一种用于结肠癌预后判断的方法及试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种用于结肠癌预后判断的方法，包括检测一种多肽的氨基酸序列，所述氨基酸序列选自SEQ NO.1所示序列或选自与SEQ NO.1所示序列显示至少99％同一性的序列。本发明专利技术提供了一种结肠癌预后评估判断新标记物：HOXB‑AS3多肽。临床研究证实，其在结肠癌组织中低表达或不表达与结肠癌患者预后差呈正相关，结肠癌组织中HOXB‑AS3多肽低水平的患者具有更高的死亡率和更短的生存期。由此可知，采用HOXB‑AS3多肽作为生物标志物有效地提高了临床中使用试剂盒进行结肠癌预后判断的阳性符合率。并且通过检测本发明专利技术的多肽在生物学样品组织切片中的水平，可有助于判断结肠癌的发生及其恶性程度和转移。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肿瘤的诊断和治疗领域，具体而言，涉及一种用于结肠癌预后判断的方法及试剂盒。
技术介绍
结肠癌是世界上一种常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率在各类肿瘤中排第3位。全球每年新发病例约为120万例，每年死亡人数高达60万。近年来，随着人们生活水平的提高，生活方式、饮食结构的改变，人口老龄化的加剧，结肠癌发病率在我国逐年上升，并且呈现出年轻化的趋势，其发病率和死亡率分别位居我国肿瘤发病率和死亡率的第3和5位。早期局限性结肠癌患者的5年生存率可达90％，然而仅有不到40％的结肠癌患者在早期得到确证。大多数结肠癌患者就诊时，其已经中晚期和大概40～50％发生了远处转移，晚期结肠癌患者生存率则降到11％左右。随着结肠癌诊疗技术的不断发展，结肠癌的预后有了很大的改善，但晚期结肠癌患者的预后仍然不尽如意。临床治疗失败的最主要原因是结肠癌发生了转移或复发。因此，鉴定能用于提示结肠癌转移复发的新的标记物，有助于临床上评估结肠癌患者的预后，判断手术切除后是否需要进一步的辅助治疗(如化疗)。目前，TNM分期是判断结肠癌患者预后的最重要临床预测指标。然而，许多结肠癌患者即使TNM分期属于早期，肿瘤仍然发生转移和复发，说明部分目前临床诊疗技术上发现没有发生转移的结肠癌，仍然存在转移复发的潜能。因此，很需要研究开发出更好的用于评估结肠癌患者预后的新标记物。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种用于结肠癌预后判断的方法，包括检测一种多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列选自SEQ NO.1所示序列或选自与SEQ NO.1所示序列显示至少99％同一性的序列。在某些实施方式中，所述的多肽为HOXB-AS3多肽。在某些实施方式中，所述检测HOXB-AS3多肽的抗原表位肽序列选自SEQ NO.2或选自与SEQ NO.2所示序列显示至少99％同一性的序列。在某些实施方式中，所述抗原表位肽的纯度>85％。在某些实施方式中，所述抗原表位肽偶联有钥孔戚血蓝蛋白作为载体蛋白，增强抗原表位肽的免疫原性。在某些实施方式中，所述检测一种多肽的氨基酸序列的步骤之前，还包括下列步骤：提供分离的待测试的生物学样品；将所述生物学样品进行石蜡包埋并制成组织切片。在某些实施方式中，所述检测一种多肽的氨基酸序列的步骤之后，还包括下列步骤：依据所述羊抗兔二抗上偶联的二氨基联苯胺对所述组织切片中结肠癌细胞染色的强度和面积进行评分；所述细胞染色的强度评分和所述细胞的染色面积评分相加，获得HOXB-AS3多肽表达水平的最终评分；依据所述最终评分判断HOXB-AS3多肽在结肠癌组织中表达水平，从而实现对结肠癌的诊断或预后判断。在某些实施方式中，还包括对结肠癌组织免疫组化染色切片进行成像的步骤。本专利技术还提供了一种用于结肠癌预后判断的试剂盒，所述试剂盒应用结肠癌预后判断的方法进行结肠癌预后判断。本专利技术提供的一种用于结肠癌预后判断的方法及试剂盒的优点在于：(1)提供一种结肠癌预后评估判断新标记物：HOXB-AS3多肽。临床研究证实，其在结肠癌组织中低表达或不表达与结肠癌患者预后差呈正相关，结肠癌组织中HOXB-AS3多肽低水平的患者具有更高的死亡率和更短的生存期。由此可知，采用HOXB-AS3多肽作为生物标志物有效的提高了临床中使用试剂盒进行结肠癌预后判断的阳性符合率。(2)本专利技术的多肽HOXB-AS3可作为结肠癌预后判断的生物标志物。并且通过使用本专利技术的多肽的特异性抗体来检测本专利技术的多肽在生物学样品的组织切片中的水平，可有助于判断结肠癌的发生及其恶性程度和转移。(3)在本专利技术之前，还没有出现涉及本专利技术蛋白多肽用于结肠癌预后评估诊断的公开报道，更没有出现证实HOXB-AS3长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)编码一种活性多肽 的公开报道，也就更没有出现HOXB-AS3多肽用于结肠癌预后评估诊断的公开报道。综上所述，本专利技术具有上述诸多的优点及实用价值，并在同类产品中未见有类似的方法公开发表或使用而确属创新。附图说明应当理解的是，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实施例2中抗HOXB-AS3抗体能够特异识别和检测HOXB-AS3多肽的结果图；图2为本专利技术实施例3的HOXB-AS3多肽在同一来源不同侵袭转移潜能结肠癌细胞中表达的结果；图3为本专利技术实施例4的HOXB-AS3多肽在3对新鲜冰冻成对的结肠癌组织与其对应癌傍结肠组织中的结果。图4本专利技术实施例5中HOXB-AS3多肽在结肠癌和对应癌傍正常结肠组织中表达的示意图；图4a表示对应癌傍正常结肠组织；图4b表示结肠癌组织；图5为本专利技术实施例5的HOXB-AS3多肽在90对成对的结肠癌组织与其对应癌傍结肠石蜡组织中表达结果；图6为本专利技术实施例5中HOXB-AS3多肽表达水平高低与结肠癌患者死亡率关系的结果；图7为本专利技术实施例5中HOXB-AS3多肽不同表达水平对结 肠癌患者预后判断的Kaplan-Meier分析曲线图。具体实施方式下面结合具体实施例的方式对本专利技术的权利要求做进一步的详细说明，在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术。但是本专利技术能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似改进，因此本专利技术不受下面公开的具体实施的限制。本专利技术提供了一种用于结肠癌预后判断的方法，包括检测一种多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列选自SEQ NO.1所示序列或选自与SEQ NO.1所示序列显示至少99％同一性的序列。进一步的，所述的多肽为HOXB-AS3多肽。上述，需要理解的是，提供一种结肠癌预后评估判断新标记物：HOXB-AS3多肽。临床研究证实，其在结肠癌组织中低表达或不表达与结肠癌患者预后差呈正相关，结肠癌组织中HOXB-AS3多肽低水平的患者具有更高的死亡率和更短的生存期。由此可知，采用HOXB-AS多肽作为生物标志物有效的提高了临床中使用试剂盒进行结肠癌诊断或预后判断的阳性符合率。可以理解的是，本专利技术的多肽HOXB-AS3可作为结肠癌预后判断的生物标志物。并且通过使用本专利技术的多肽的特异性抗体来检测本专利技术的多肽在生物学样品的组织切片中的水平，可有助于判断结肠癌的发生及其恶性程度和转移。在本专利技术之前，还没有出现涉及本专利技术蛋白多肽用于结肠癌 预后评估诊断的公开报道，更没有出现证实HOXB-AS长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)编码一种活性多肽的公开报道，也就更没有出现HOXB-AS3多肽用于结肠癌预后评估诊断的公开报道。进一步的，所述检测HOXB-AS3多肽的抗原表位肽序列选自SEQ NO.2或选自与SEQ NO.2所示序列显示至少99％同一性的序列。进一步的，所述抗原表位肽的纯度>85％。进一步的，所述抗原表位肽偶联有钥孔戚血蓝蛋白KLH作为载体蛋白，增强抗原表位肽的免疫原性。进一步的，所述检测一种多肽的氨基酸序列的步骤之前，还包括下列步骤：提供分离的待测试的生物学样品；将所述生物学样品进行石蜡包埋并制成组织切片。进一步的，所述检测一种多肽的氨基酸序列的步骤之本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于结肠癌预后判断的方法，其特征在于：包括检测一种多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列选自SEQ NO.1所示序列或选自与SEQ NO.1所示序列显示至少99％同一性的序列。

【技术特征摘要】
1.一种用于结肠癌预后判断的方法，其特征在于：包括检测一种多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列选自SEQ NO.1所示序列或选自与SEQ NO.1所示序列显示至少99％同一性的序列。2.如权利要求1所述的用于结肠癌预后判断的方法，其特征在于：所述的多肽为HOXB-AS3多肽。3.如权利要求1所述的用于结肠癌预后判断的方法，其特征在于：所述检测HOXB-AS3多肽的抗原表位肽序列选自SEQ NO.2或选自与SEQ NO.2所示序列显示至少99％同一性的序列。4.如权利要求3所述的用于结肠癌预后判断的方法，其特征在于：所述抗原表位肽的纯度>85％。5.如权利要求3所述的用于结肠癌预后判断的方法，其特征在于：所述抗原表位肽偶联有钥孔戚血蓝蛋白作为载体蛋白，增强抗原表位肽的免疫原性。6.如权利要求5所述的用于结肠癌预后判断的方法，其特征在于：所述检测一种多肽的...

【专利技术属性】
技术研发人员：晏光荣，黄金舟，陈敏，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第三医院，
类型：发明
国别省市：广东;44