一种从核桃中综合提取有效成分的方法技术

本发明专利技术公开了一种从核桃中综合提取有效成分的方法，步骤为：1)将核桃仁加水磨成核桃浆，灭酶，加入复合酶，反应，离心，得到清油、水解液及残渣三部分，收集清油，得到脂肪酸；2)将水解液灭酶，加入乙醇沉淀，离心，收集上清液和第一种沉淀物，将上清液冻干，得到活性肽；3)向步骤1)获得的残渣中加入去离子水，超声‑真空提取，抽滤，得到多糖的提取液；蒸发浓缩，加入乙醇沉淀，离心分离，得第二种沉淀物，与第一种沉淀物合并，脱色，离心，干燥，得到多糖。本发明专利技术的方法能获得核桃仁中的脂肪酸、活性肽和多糖，操作简单，耗时少，能耗低，溶剂环保、活性肽纯度高，品质好，脂肪酸、活性肽和多糖的得率高。

【技术实现步骤摘要】
一种从核桃中综合提取有效成分的方法
本专利技术涉及一种从核桃中综合获取有效成分的方法。
技术介绍
核桃(JuglansregiaL.)又名胡桃、羌桃，属胡桃科胡桃属植物。在我国，核桃栽培面积居世界首位。核桃是一种集蛋白质、脂肪、纤维素、维生素等营养要素于一身的优良干果类食品，营养丰富，经济价值高，性温、味甘、无毒，有健胃、补血、润肺、养神等功效。核桃的药理活性有很多，最主要的有：抗肿瘤活性、抗氧化性、抑菌作用和降血压作用等。据报道，每100g核桃仁含有优质脂肪63.00～70.00g、蛋白质14.60～19.00g、碳水化合物5.40～10.00g、磷280.00mg、钙85.00mg、铁2.60mg、钾3.00mg、维生素A0.36mg、维生素B10.26mg、维生素B20.15mg、烟酸1.00mg、核黄素0.11mg、尼克酸1.00mg、硫胺素0.17mg，还含有少量的硒、锰、铬等矿物质和维生素E、维生素K等，含有丰富的卵磷脂。核桃仁中含量最高的成分为脂肪，核桃仁的含油量高达60％～70％，核桃油中不饱和脂肪酸的含量也高达90％。尤其核桃仁中具有含量相对较高的亚油酸和亚麻酸，有益人体健康，棕榈酸和硬脂酸属于饱和脂肪酸，使用过多可致心血管疾病，而相比其他食用油脂肪酸，核桃油含有的棕榈酸的硬脂酸的含量相对较低。核桃中蛋白的含量约占13～16％，共含有4种蛋白，含量最高的是谷蛋白，为碱溶性蛋白，占核桃蛋白总量的70％以上，另外三种按含量排列依次为球蛋白、清蛋白和醇溶谷蛋白。核桃蛋白经蛋白酶水解后，可得到核桃多肽，属于生物活性肽，具有抗氧化活性、抑菌性及降血压活性等多种药理活性。核桃含有较高含量的多糖，多糖及其复合物是自然界含量丰富的天然大分子物质之一，对于维持生命活动起着至关重要的作用。在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化和降血糖等方面显示出良好的应用前景。目前提取脂肪酸的方法主要采用有机相浸出法，提取过程易造成污染，且获得的脂肪酸多带有有机试剂残余，使得品质下降。提取活性肽和多糖的方法则主要采取蛋白酶水解法和单纯的热水浸提法，提取时间长且得率较低。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，一种从核桃中综合提取有效成分的方法。本专利技术的技术方法概述如下：一种从核桃中综合提取有效成分的方法，其特征是包括如下步骤：1)将核桃仁加水磨成核桃浆，灭酶，加入复合酶，复合酶为核桃仁质量的2％～5％，在30℃～60℃，pH为7～9的条件下，反应1.5h～4h，离心，得到清油、水解液及残渣三部分，收集清油，得到脂肪酸；2)将水解液升温至80～100℃灭酶，加入乙醇至乙醇体积浓度70％以上进行沉淀，离心，收集上清液和第一种沉淀物，将上清液冻干，得到活性肽；3)按质量比为1:20～1:40的比例，向步骤1)获得的残渣中加入去离子水，在超声波功率400W～700W，真空度0.02MPa～0.08MPa，60℃～80℃的条件下，提取10min～50min，抽滤，滤渣再重复提取二次，合并滤液，得到多糖的提取液；将所述多糖提取液在40～60℃和0.06～0.1MPa条件下蒸发浓缩得浓缩液，在浓缩液中加入乙醇至乙醇体积浓度70％以上进行沉淀，离心分离，收集第二种沉淀物，将所述第二种沉淀与所述第一种沉淀物合并为总沉淀物，用无水乙醇洗涤脱色，离心，干燥，得到多糖。复合酶由1:1:1～3的果胶酶、纤维素酶和蛋白酶组成。所述蛋白酶为碱性蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和复合植物水解蛋白酶中至少一种。本专利技术的方法能获得核桃仁中的脂肪酸、活性肽和多糖，操作简单，耗时少，能耗低，溶剂环保、活性肽纯度高，品质好，脂肪酸、活性肽和多糖的得率高，分别在47.5％、17.6％及9.3％以上，可达到61.6％，24.2％和11.3％。附图说明图1为核桃用传统方法和本专利技术的方法(综合)获得的脂肪酸、活性肽、多糖平均得率比较。图2为本专利技术的方法工艺流程图。具体实施方式复合植物水解蛋白酶为天津诺奥酶制剂有限公司生产。下面结合具体实施例对本专利技术提供的一种从核桃中综合提取有效成分的方法进行详细说明。实施例1一种从核桃中综合提取有效成分的方法，包括如下步骤：1)将核桃仁4℃条件下加10质量倍的水浸泡24h，磨成核桃浆，100℃灭酶5min，加入复合酶，复合酶为核桃仁质量的2％，在40℃，pH为7.5的条件下，反应4h，离心，得到清油、水解液及残渣三部分，收集清油，得到脂肪酸，得率为52.9％；复合酶由质量比为1:1:1:1的果胶酶、纤维素酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶组成；2)将步骤1)中所述水解液升温至100℃灭酶，加入乙醇至乙醇体积浓度70％进行沉淀，离心，收集上清液和第一种沉淀物，将上清液冻干，得到活性肽，得率为18.3％；3)按质量比为1:20的比例，向步骤1)获得的残渣中加入去离子水，置于超声-真空装置，在超声波功率600W，真空度0.02MPa，80℃的条件下，提取10min，抽滤，滤渣再重复提取二次，合并滤液，得到多糖的提取液；将所述多糖提取液在40℃和0.1MPa条件下蒸发浓缩得浓缩液，在浓缩液中加入乙醇至乙醇体积浓度70％进行沉淀，离心分离，收集第二种沉淀物，将所述第二种沉淀与所述第一种沉淀物合并为总沉淀物，用总沉淀物2质量倍的无水乙醇洗涤脱色，共5次，离心，沉淀干燥，得到多糖，得率为9.7％。实施例2一种从核桃中综合提取有效成分的方法，包括如下步骤：1)将核桃仁4℃条件下加10质量倍的水浸泡24h，磨成核桃浆，100℃灭酶5min，加入复合酶，复合酶为核桃仁质量的3％，在45℃，pH为8的条件下，反应2h，离心，得到清油、水解液及残渣三部分，收集清油，得到脂肪酸，得率为52.3％；复合酶由质量比为1:1:1的果胶酶、纤维素酶和复合植物水解蛋白酶组成；2)将步骤1)中所述水解液升温至90℃灭酶，加入乙醇至乙醇体积浓度75％进行沉淀，离心，收集上清液和第一种沉淀物，将上清液冻干，得到活性肽，得率为17.6％；3)按质量比为1:30的比例，向步骤1)获得的残渣中加入去离子水，置于超声-真空装置，在超声波功率500W，真空度0.05MPa，70℃的条件下，提取20min，抽滤，滤渣再重复提取二次，合并滤液，得到多糖的提取液；将所述多糖提取液在50℃和0.08MPa条件下蒸发浓缩得浓缩液，在浓缩液中加入乙醇至乙醇体积浓度80％进行沉淀，离心分离，收集第二种沉淀物，将所述第二种沉淀与所述第一种沉淀物合并为总沉淀物，用总沉淀物2质量倍的无水乙醇洗涤脱色，共5次，离心，沉淀干燥，得到多糖，得率为9.3％。实施例3一种从核桃中综合提取有效成分的方法，包括如下步骤：1)将核桃仁4℃条件下加10质量倍的水浸泡24h，磨成核桃浆，100℃灭酶5min，加入复合酶，复合酶为核桃仁质量的5％，在30℃，pH为7的条件下，反应3h，离心，得到清油、水解液及残渣三部分，收集清油，得到脂肪酸，得率为47.5％；复合酶由质量比为1:1:1:1:1的果胶酶、纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和复合植物水解蛋白酶组成；2)将步骤1)中所述水解液升温至80℃灭酶，加入乙醇至乙醇体积浓度80％进行沉淀，离心，收集上清液和第一种沉淀物，将上清液冻干，得到活性肽，得率为19.2％；3)按质量比为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从核桃中综合提取有效成分的方法，其特征是包括如下步骤：1)将核桃仁加水磨成核桃浆，灭酶，加入复合酶，复合酶为核桃仁质量的2％～5％，在30℃～60℃，pH为7～9的条件下，反应1.5h～4h，离心，得到清油、水解液及残渣三部分，收集清油，得到脂肪酸；2)将水解液升温至80～100℃灭酶，加入乙醇至乙醇体积浓度70％以上进行沉淀，离心，收集上清液和第一种沉淀物，将上清液冻干，得到活性肽；3)按质量比为1:20～1:40的比例，向步骤1)获得的残渣中加入去离子水，在超声波功率400W～700W，真空度0.02MPa～0.08MPa，60℃～80℃的条件下，提取10min～50min，抽滤，滤渣再重复提取二次，合并滤液，得到多糖的提取液；将所述多糖提取液在40～60℃和0.06～0.1Mpa条件下蒸发浓缩得浓缩液，在浓缩液中加入乙醇至乙醇体积浓度70％以上进行沉淀，离心分离，收集第二种沉淀物，将所述第二种沉淀与所述第一种沉淀物合并为总沉淀物，用无水乙醇洗涤脱色，离心，干燥，得到多糖。

【技术特征摘要】
1.一种从核桃中综合提取有效成分的方法，其特征是包括如下步骤：1)将核桃仁加水磨成核桃浆，灭酶，加入复合酶，复合酶为核桃仁质量的2％～5％，在30℃～60℃，pH为7～9的条件下，反应1.5h～4h，离心，得到清油、水解液及残渣三部分，收集清油，得到脂肪酸；2)将水解液升温至80～100℃灭酶，加入乙醇至乙醇体积浓度70％以上进行沉淀，离心，收集上清液和第一种沉淀物，将上清液冻干，得到活性肽；3)按质量比为1:20～1:40的比例，向步骤1)获得的残渣中加入去离子水，在超声波功率400W～700W，真空度0.02MPa～0.08M...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈海霞，王秀明，李淑琴，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12