用于激活辅助性T细胞的方法技术

本发明专利技术涉及用于激活辅助性T细胞的方法，所述方法包括通过将WT1肽加入抗原呈递细胞来激活辅助性T细胞的步骤，其中所述WT1肽具有与以下任何MHC II类分子结合的能力：HLA‑DRB1*0101分子、HLA‑DRB1*0401分子、HLA‑DRB1*0403分子、HLA‑DRB1*0406分子、HLA‑DRB1*0803分子、HLA‑DRB1*0901分子、HLA‑DRB1*1101分子、HLA‑DRB3*0202分子、HLA‑DRB4*0101分子、HLA‑DPB1*0201分子或HLA‑DPB1*0301分子等。

【技术实现步骤摘要】
本申请是国际申请日为2011年10月4日的国际申请PCT/JP2011/072874进入中国、申请号为201180058552.2的题为“用于激活辅助性T细胞的方法”的专利技术专利申请的分案申请。

本专利技术涉及用于激活辅助性T细胞的方法及用于其的组合物，所述方法包括通过将WT1肽加入抗原呈递细胞来激活辅助性T细胞的步骤，其中所述WT1肽具有与以下任何MHCII类分子结合的能力：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DRB1*1501分子、HLA-DRB1*0405分子、HLA-DRB1*1502分子、HLA-DPB1*0501分子、HLA-DPB1*0901分子、HLA-DPB1*0201分子或HLA-DPB1*0301分子；涉及用于激活细胞毒性T细胞的方法；涉及细胞毒性T细胞(CTL)的激活诱导物；涉及通过激活辅助性T细胞和/或细胞毒性T细胞来治疗和/或预防癌症的药物组合物等。

技术介绍

WT1基因(Wilms’肿瘤1基因)被鉴定为Wilms’肿瘤(童年期肾癌)的致病基因，且该基因编码具有锌指结构的转录因子(非专利文献1和2)。随后的研究显示，上述基因在造血器官肿瘤或实体癌中充当癌基因(非专利文献3-6)。
已经表明，通过使用具有编码WT1蛋白的部分氨基酸序列的肽来体外刺激外周血单核细胞，诱导了对该肽特异的细胞毒性T细胞(CTL)，且这些CTL损伤内源性表达WT1的造血器官肿瘤或实体癌的癌细胞。CTL识别以与MHCI类分子结合的复合物形式的上述肽，并因此该肽根据MHCI类的亚型不同(专利文献1-4和非专利文献7)。
在另一方面，为有效诱导CTL，对癌抗原特异的辅助性T细胞的存在是重要的(非专利文献8)。通过识别抗原呈递细胞上的MHCII类分子与抗原肽的复合物来诱导和激活辅助性T细胞。激活的辅助性T细胞通过产生细胞因子例如IL-2、IL-4、IL-5、IL-6或干扰素来帮助B细胞的增殖、分化和成熟。因为所述辅助性T细胞具有通过促进B细胞和T细胞的增殖和激活来激活免疫系统的功能，所以建议在癌症免疫治疗中通过MHCII类-结合抗原肽增强辅助性T细胞的功能以增强癌症疫苗的作用是有用的(非专利文献9)。
最近显示，可与多种MHCII类分子结合并激活辅助性T细胞的非选择性(promiscuous)辅助性肽存在于具有编码WT1蛋白的部分氨基酸序列的特定肽(在本说明书中以下亦称为WT1肽)中(专利文献5和6)。然而，由于MHCII类分子的种类多，证实是否WT1肽亦对其他MHCII类分子具有作用是非常困难的。
现有技术文献专利文献专利文献1：国际公布号WO2003/106682
专利文献2：国际公布号WO2005/095598
专利文献3：国际公布号WO2007/097358
专利文献4：国际申请号PCT/JP2007/074146
专利文献5：国际公布号WO2005/045027
专利文献6：国际公布号WO2008/105462
非专利文献非专利文献1：DanielA.Haber等,Cell.1990年6月29日;61(7):1257-69
非专利文献2：CallKM等,Cell.1990年2月9日;60(3):509-20
非专利文献3：MenkeAL等,IntRevCytol.1998;181:151-212.综述
非专利文献4：YamagamiT等,Blood.1996年4月1日;87(7):2878-84
非专利文献5：InoueK等,Blood.1998年4月15日;91(8):2969-76
非专利文献6：TsuboiA等,LeukRes.1999年5月;23(5):499-505
非专利文献7：OkaY等,Immunogenetics.2000年2月;51(2):99-107
非专利文献8：GaoFG等,CancerRes.2002年11月15日;62(22):6438-41
非专利文献9：ZengG,JImmunother.2001年5月;24(3):195-204。

技术实现思路

专利技术所要解决的问题因此，本专利技术所要实现的目的是，通过将特定的WT1肽施用给广泛的MHCII类分子-阳性受试者，提供用于激活辅助性T细胞的方法、用于激活细胞毒性T细胞的方法，提供细胞毒性T细胞的激活诱导物，提供用于治疗/预防癌症的药物组合物等。
用于解决问题的手段在这些背景下，本专利技术人已仔细研究并发现，具有氨基酸序列LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis的肽与以下分子结合：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DRB1*1501分子、HLA-DRB1*0405分子、HLA-DRB1*1502分子、HLA-DPB1*0501分子、HLA-DPB1*0901分子、HLA-DPB1*0201分子和HLA-DPB1*0301分子，并激活辅助性T细胞和/或细胞毒性T细胞。因此，完成本专利技术。
本专利技术提供：
(1)用于激活辅助性T细胞的方法，所述方法包括通过将WT1肽加入抗原呈递细胞来激活辅助性T细胞的步骤，其中所述WT1肽具有与以下任何MHCII类分子结合的能力：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DPB1*0201分子或HLA-DPB1*0301分子；
(2)(1)的方法，其中所述WT1肽具有与以下至少2种MHCII类分子结合的能力：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DPB1*0201分子和HLA-DPB1*0301分子；
(3)(1)或(2)的方法，其中所述WT1肽还具有与以下分子结合的能力：HLA-DRB1*0405分子、HLA-DRB1*1501分子、HLA-DRB1*1502分子、HLA-DPB1*0501分子和/或HLA-DPB1*0901分子；
(4)(1)-(3)中任一项的方法，其中将WT1肽加入抗原呈递细胞是通过加入WT1肽、编码WT1肽的多核本文档来自技高网...

【技术保护点】
WT1肽在制备用于激活辅助性T细胞的方法中的试剂盒中的用途，所述方法包括通过将WT1肽加入抗原呈递细胞来激活辅助性T细胞的步骤，其中所述WT1肽具有与以下任何MHC II类分子结合的能力：HLA‑DRB1*0101分子、HLA‑DRB1*0401分子、HLA‑DRB1*0403分子、HLA‑DRB1*0406分子、HLA‑DRB1*0803分子、HLA‑DRB1*0901分子、HLA‑DRB1*1101分子、HLA‑DRB3*0202分子、HLA‑DRB4*0101分子、HLA‑DPB1*0201分子或HLA‑DPB1*0301分子，其中所述WT1肽是选自下述的肽：（a）由SEQ ID NO:2的氨基酸序列（Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His）组成的肽，其中1‑5个氨基酸被取代、缺失或添加；（b）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成的肽，其含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列（Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His）；和（c）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成的肽，其含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列（Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His），其中1‑5个氨基酸被取代、缺失或添加。...

【技术特征摘要】
2010.10.05 JP 2010-2258061.WT1肽在制备用于激活辅助性T细胞的方法中的试剂盒中的用途，所述方法包括通过将WT1肽加入抗原呈递细胞来激活辅助性T细胞的步骤，其中所述WT1肽具有与以下任何MHCII类分子结合的能力：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DPB1*0201分子或HLA-DPB1*0301分子，其中所述WT1肽是选自下述的肽：
（a）由SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis）组成的肽，其中1-5个氨基酸被取代、缺失或添加；
（b）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成的肽，其含有SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis）；和
（c）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成的肽，其含有SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis），其中1-5个氨基酸被取代、缺失或添加。
2.权利要求1的用途，其中所述WT1肽具有与以下至少2种MHCII类分子结合的能力：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DPB1*0201分子和HLA-DPB1*0301分子。
3.权利要求1或2的用途，其中所述WT1肽还具有与以下分子结合的能力：HLA-DRB1*0405分子、HLA-DRB1*1501分子、HLA-DRB1*1502分子、HLA-DPB1*0501分子和/或HLA-DPB1*0901分子。
4.权利要求1或2的用途，其中将WT1肽加入抗原呈递细胞是通过加入WT1肽、编码所述WT1肽的多核苷酸、包含该多肽的表达载体或者包含该表达载体的细胞进行的。
5.权利要求3的用途，其中将WT1肽加入抗原呈递细胞是通过加入WT1肽、编码所述WT1肽的多核苷酸、包含该多肽的表达载体或者包含该表达载体的细胞进行的。
6.用于通过将WT1肽加入抗原呈递细胞来激活辅助性T细胞的包含WT1肽的组合物，其中所述WT1肽具有与以下任何MHCII类分子结合的能力：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DPB1*0201分子或HLA-DPB1*0301分子，其中所述WT1肽是选自下述的肽：
（a）由SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis）组成的肽，其中1-5个氨基酸被取代、缺失或添加；
（b）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成的肽，其含有SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis）；和
（c）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成的肽，其含有SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis），其中1-5个氨基酸被取代、缺失或添加。
7.权利要求6的组合物，其中所述WT1肽具有与以下至少2种MHCII类分子结合的能力：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DPB1*0201分子和HLA-DPB1*0301分子。
8.权利要求6或7的组合物，其中所述WT1肽还具有与以下分子结合的能力：HLA-DRB1*0405分子、HLA-DRB1*1501分子、HLA-DRB1*1502分子、HLA-DPB1*0501分子和/或HLA-DPB1*0901分子。
9.权利要求6或7的组合物，其中将WT1肽加入抗原呈递细胞是通过加入WT1肽、编码所述WT1肽的多核苷酸、包含该多核苷酸的表达载体或者包含该表达载体的细胞进行的。
10.权利要求8的组合物，其中将WT1肽加入抗原呈递细胞是通过加入WT1肽、编码所述WT1肽的多核苷酸、包含该多核苷酸的表达载体或者包含该表达载体的细胞进行的。
11.呈递包含WT1肽的抗原肽与MHCII类分子的复合物的抗原呈递细胞，其中所述MHCII类分子是以下任何MHCII类分子：HLA-DRB1*0101分子、HLA-DRB1*0401分子、HLA-DRB1*0403分子、HLA-DRB1*0406分子、HLA-DRB1*0803分子、HLA-DRB1*0901分子、HLA-DRB1*1101分子、HLA-DRB3*0202分子、HLA-DRB4*0101分子、HLA-DPB1*0201分子或HLA-DPB1*0301分子，其中所述WT1肽是选自下述的肽：
（a）由SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis）组成的肽，其中1-5个氨基酸被取代、缺失或添加；
（b）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成的肽，其含有SEQIDNO:2的氨基酸序列（LysArgTyrPheLysLeuSerHisLeuGlnMetHisSerArgLysHis）；和
（c）由25个氨基酸或更少的氨基酸组成...

【专利技术属性】
技术研发人员：杉山治夫，十河真司，佐藤政芳，北本龙生，后藤义博，
申请(专利权)人：株式会社癌免疫研究所，大塚制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP