用于在受试者中诊断胰腺癌的工具和方法技术

本发明专利技术涉及诊断方法领域。具体地，本发明专利技术考虑用于在受试者中诊断胰腺癌的方法，用于鉴定受试者是否需要胰腺癌疗法的方法或用于测定胰腺癌疗法是否成功的方法。本发明专利技术也涉及用于实施上述方法的工具，例如诊断设备。

【技术实现步骤摘要】
用于在受试者中诊断胰腺癌的工具和方法本申请为2011年5月26日提交的、专利技术名称为“用于在受试者中诊断胰腺癌的工具和方法”的PCT申请PCT/EP2011/058670的分案申请，所述PCT申请进入中国国家阶段的日期为2013年1月31日，申请号为201180037832.5。本专利技术涉及诊断方法领域。具体地，本专利技术考虑用于在受试者中诊断胰腺癌的方法，用于鉴定受试者是否需要胰腺癌疗法的方法或用于测定胰腺癌疗法是否成功的方法。本专利技术也涉及用于实施上述方法的工具，例如诊断设备。胰腺癌在所有实体瘤中具有最差的预后，具有低于5％的5年存活率但增加的发病率(Everhart2009,Gastroenterology136:1134–11449)。普遍认为需要建立创新的工具和技术用于即时(point-of-care)利用特异性生物标志物和新型分子成像工具用于早期诊断、预后分层和胰腺癌的鉴别诊断。在这些领域中的进步对提高此恶性肿瘤的预后是关键的，因为及时手术切除早期肿瘤是目前治疗此可怕疾病的唯一有效的手段。在欧洲和西方国家，此癌症类型的死亡率是任意癌症类型中最高的。由于缺乏早期检测的手段，人在诊断后不久就死亡。早期症状很少且不典型。因此，PDAC一般在疾病晚期被诊断出。至今检测PDAC的最好的成像技术是内窥镜超声波(EUS)、螺旋式计算机断层摄影(CT)、磁共振胰胆管成像(MRCP)或内镜逆行胰胆管造影(ERCP)(Dewitt2006,GastroenterolHepatol.(4):717-25)。不幸地是，这些技术用于检测胰腺内瘤性病变的分辨率在3-10mm的范围中。因此，它们不能在可治愈的阶段检测出胰腺的瘤形成。在胰腺瘤患者亚群中常规肿瘤标志物例如CA19-9的血清浓度增加(Fry2008,LangenbecksArchSurg.(393):883-90)。然而，至今所有可用的标志物缺乏灵敏度和肿瘤特异性。因此，迫切需要新的方法提高对极小的、早期PDAC及其前体病变(PanIN和IPMN)，以及晚期肿瘤预后亚组的检测的诊断灵敏度。慢性炎症和产生恶性肿瘤之间的联系已发现了多年。对胰腺癌最近才证实了此联系，并且共识大会同意将胰腺上皮内瘤形成新归类为非侵入性前体病变(Hruban2004，AmJSurgPath(28)：977-987)。慢性胰腺炎被定义为反复发作的无菌炎性疾病，其特征是经常进行性和不可逆的形态学变化，通常导致疼痛和胰腺功能的永久损伤。慢性胰腺炎代表胃肠道疾病的常见病，在每100000群体中具有8.2的发病率，27.4的患病数，在未经选择的尸检样本中具有0.04％至5％的频率。多种病因导致发展出慢性胰腺炎。在ABLowenfels及其同事进行的国际合作研究中显示，患有慢性胰腺炎的患者死于胰腺癌的风险增加，所述研究是在1993年从6个国家的临床中心募集的2015位慢性胰腺炎患者的多中心历史组研究。此研究发现在慢性胰腺炎患者中累积的胰腺癌风险，10年后风险为1.8％和20年后风险为4％，具有14.4的标准化发病比。在跟踪最少2年的患者中胰腺癌的风险是一般群体的16.5倍(Lowenfels1993，NEnglJMed(328)：1433-1437)。在1996年发现在7号染色体(7q35)上的阳离子胰蛋白酶原基因的第三外显子中的单个点突变与遗传性胰腺炎相关之后，有关慢性胰腺炎和胰腺癌的联系的研究增多，并随后鉴定和报导了多个类似突变。直到最近，EUROPAC研究组展示了他们在遗传性胰腺炎的临床和遗传特征上的工作。在使用从欧洲遗传性胰腺炎登记表(EuropeanRegistryofHereditaryPancreatitis)得到的数据的多水平比例危险模型中，此研究组展示了14个国家中的112个家族(418个患病个体)(Howes2004，ClinicalGastroenterologyandHepatology(2)：252-261)。在症状发作后70年胰腺癌的累积风险(95％CI)是44.0％(8.0％-80.0％)，具有67％(50％-82％)的标准化发病比。以前的研究也显示胰腺癌的估计的终生风险为40％(Lowenfels2001，JAMA286：169-170，Lowenfels1997，JNatlCancerInst89：442-44656)。在胰腺癌中，成像研究不能在可治愈的阶段检测出早期胰腺恶性肿瘤，而在慢性胰腺炎的背景下，成像研究例如EUS，CT或MRI的灵敏度和特异性则降低至和掷硬币同样可靠的程度。因此血清标志物将是在高风险组中检测胰腺恶性肿瘤的不可替代的工具。患有胰腺相关疾病的患者中的代谢变化的报导很少。Schrader等人(Schrader2009，Panceas38：416-421)指出，患有胰腺癌和慢性胰腺炎的患者显示了血清氨基酸水平的显著变化。研究指出在神经酰胺中，在癌细胞表面上的鞘磷脂积极参与了细胞信号转导。已知神经酰胺在癌细胞中诱导凋亡。低水平的鞘磷脂表示对吉西他滨(gemcitabine)治疗的较低响应性(Modrak2009，MolCancerRes7：890-896)。总之，胰腺癌在所有人肿瘤中具有最差的预后(具有0.5-5％的5年存活率)，并且是全世界癌症相关死亡的第四个主要原因。因此其是具有重要社会经济影响的疾病。早期肿瘤的准确诊断和及时的手术切除是目前改善患者预后的唯一现实的前景。因此，本专利技术涉及在受试者中诊断胰腺癌的方法，包括以下步骤：(a)测定疑为患有胰腺癌的受试者的样品中的来自表2a、2b、3a、3b的至少一种生物标志物的量；和(b)比较所述至少一种生物标志物的量与参考量，由此诊断胰腺癌。根据本专利技术提及的方法包括基本上由上述步骤组成的方法，或包括其他步骤的方法。然而，应理解，在优选的实施方案中，方法为离体进行的方法，即不是在人体或动物体上实施的方法。方法优选地可通过自动化辅助。本文使用的术语“诊断”指评估受试者是否患有胰腺癌。如本领域技术人员所理解的，这种评估，尽管优选对100％的研究的受试者是正确的，但通常可能并非对100％的研究的受试者是正确的。然而，该术语要求统计学上显著份额的受试者能够被正确评估和因此被诊断。份额是否统计学上显著的能够由本领域技术人员使用各种熟知的统计评价工具(例如置信区间确定、p-值确定、Student氏t检验(Student`st-test)、曼-怀二氏检验(Mann-Whitneytest)等)立即确定。具体内容可见于Dowdy和Wearden，StatisticsforResearch，JohnWiley&Sons，NewYork1983中。优选的置信区间为至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少95％。p-值优选为0.2、0.1或0.05。该术语包括胰腺癌或其症状的个体诊断，以及患者的连续监控。监控，即在多个时点诊断存在或不存在胰腺癌及其伴随症状，包括监控已知患有胰腺癌的患者以及监控已知处于患上胰腺癌的风险的受试者。此外，监控也可用于测定患者是否被成功治疗或随时间某疗法是否至少减轻胰腺癌的症状。本文使用的术语“胰腺癌”(“pancreaticcancer”或“pancreas本文档来自技高网...

【技术保护点】
在受试者中诊断胰腺癌的方法，所述方法包括以下步骤：(a)在疑为患有胰腺癌的受试者的样品中测定表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物的量；和(b)比较所述至少一种生物标志物的量与参考值，由此诊断胰腺癌。

【技术特征摘要】
2010.06.01 EP 10164624.8;2010.06.01 US 61/350,0421.脯氨酸和任选地表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物、或检测血浆、血液或血清中脯氨酸和任选地表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物的工具用于制备诊断设备或诊断组合物的用途，所述诊断设备或诊断组合物用于在受试者中诊断胰腺癌，其中与不患有胰腺癌的受试者相比，生物标志物脯氨酸的减少指示胰腺癌的存在，其中所述诊断设备或诊断组合物能够在疑为患有胰腺癌的受试者的血浆、血液或血清样品中测定脯氨酸和任选地表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物的量；并通过比较所述脯氨酸和任选地至少一种生物标志物的量与参考值，诊断胰腺癌。2.权利要求1的用途，其中所述参考值源自已知不患有胰腺癌的受试者或受试者组的血浆、血液或血清样品，或为计算的参考值。3.权利要求1的用途，其中所述参考值源自已知患有胰腺癌的受试者或受试者组的血浆、血液或血清样品。4.脯氨酸和任选地表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物、或检测血浆、血液或血清中脯氨酸和任选地表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物的工具用于制备诊断设备或诊断组合物的用途，所述诊断设备或诊断组合物用于鉴定受试者是否需要胰腺癌疗法，其中与不患有胰腺癌的受试者相比，生物标志物脯氨酸的减少指示胰腺癌的存在，其中所述诊断设备或诊断组合物能够在疑为患有胰腺癌的受试者的血浆、血液或血清样品中测定脯氨酸和任选地表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物的量；通过比较所述脯氨酸和任选地至少一种生物标志物的量与参考值，诊断胰腺癌；如果所述受试者被诊断为患有胰腺癌，鉴定需要胰腺癌疗法的受试者。5.权利要求4的用途，其中所述参考值源自已知不患有胰腺癌的受试者或受试者组的血浆、血液或血清样品，或为计算的参考值。6.权利要求4的用途，其中所述参考值源自已知患有胰腺癌的受试者或受试者组的血浆、血液或血清样品。7.脯氨酸和任选地表2a、2b、3a、3b中至少一种生物标志物、或检测血浆、血液或血清中脯氨酸和任选地表2a、2b...

【专利技术属性】
技术研发人员：B·卡姆朗格，R·雷兹卡，M·克卢蒂格，H·卡尔特霍夫，B·施尼温德，J·迈尔勒，M·勒奇，
申请(专利权)人：梅坦诺米克斯保健有限公司，石勒苏益格荷尔斯泰因大学医学院，格赖夫斯瓦尔德恩斯特莫里茨阿尔恩特大学，
类型：发明
国别省市：德国;DE