数据，得到待测样品中酚类香料的种类及含量；所述超高效液相色谱的流动相为水与甲醇；流动相洗脱为梯度洗脱。优选的，所述萃取溶剂为甲醇水溶液。优选的，所述超高效液相色谱中的色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18。优选的，所述梯度洗脱的程序为：以水作为A相，以甲醇作为B相，0～1min，35％～45％A；2～5min，65％～75％A；6～10min，35％～45％A。优选的，所述超高效液相色谱中待测样品液的流速为0.1～0.5ml/min。优选的，所述超高效液相色谱的柱温为20℃～40℃。优选的，所述质谱的检测为负离子扫描模式，多重反应监测模式检测。优选的，所述质谱的检测条件：毛细管电压为3000～5000V；干燥气体流速度为6～10min/L；干燥气体温度为320℃～360℃；雾化器压力为30～50psi。优选的，所述酚类香料的标准曲线按照以下方法建立：将酚类香料标准工作溶液经超高效液相色谱-串联质谱进行检测，得到酚类香料的色谱数据与质谱数据；按照外标法以酚类香料的色谱数据的色谱峰面积对酚类香料标准工作溶液的浓度进行回归分析，得到酚类香料的标准曲线。优选的，所述酚类香料为丁香酚、麝香草酚、浓馥香兰素与4-乙基愈创木酚中的一种或多种。本专利技术提供了一种酚类香料的检测方法，包括以下步骤：S1)将待测样品用萃取溶剂进行萃取，得到待测样品液；S2)将所述待测样品液经超高效液相色谱-串联质谱进行检测，得到待测样品的色谱数据与质谱数据，根据酚类香料的标准曲线与质谱数据，得到待测样品中酚类香料的种类及含量；所述超高效液相色谱的流动相为水与甲醇；流动相洗脱为梯度洗脱。与现有技术相比，本专利技术采用超高效液相色谱-串联质谱法进行检测，通过梯度洗脱可将待测样品液中不同的酚类香料分离，并从二级质谱层面上也进行了定性和定量分析，有效排除干扰物的影响，提高了分析方法的选择性和准确性。由实验可知，采用本专利技术检测方法，丁香酚、麝香草酚、浓馥香兰素和4-乙基愈创木酚的检出限分别为6.8ng/mL、7.5ng/mL、8.9ng/mL、6.6ng/mL，在20～1000ng/mL范围内线性良好(相关系数0.9992以上)，回收率在91.2％～106.4％之间，相对标准偏差均小于8％。附图说明图1为本专利技术实施例1中的检测方法的流程示意图；图2为本专利技术实施例1中的丁香酚、麝香草酚、浓馥香兰素和4-乙基愈创木酚标准品总离子流(TIC)图谱；图3为本专利技术实施例1中的丁香酚的超高效液相色谱-串联质谱(LC-ESI-MS/MS)色谱图；图4为本专利技术实施例1中的麝香草酚的超高效液相色-谱串联质谱(LC-ESI-MS/MS)色谱图；图5为本专利技术实施例1中的浓馥香兰素的超高效液相色-谱串联质谱(LC-ESI-MS/MS)色谱图；图6为4-乙基愈创木酚的超高效液相色-谱串联质谱(LC-ESI-MS/MS)色谱图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供一种酚类香料的检测方法，包括以下步骤：S1)将待测样品用萃取溶剂进行萃取，得到待测样品液；S2)将所述待测样品液经超高效液相色谱-串联质谱进行检测，得到待测样品的色谱数据与质谱数据，根据酚类香料的标准曲线与质谱数据，得到待测样品中酚类香料的种类及含量；所述超高效液相色谱的流动相为水与甲醇；流动相洗脱为梯度洗脱。本专利技术采用超高效液相色谱-串联质谱进行检测，超高效液相色谱提高了色谱的分离效率，串联质谱提高了检测的准确性和灵敏度，方法选择性和特异性好，适用于低浓度样品的定性定量分析。其中，本专利技术对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。将待测样品用萃取溶剂进行萃取；其中，所述待测样品为本领域技术人员熟知的含有酚类香料的待测样品即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为烟用添加剂；所述萃取溶剂为本领域技术人员熟知的萃取溶剂即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为甲醇水溶液；所述甲醇水溶液中甲醇与水的体积比优选为(20～40)：(80～60)，更优选为(25～35)：(75～55)，再优选为30：70。所述萃取优选按照以下方法进行：将待测样品与萃取溶剂混合，密封，振荡萃取；所述萃取的时间优选为20～60min，更优选为20～50m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种酚类香料的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1)将待测样品用萃取溶剂进行萃取，得到待测样品液；S2)将所述待测样品液经超高效液相色谱‑串联质谱进行检测，得到待测样品的色谱数据与质谱数据，根据酚类香料的标准曲线与质谱数据，得到待测样品中酚类香料的种类及含量；所述超高效液相色谱的流动相为水与甲醇；流动相洗脱为梯度洗脱。

【技术特征摘要】
1.一种酚类香料的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1)将待测样品用萃取溶剂进行萃取，得到待测样品液；S2)将所述待测样品液经超高效液相色谱-串联质谱进行检测，得到待测样品的色谱数据与质谱数据，根据酚类香料的标准曲线与质谱数据，得到待测样品中酚类香料的种类及含量；所述超高效液相色谱的流动相为水与甲醇；流动相洗脱为梯度洗脱。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述萃取溶剂为甲醇水溶液。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱中的色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：以水作为A相，以甲醇作为B相，0～1min，35％～45％A；2～5min，65％～75％A；6～10min，35％～45％A。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱中待测样品液的流速为0....

【专利技术属性】
技术研发人员：臧婉辰，黄飞，刘金霞，
申请(专利权)人：吉林烟草工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22