用于动脉粥样硬化易损斑块诊断的MRI/optical双模态纳米探针的制备方法技术

技术编号:13513349 阅读:71 留言:0更新日期:2016-08-11 19:45
本发明专利技术设计一种医学诊断试剂中的分子探针,尤其是涉及一种用于动脉粥样硬化易损斑块诊断的靶向MRI/optical双模态纳米探针的制备方法,该探针由OPN抗体和二巯基丁二酸(DMSA)修饰的磁性Fe3O4纳米颗粒缩合而成,OPN抗体的活性氨基与纳米颗粒表面DMSA的活性羧基通过缩合反应稳定连接。本发明专利技术提供用于动脉粥样硬化易损斑块MRI/optical双模态分子影像学成像探针及其制备方法,其将丰富动脉粥样硬化斑块的诊断方法,通过MRI/optical双模态成像技术,识别易损斑块,从而早期预防心血管事件。本发明专利技术具有安全可靠的特点,提高了诊断的敏感性和特异性。

【技术实现步骤摘要】
201610076158

【技术保护点】
一种用于动脉粥样硬化易损斑块MRI/optical双模态分子影像学成像探针,其特征在于:由OPN抗体和二巯基丁二酸(DMSA)修饰的磁性Fe3O4纳米颗粒缩合而成,OPN抗体的活性氨基与纳米颗粒表面DMSA的活性羧基通过缩合反应稳定连接。

【技术特征摘要】
1.一种用于动脉粥样硬化易损斑块MRI/optical双模态分子影像学成像探针,其特征在于:由OPN抗体和二巯基丁二酸(DMSA)修饰的磁性Fe3O4纳米颗粒缩合而成,OPN抗体的活性氨基与纳米颗粒表面DMSA的活性羧基通过缩合反应稳定连接。2.根据权利要求1所述的用于动脉粥样硬化易损斑块MRI/optical双模态分子影像学成像探针,其特征在于:二巯基丁二酸(DMSA)修饰的磁性Fe3O4纳米颗粒直径在7nm左右,大小均一,Zeta电位为-39.2mv,颗粒的饱和磁化强度为51.4emu/g。3.根据权利要求1或2所述的用于动脉粥样硬化易损斑块MRI/optical双模态分子影像学成像探针,其特征在于:该探针的制备方法为将10mg DMSA-MNPs分散于5ml pH=9的硼酸盐缓冲液,加入浓度均为10mg/ml的EDC 0.02ml、Sulfo-NHS 0.01ml,37℃下反应30分钟,加入2mgOPN抗体在4℃过夜;OPN抗体的活性氨基与纳米颗粒表面DMSA的活性羧基通过缩合反应稳定连接,经离心分离得到OPN靶向的MRI磁性纳米探针anti-OPN-DMSA-MNPs。4.根据权利要求3所述的用于动脉粥样硬化易损斑块MRI/optical双模态分子影像学成像探针,其特征在于:该探针的制备方法具体包括如下步骤:(1)将2.7g FeCl3·6H2O和8.5ml油酸溶于50mL甲醛,在持续搅拌条件下,缓慢滴定含1.2g NaOH的甲醛溶液100ml,将棕褐色沉淀物用甲醇清洗后真空干燥去除溶剂;所得油酸盐可在70℃条件下溶解于十八醇,稀释至0.39mol/ml可于室温下稳定储存;(2)取2ml该储存液加入8ml十八醇和1ml油酸,在接入氮气保护的条件下,将混合物以稳定升温速率加热至320℃后保持30分钟,加入过量乙醇冷却离心后可获得Fe3O4纳米颗粒(MNPs);(3)取200mg上述Fe3O4纳米颗粒溶解于20ml氯仿,加入0.1ml三乙胺后与溶解有100mg二巯基丁二酸(DMSA)的二甲基亚砜溶液20ml充分混匀;加热至60℃后持续搅拌12小时,离心后乙醇洗涤沉淀物可获得DMSA修饰的Fe3O4纳米颗粒(DMSA-MNPs);(4)取10mg上述DMSA-MNPs,分散于5ml pH=9的硼酸盐缓冲液,加入浓度均为10mg/ml的EDC 0.02ml、Sulfo-NHS 0.01ml,37℃下反应30分钟,加入2mgOPN抗体在4℃过夜;OPN抗体的活性氨基与纳米颗粒表面DMSA的活性羧基通过缩合反应可稳定连接;(5)室温下,12000转/分钟高速离心30分钟并通过永磁体辅助磁性分离,弃上清去除游离的OPN抗体,所得沉淀经无菌PBS清洗后超声分散重悬,即得到OPN靶向的MRI磁性纳米探针anti-OPN-DMSA-MNPs;(6)取上述磁共振探针5mg...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹丰乔红玉王亚斌
申请(专利权)人:中国人民解放军总医院曹丰
类型:发明
国别省市:北京;11

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