【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤解离试剂在流式细胞检测中的应用
本专利技术涉及一种将临床实体肿瘤组织分散成单细胞悬液，并保护表面标志物不被降解且可被用于流式检测的肿瘤解离试剂。
技术介绍
在对肿瘤组织的细胞生物学特性进行分析研究(如细胞表位检测等)时，需先将样品组织块制备成分散的单细胞悬液，获得高得率的细胞，并且细胞及表位的完整性保留完好，可直接用于下游实验。只有当样品组织中的各种细胞成分处在单细胞状态下，才能有效地对其进行各种细胞效应的检测分析，而细胞悬液质量的好坏与消化液配方和消化方法密切相关。目前常用的单细胞悬液制备方法有化学法、酶法和物理法。酶学法主要是破坏细胞间的连接物如胶原酶、弹性纤维、粘多糖物质、紧密连接装置蛋白等而使细胞分散。胰酶、胶原蛋白酶、透明质酸酶等是目前常用的酶。现有技术中，商品化的解离试剂盒如美天旎组织解离试剂盒据称可以处理多种组织，包括肿瘤组织、骨骼肌、脾、肺、神经组织、表皮、固有层组织、新生鼠心脏、新生神经元及拟胚体等组织，并且根据细胞表面的抗原对酶消化的敏感性不同还设计了不同的酶反应体系，以尽可能保护细胞表面抗原不被破坏，从而不影响下游实验。而事实上，实际...
【技术保护点】
一种肿瘤解离试剂，其不包含胶原酶且包含透明质酸酶，所述肿瘤解离试剂不降解或不部分降解检查点受体等膜表面受体。
【技术特征摘要】
1.一种用于肿瘤解离的酶在制备用于检测肿瘤组织中免疫检查点标记物表达的试剂中的应用，其中，所述用于肿瘤解离的酶由透明质酸酶和DNA酶I中的至少一种组成，所述用于肿瘤解离的酶不降解或不部分降解免疫检查点标记物，所述免疫检查点标记物为CD8、PD-1，PD-L1、TIM-3和LAG-3蛋白中的一种或多种。2.如权利要求1所述的应用，所述透明质酸酶的浓度为100μg/mL以下，所述DNA酶I的浓度为50μg/mL以下。3.如权利要求1所述的应用，检测肿瘤组织中免疫检查点标记物表达的方法为流式细胞术检测。4.如权利要求1所述的应用，所述肿瘤组织为肿瘤浸润免疫细胞。5.一种用于肿瘤解离的酶在制备用于流式细胞术检测肿瘤组织中免疫检查点标志物表达的试剂盒中的应用，其中，所述用于肿瘤解离的酶由浓度为100μ...
【专利技术属性】
技术研发人员：张宁，张祁尧，刘艳，冀群升，
申请(专利权)人：苏州药明康德新药开发股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。