本发明专利技术公开了一株阿姆斯特丹散囊菌，该阿姆斯特丹散囊菌的保藏编号为CCTCC NO：M 2014413。本发明专利技术还公开了一种制备苯并呋喃类化合物的方法，该方法包括将保藏编号为CCTCC NO：M 2014413的阿姆斯特丹散囊菌进行发酵，得到含有苯并呋喃类化合物的发酵培养物，其中，所述苯并呋喃类化合物的结构式如下式(I)所示。此外，本发明专利技术还公开了结构式如式(I)所示的苯并呋喃类化合物。本发明专利技术的阿姆斯特丹散囊菌可以发酵获得苯并呋喃类化合物，获得的苯并呋喃类化合物几乎不溶于水，可以用作黄色色素。
【技术实现步骤摘要】
一株阿姆斯特丹散囊菌和苯并呋喃类化合物及其制备方法
本专利技术涉及一株阿姆斯特丹散囊菌(Eurotiumamstelodami)和苯并呋喃类化合物及其制备方法，具体地，涉及一株阿姆斯特丹散囊菌、利用该阿姆斯特丹散囊菌制备苯并呋喃类化合物的方法以及苯并呋喃类化合物。
技术介绍
散囊菌广泛分布于自然环境，也是中国、韩国和日本等国一些传统发酵食品中的重要发酵剂，例如它们是日本鲣鱼发霉工艺和中国茯砖茶发花工艺的优势菌。作为一类与人类生活密切相关的常见真菌，人们一直致力于了解散囊菌在各种生态环境中的分布情况，发现及研究散囊菌的次级代谢产物(已知的主要包括蒽醌衍生物类色素、苯甲醛衍生物类色素以及二酮哌嗪类霉菌毒素等)，以期阐明散囊菌在食品工业领域的功能价值或安全性等，这也是天然产物资源研究开发的重要内容。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株新的阿姆斯特丹散囊菌和苯并呋喃类化合物及其制备方法。为了实现上述目的，一方面，本专利技术提供了一株阿姆斯特丹散囊菌，该阿姆斯特丹散囊菌的保藏编号为CCTCCNO：M2014413。另一方面，本专利技术提供了一种制备苯并呋喃类化合物的方法，该方法包括将保藏编号为CCTCCNO：M2014413的阿姆斯特丹散囊菌进行发酵，得到含有苯并呋喃类化合物的发酵培养物，其中，所述苯并呋喃类化合物的结构式如下式(I)所示：再一方面，本专利技术提供了结构式如式(I)所示的苯并呋喃类化合物。通过上述技术方案，本专利技术的阿姆斯特丹散囊菌可以发酵获得苯并呋喃类化合物，获得的苯并呋喃类化合物几乎不溶于水，可以用作黄色色素。本专利技术的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。生物保藏本专利技术的阿姆斯特丹散囊菌(Eurotiumamstelodami)，于2014年9月14日被保藏在中国典型培养物保藏中心(地址：武汉市武昌珞珈山，武汉大学，邮政编码：430072)(保藏单位的缩写为CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO：M2014413。附图说明附图是用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本专利技术，但并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1是本专利技术的阿姆斯特丹散囊菌的形态照片，其中，图1-A至图1-C为显微镜照片，图1-D表示平板培养的菌落照片；图2是本专利技术的苯并呋喃类化合物的1H-13C相关图谱(HMBC)和1H-1H相关图谱(COSY)，其中，细线表示HMBC谱，粗线表示COSY谱；图3是由紫外分光光度计测得的本专利技术的苯并呋喃类化合物的光谱扫描曲线图。具体实施方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。在本专利技术中，在未作相反说明的情况下，本专利技术中的各种实验均在常压下进行；涉及的各个物质(特别是柱层析使用的硅胶和凝胶)的重量以干基计。本专利技术提供了一株阿姆斯特丹散囊菌，该阿姆斯特丹散囊菌的保藏编号为CCTCCNO：M2014413。本专利技术的阿姆斯特丹散囊菌(实验室命名为TIB.BPE.12001)的分生孢子呈灰绿色，菌落反面呈黄褐色，子囊近球形，子囊孢子双凸镜形，两瓣中间具沟，表面粗糙，其形态特征如图1所示(图1中，图1-A、图1-B和图1-C为阿姆斯特丹散囊菌在固体PDA培养基中培养4天后的显微镜观察照片，图1-D为PDA平板菌落观察照片)。本专利技术提供的制备苯并呋喃类化合物的方法包括将保藏编号为CCTCCNO：M2014413的阿姆斯特丹散囊菌进行发酵，得到含有苯并呋喃类化合物的发酵培养物，其中，所述苯并呋喃类化合物的结构式如下式(I)所示：根据本专利技术，对所述发酵的方式没有特别限定，优选地，所述发酵的方式为在20-25℃下静置培养20-40天。根据本专利技术，所述发酵优选为固体发酵，因此，所述发酵采用的培养基含有1重量份的基材和1-1.5重量份的水(即，发酵采用的培养基含有基材和水，且基材和水的重量比为1:1-1.5)，所述基材优选为小麦、大麦、莜麦、燕麦、粳米、籼米、玉米、糯米、芡实和薏米中的至少一种。相对于每克的发酵采用的培养基，所述阿姆斯特丹散囊菌的接种量为104-108个。本专利技术中，所述方法还包括在发酵前对阿姆斯特丹散囊菌依次进行活化和种子培养，活化是为了将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，使其恢复发酵性能；种子培养是为了得到较多的纯而壮的培养物，即获得活力旺盛、接种数量足够的阿姆斯特丹散囊菌。可以采用本领域常规的方法进行活化和种子培养，例如，所述活化可以包括将阿姆斯特丹散囊菌的菌丝体接种至PDA平板上，28-32℃下培养3-5天。所述种子培养可以包括将活化后的阿姆斯特丹散囊菌接种至种子培养基(液体)中，28-32℃培养2-3天。PDA平板和种子培养基均为本领域技术人员所熟知，在此不再赘述。根据本专利技术，所述方法还可以包括从发酵培养物中纯化苯并呋喃类化合物，所述纯化包括以下步骤：(1)用有机溶剂对发酵培养物进行萃取，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、正丁酮、丙酮、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯和乙酸甲酯中的至少一种；(2)将萃取后的产物进行柱层析分离。优选地，步骤(1)中，所述萃取的温度为20-35℃，时间为10-30h。优选地，步骤(2)中，所述柱层析分离包括交替进行硅胶柱层析和凝胶柱层析。更优选地，进行柱层析的方式为交替进行硅胶柱层析和凝胶柱层析两次。第一次硅胶柱层析收集由二氯甲烷与甲醇体积比为100:0-99:1的洗脱液洗脱的馏分，第二次硅胶柱层析收集由石油醚和氯仿体积比为1.5-2.5:1的洗脱液洗脱的馏分，两次凝胶柱层析均收集由甲醇洗脱的馏分。本专利技术中，硅胶柱层析中使用的硅胶与待纯化的苯并呋喃类化合物的重量比优选为20-50:1。使用的硅胶的颗粒大小优选为200-300目。硅胶柱层析中，待纯化的苯并呋喃类化合物与硅胶接触的时间优选为0.5-3h。本专利技术中，凝胶柱层析使用的凝胶与待纯化的苯并呋喃类化合物的重量比优选为60-150:1。使用的凝胶的载量优选为250-350mg/mg凝胶。使用的凝胶可以为交联葡聚糖凝胶(如SephadexG或SephadexLH-20)，优选为羟丙基葡聚糖凝胶(如SephadexLH-20)。凝胶柱层析中，待纯化的苯并呋喃类化合物与凝胶接触的时间优选为0.5-3h。在进行凝胶柱层析时，可以使用自动收集器收集洗脱液，并采用薄层层析进行检测，薄层层析使用的固定相可以为硅胶、氧化铝或纤维素，流动相可以是体积比为3:1的石油醚-乙酸乙酯、10:1石油醚-丙酮或20:1的二氯甲烷-甲醇，薄层层析显示黄色条带，则收集并合并该部分的洗脱液。在进行凝胶柱层析时，也可以直接收集保留体积为70-80mL的过柱后洗脱液，并将其用于后续步骤。根据本专利技术，本领域技术人员能够理解的是，柱层析分离过程中，前一步得到的洗脱液用于下一步的柱层析之前，需要根据情况适当地对洗脱液进行浓缩，而本文不再对此进行赘述。本专利技术还提供了一种苯并呋喃类化合物，该苯并呋喃类化合物的结构式如上式(I)所示。本专利技术提供的苯并呋喃类化合物的分子式为C19H22O3，不溶于水，呈黄色粉末状，可以用作黄色色素。以下将通过实施例对本专利技术进行详细描述。以下实施例中，200-300目硅胶购自青岛海洋化工有限公本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株阿姆斯特丹散囊菌(Eurotium amstelodami)，该阿姆斯特丹散囊菌的保藏编号为CCTCC NO：M 2014413。
【技术特征摘要】
1.一株阿姆斯特丹散囊菌(Eurotiumamstelodami)，该阿姆斯特丹散囊菌的保藏编号为CCTCCNO：M2014413。2.一种制备苯并呋喃类化合物的方法，其特征在于，该方法包括将保藏编号为CCTCCNO：M2014413的阿姆斯特丹散囊菌进行发酵，得到含有苯并呋喃类化合物的发酵培养物，其中，所述苯并呋喃类化合物的结构式如下式(I)所示：3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述发酵的方式为在20-25℃下静置培养20-40天。4.根据权利要求2或3所述的方法，其中，所述发酵采用的培养基含有1重量份的基材和1-1.5重量份的水，所述基材为小麦、大麦、莜麦、燕麦、粳米、籼米、玉米、糯米、芡实和薏米中的至少一种。5.根据权利要求2所述的方法，其中，所述方法还包括从发酵培养物中纯化苯并呋喃类化合物，所述纯化包括以下步骤：(1)用有机溶剂对发酵培养物进行萃取，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇、正丁酮、丙酮、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯和乙酸甲酯中的至少一种；(2)将萃取后的产物进行柱层析分离。6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述柱层析分离包括交替进行硅胶柱层析和凝胶柱...
【专利技术属性】
技术研发人员：姜文侠，刘东泽，刘琦，杨萍，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12
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