CHIP蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途制造技术

本发明专利技术涉及CHIP蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途。进一步地，本发明专利技术提供了一种CHIP蛋白在用于制备诊断胰腺癌患者的试剂盒中的用途。更特别地，本发明专利技术提供了CHIP蛋白在制备用于评估胰腺癌患者预后的试剂盒中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及CHIP蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途。进一步地，本专利技术提供了一种CHIP蛋白在用于制备诊断胰腺癌患者的试剂盒中的用途。更特别地，本专利技术提供了CHIP蛋白在制备用于评估胰腺癌患者预后的试剂盒中的用途。【专利说明】CHIP蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途
本专利技术涉及CHIP蛋白作为诊断胰腺癌患者以及评估胰腺癌患者预后的血清标记 物的用途。
技术介绍
胰腺癌是最难早期发现、恶性程度最高和预后最差的肿瘤之一。美国癌症协会对 美国肿瘤发病率及死亡率的统计结果表明，胰腺癌占全部肿瘤死亡原因的第四位，5年生存 率在5%以下。其死亡的主要原因是超过50%患者在发现时已处于晚期，肿瘤已包绕血管或 发生远处转移，且对传统的放化疗或靶向治疗具有一定耐受性。因此，提高胰腺癌的早期诊 断率，抑制肿瘤的生长和远处转移，提高药物的治疗效果，成为改善胰腺癌患者预后的关键 因素。 由于胰腺癌临床发病隐匿，发展迅速，具有较高的侵袭性，而且通常在出现临床症 状时已进入晚期，此时进行手术及放化疗效果极差，而改变这种情况的关键在于早期的诊 断和治疗。因此，对于胰腺癌的肿瘤标记物的研究有助于肿瘤的早期发现，有助于对胰腺 的良性病变或恶性肿瘤的鉴别诊断，为早期手术治疗提供诊断依据。由于血清中可能含有 较多的肿瘤标记物，同时血样的采集安全可靠，因此，通过血清学样本对无症状患者进行胰 腺癌的筛选具有很大的潜力。目前临床上常用的胰腺癌肿瘤学标志物是CA19-9和CA142。 CA19-9是一种唾液酸Lewis血型类粘蛋白糖蛋白抗原，与Lewis血型成分有关，用于鉴别正 常人和胰腺癌患者的敏感性为79% (70%-90%)，特异性为82 (68%-91%)，其中约5%-14%的 人群缺乏Lewis抗原糖基转移酶而不能合成CA19-9,即使发生胰腺癌后其CA19-9的表达并 不升高；而急性胆管炎，胰腺炎胆汁淤积等非胰腺肿瘤疾病均可导致CA19-9表达的增加。 因此，CA19-9表达水平的改变更多的是作为手术或放化疗后肿瘤复发的依据。CA242也是 一种唾液酸化的粘蛋白类型糖抗原，由于同时受到Lewis血型的影响所以灵敏度与CA19-9 相似，约为75% (65%-82%)，特异性为90% (65%-95%)，在与慢性胰腺炎、良性肝病、胆汁淤积 等方面诊断效率略好于CA19-9。这些标志物用于鉴别诊断的准确性并不高，常需要联合使 用。因此，还需要寻找一些敏感性或特异性更好的肿瘤学标志物用于早期诊断。 C末端Hsc70反应蛋白（命名为CHIP)是一个种属间高度保守的胞浆蛋白，在平滑 肌细胞、心肌细胞、骨骼肌和大脑中高度表达。它含有三个功能区，N末端的TPR功能区、 C-末端的U-盒子功能区和中间的正负电荷富集区。CHIP作为一个陪伴蛋白（chaperone) 即可通过TPR基序（motif)与热休克蛋白Hsp70和Hsp90相互作用，辅助新生蛋白折叠，形 成具有正常结构和功能的蛋白，抑制变性蛋白的聚集；又可通过U-盒子功能区作为E3连 接酶，促进蛋白底物的泛素化降解。目前已经发现CHIP在多种肿瘤中发挥重要的作用。可 与CHIP结合并发生降解的蛋白包括突变的p53,雌激素受体，erbB2, SMAD3, HIF-1，SRC-3， NF-κ B，c-Myc，以及磷酸化的AKT等，这些底物都与肿瘤的增殖、侵袭或转移均密切相关。 另一方面，CHIP在乳腺癌、胃癌及脑神经胶质瘤中的表达水平要明显低于癌旁的正常组织， 这些结果均提示CHIP在多种肿瘤中发挥抑癌的作用，目前关于肿瘤患者血清中CHIP表达 水平国内外并没有相关的报道。 本专利技术来源于一个惊人的方法，S卩，本专利技术人发现正常人、慢性胰腺炎患者和胰腺 癌患者三者血清CHIP表达水平有显著性差异。这一结果为胰腺疾病的鉴别诊断以及预后 提供了一个新的思路。
技术实现思路
本专利技术人发现，癌组织表达水平高于癌旁组织，其表达与肿瘤淋巴结转移和术后 转移负相关；CHIP高表达患者预后相对较好，是影响胰腺癌预后的可能危险因素。CHIP在 慢性胰腺炎，胰腺癌患者血清中表达水平明显降低；在胰腺癌患者中，其表达水平与肿瘤远 处转移相关，CHIP可作为鉴别正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患者有效的血清学标志物。 一方面，本专利技术提供了一种CHIP蛋白在用于制备诊断胰腺癌患者的试剂盒中的 用途。 进一步地，本专利技术提供了一种CHIP蛋白作为区分正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患 者的有效的血清学标志物中的用途。 进一步地，本专利技术提供了一种CHIP蛋白作为区分正常人、胰腺良性肿瘤和胰腺癌 患者的有效的血清学标志物中的用途。 进一步地，本专利技术提供了一种CHIP蛋白作为区分胰腺良性肿瘤、胰腺内分泌肿瘤 与正常人的有效的血清学标志物。进一步地，所述的试剂盒用于ELISA方法中。 另一方面，本专利技术提供了 CHIP蛋白在制备用于评估胰腺癌患者预后的试剂盒中 的用途。 进一步地，其中CHIP蛋白高表达患者预后相对较好。 【专利附图】【附图说明】 图1显示了 CHIP和Hsp70在癌和癌旁组织中的表达水平。N代表癌旁胰腺组织， T代表胰腺癌组织。 图2显示了 CHIP在癌组织及癌旁组织表达水平比较。 图3显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和慢性胰腺炎患者的价值。 图4显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和胰腺良性肿瘤患者的价值。 图5显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和胰腺内分泌肿瘤患者的价值。 图6显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和胰腺导管腺癌患者的价值。 图7显示了血清CHIP表达水平鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺良性肿瘤患者的价值。 图8显示了血清CHIP表达水平鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺内分泌肿瘤患者的价 值。 图9显示了血清CHIP表达水平鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺导管腺癌患者的价值。 图10显示了血清CHIP表达水平鉴别胰腺良性肿瘤患者和胰腺内分泌肿瘤患者的 价值。 图11显示了血清CHIP表达水平鉴别胰腺良性肿瘤患者和胰腺导管腺癌患者的价 值。 图12显示了血清CHIP表达水平鉴别胰腺内分泌肿瘤患者和胰腺导管腺癌患者的 价值。 【具体实施方式】 本专利技术涉及的SDS-PAGE (十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是目前最常用 的分离蛋白质的电泳技术。SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结 构，蛋白质同SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结 合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子 团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合 是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度仅取决于分子大小，因此可 以根据蛋白分子量大小将不同的蛋白拉出不同的梯度进而检测。 Western blot即蛋白质印迹。被检测物是蛋白质，"探针"是抗体，"显色"用标记 的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如PVDF薄膜)上，固相载体以非 共价键本文档来自技高网...

【技术保护点】
CHIP蛋白标志物在制备用于诊断胰腺癌患者的试剂盒中的用途。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵玉沛，张太平，王天笑，由磊，周立，廖泉，戴梦华，舒红，徐建威，李建，曹喆，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：北京;11