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一种提高人参皂甙含量的人参培养基及其配制方法技术

技术编号:13167374 阅读:72 留言:0更新日期:2016-05-10 12:29
本发明专利技术提供一种提高人参皂甙含量的人参培养基,属于人参组织培养技术领域,其以B5培养基为基础培养基,并添加有NAA(萘乙酸)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、硝酸镧、琼脂粉和白砂糖,本发明专利技术提供的培养基具有可提高愈伤组织人参皂甙含量,促进人参愈伤组织增殖的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于人参组织培养
,特别设及一种提高人参皂武含量的人参培养 基,还设及一种提高人参皂武含量的人参培养基的配制方法。
技术介绍
人参是被子植物口双子叶植物纲离瓣花亚纲五加科,多年生草本植物,生长于密 林,多分布于黑龙江、吉林、迂宁和河北北部深山中,含有10多种人参皂武,W及人参快醇、 多种氨基酸和维生素,是名贵的中草药材。 人参治病养生的能力主要依靠人参皂武,但是直接从人参植株中提取人参皂武的 成本非常高,且产量低,直接从人参愈伤组织中提取人参皂武不仅方便、原料易得、成本低, 还间接能起到保护野生人参植株的作用,但人参愈伤组织中人参皂武的含量对能否使用愈 伤组织代替植株提取人参皂武起着决定性的作用。
技术实现思路
基于现有技术存在上述问题,本专利技术提供一种提高人参皂武含量的人参培养基, 其WBs培养基为基础培养基,并添加有NAA(糞乙酸)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、硝酸铜、 琼脂粉和白砂糖,本专利技术提供的培养基具有可提高愈伤组织人参皂武含量,促进人参愈伤 组织增殖的优点。[000引一种提高人参皂武含量的人参培养基,其WBs培养基为基础培养基,并添加有NAA (糞乙酸)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、硝酸铜、琼脂粉和白砂糖,相对于人参组织培养常用 的MS培养基,Bs培养基更能促进人参细胞合成人参皂武,同时W硝酸铜作为添加剂,其中的 铜元素可W调节人参细胞的生理状态,促进人参皂武合成。 NAA (糞乙酸)的浓度为3-8mg/L、2,4-D (2,4-二氯苯氧乙酸)的浓度为2-6mg/L、硝 酸铜的浓度为200-500mg/L、琼脂粉的浓度为8-12g/L、白砂糖的浓度为25-35g/L。 NAA (糞乙酸)的浓度为4-6mg/L、2,4-D (2,4-二氯苯氧乙酸)的浓度为3-5mg/L、硝 酸铜的浓度为350-450mg/L、琼脂粉的浓度为9-llg/L、白砂糖的浓度为28-32g/L,将两种植 物激素NAA(糞乙酸)和2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的用量提高,可W更好促进人参愈伤组织 增殖和合成人参皂武。 所述的硝酸铜还可W是氯化铜和氧化铜,硝酸铜中W主要作用的是稀±元素铜, 所W可W使用其他含铜元素的化合物替代硝酸铜。 所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.0-7.0。 所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.5。 -种提高人参皂武含量的人参培养基的配制方法,其包括W下步骤: 步骤SlO溶解配制培养基:用蒸馈水溶解Bs基础培养基各成分,并添加NAA(糞乙酸)、2, 4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、硝酸铜、琼脂粉和白砂糖; 步骤S20高溫灭菌:将步骤SlO配制好的培养基放于高压灭菌锅中,于120~121°C高溫灭 菌20~21分钟,冷却凝固。[001引所述的步骤SlO还包括步骤Sll调节pH值:使用肥L和KOH滴定调节培养基pH值至 6.0。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术作进一步描述。 实施例一:配制一种提高人参皂武含量的人参培养基。 根据表1所示的Bs培养基配方W及表2所示的提高人参皂武含量的人参培养基配 方,制备本专利技术所述的提高人参皂武含量的人参培养基。用天平分别称取Bs培养基中的各成分W及NAA(糞乙酸)、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙 酸)、硝酸铜、琼脂粉和白砂糖,置于立角瓶中,加入适量纯化水,揽拌溶解,定容至1000 mL, 并使用肥L或者KOH调节抑值至6.5。将S角瓶封口,置于高压灭菌锅中,于121°C灭菌21min, 然后于超净工作台中,将提高人参皂武含量的人参培养基分装至组织培养瓶中,自然冷却, 待其凝固后将组织培养瓶封口,备用。表1 Bs培养基的成分及其用量。 表2提高人参皂武含量的人参培养基的成分及其用量。 实施例二:本专利技术所述的提高人参皂武含量的人参培养基的测试。根据表1所示的Bs培养基配方W及表3所示的提高人参皂武含量的人参培养基配 方,参照实施例一所述的培养基制备方法,分别制备各试验组、对照组的提高人参皂武含量 的人参培养基。表3提高人参皂武含量的人参培养基的成分及其用量。 从诱导培养基中选择没有污染、生长正常、没有褐化和玻璃化的人参愈伤组织,在 超净台中取出愈伤组织,用无菌手术刀将愈伤组织切成1立方米左右大小的愈伤组织块,接 种到上述制备好的各试验组、对照组的提高人参皂武含量的人参培养基中,每块外植体相 互间隔1.2厘米。 接种结束后将人参愈伤组织块置于人工气候箱中进行培养,培养条件如下:光照 时间为14/10小时(光照/黑暗),光照强度为23001UX,培养溫度为23°C,培养25天后统计增 殖系数和人生皂武含量,统计结果如表4所示。 表4提高人参皂武含量的人参培养基测试结果。 由表4的试验结果可知,采用本专利技术所述的提高人参皂武含量的人参培养基,能 够显著提高人参组织的人参皂武含量。试验组5为采用本专利技术所述的提高人参皂武含量的 人参培养基的试验组,所测得的人参组织人参皂武含量高达29%,明显高于对照组4。另外从 对照组3与其他试验组对比中可W看出稀±元素铜对人参组织培养只起到一个调节改变人 参细胞生理状态的作用,本身不具有促进人参增殖的作用。【主权项】1. 一种提高人参皂甙含量的人参培养基,其特征在于,其以B5培养基为基础培养基,并 添加有NAA(萘乙酸)、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸)、硝酸镧、琼脂粉和白砂糖。2. 根据权利要求1所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基,其特征在于,NAA(萘乙 酸)的浓度为3-8mg/L、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的浓度为2-6mg/L、硝酸镧的浓度为200-500mg/L、琼脂粉的浓度为8-12g/L、白砂糖的浓度为25-35g/L。3. 根据权利要求2所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基,其特征在于,NAA(萘乙 酸)的浓度为4-611^/1、2,4-0(2,4-二氯苯氧乙酸)的浓度为3-511^/1、硝酸镧的浓度为350-450mg/L、琼脂粉的浓度为9-1lg/L、白砂糖的浓度为28-32g/L。4. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基,其特征在 于,所述的硝酸镧还可以是氯化镧和氧化镧。5. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基,其特征在 于,所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.0-7.0。6. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基,其特征在 于,所述的快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为6.5。7. -种提高人参皂甙含量的人参培养基的配制方法,其特征在于,其包括以下步骤: 步骤S10溶解配制培养基:用蒸馏水溶解B5基础培养基各成分,并添加NAA(萘乙酸)、2, 4-D( 2,4-二氯苯氧乙酸)、硝酸镧、琼脂粉和白砂糖; 步骤S20高温灭菌:将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中,于120~121°C高温灭 菌20~21分钟,冷却凝固。8. 根据权利要求7所述的一种提高人参皂甙含量的人参培养基的配制方法,其特征在 于,所述的步骤S10还包括步骤SI1调节pH值:使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.0。【专利摘要】本专利技术提供本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高人参皂甙含量的人参培养基,其特征在于,其以B5培养基为基础培养基,并添加有NAA(萘乙酸)、2,4‑D(2,4‑二氯苯氧乙酸)、硝酸镧、琼脂粉和白砂糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:何志铿
申请(专利权)人:黄庆梅
类型:发明
国别省市:广东;44

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