一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法与质量检测方法，涉及天然药物化学成分分离纯化技术。以杜仲叶为原料，粉碎后超声提取得上清液；后依次用水和乙醇洗脱除杂。采用HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量。本发明专利技术工艺简单，能耗低，得到提取物中总黄酮含量高，具有较好的经济效益和社会效益。检测相对方便，质量易控制。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及天然药物化学成分分离纯化技术，具体属于杜仲叶中总黄酮的制备工艺及其质量检测方法。
技术介绍
杜仲的别名丝棉树、丝棉皮、玉丝皮。在植物分类学上属杜仲科杜仲属，其皮叶同为中药品种，收载于中国药典2010年版一部，具有补肝肾、强筋骨的作用。由于杜仲皮一般需生长多年，方可采收，周期长，资源相对紧缺。而杜仲叶的资源相对丰富、易得，近代研究证实了杜仲叶与杜仲皮有相同的有效成分和药理作用。杜仲叶中含有多种黄酮类物质，国内有关制药企业常把杜仲叶制备成杜仲浸膏，因此，需要有一种能有效检测杜仲浸膏质量的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上面所述缺陷，提供一种工艺简单、能耗低且提取物中总黄酮含量高的杜仲叶总黄酮提取物的制备方法。本专利技术的另一目的是提供一种杜仲叶总黄酮提取物的质量检测方法。本专利技术的目的是通过以下技术方案予以实现的。—种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于:以杜仲叶为原料，粉碎成粗粉，用8~20倍40%~95%的乙醇超声提取，提取1~3次，每次30min~60min ;收集提取液，减压回收乙醇，得浓缩液；离心，得上清液；选用HPD-100、HPD-400、HPD600或D101大孔树脂，上样，上样吸附0.5-2.0小时，依次用1~3倍水洗脱除杂，流速为每小时1~3倍水；再以2~4倍30%~95%的乙醇洗脱，洗脱速率为每小时1~4倍；收集所得洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得杜仲总黄酮提取物。—种杜仲叶总黄酮提取物的质量检测方法，其特征在于，采用HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量: a.色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以20~50:80~50的甲醇-0.1-1%乙酸水溶液为流动相；检测波长为256nm ;流速:0.8ml/min~l.0ml/min ;柱温:25°C -35°C ;理论塔板数均不低于2000 ; b.对照品溶液的制备:取在120°C干燥至恒重的芦丁对照品和槲皮素对照品适量，精密称定，置于量瓶中，用流动相超声处理，使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，制成芦丁和槲皮素的混合对照溶液，摇匀，即得； c.供试品溶液制备:取上述制备得到的杜仲总黄酮提取物适量，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相超声溶解；d.测定:分别精密吸取对照品和供试品溶液5~15ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。本专利技术具有以下优点:从资源丰富的杜仲叶中提取黄酮类物质，在整个制备过程中，工艺简单，能耗低，所用溶剂为乙醇和水，可回收利用，无污染，具有较好的环境效益；得到提取物中总黄酮含量高，具有较好的经济效益和社会效益。检测相对方便，质量易控制。【具体实施方式】: 实施例1。将杜仲叶粉碎成粗粉，置于超声提取罐中用10倍量的50%乙醇超声提取，提取1次，每次提取30min ;合并浓缩液，5000r/min离心lOmin，得上清液；上清液通过HPD600，吸附0.5小时，用1倍水，流速为每小时1倍水洗脱除杂；再以2倍50%的乙醇洗脱，洗脱速率为每小时一倍体积，收集洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得杜仲叶总黄酮提取物。HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量: a.色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以20:80的甲醇-0.1%乙酸水溶液为流动相；检测波长为256nm ;流速:0.8ml/min ;柱温:25°C ； b.对照品溶液的制备:取在120°C干燥至恒重的芦丁对照品20.5mg和槲皮素0.54mg，精密称定，置于100ml量瓶中，用流动相超声处理，使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，制成1ml含0.205mg芦丁和5.4ug槲皮素的溶液，摇匀，即得； c.供试品溶液制备:取上述制备得到的杜仲总黄酮提取物0.5241g，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相超声溶解； d.测定:分别精密吸取对照品和供试品溶液5ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。测得杜仲提取物含槲皮素0.18mg/g和2.54mg/g芦丁。实施例2。将杜仲叶粉碎成粗粉，置于超声提取罐中用10倍量的80%乙醇超声提取，提取2次，每次提取60min ;合并浓缩液，5000r/min离心lOmin，得上清液；上清液通过D101大孔树脂，吸附1小时，用2倍水，流速为每小时2倍水洗脱除杂；再以3倍80%的乙醇洗脱，洗脱速率为每小时2倍体积，收集洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得杜仲叶总黄酮提取物。HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量: a.色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以30:70的甲醇-1%乙酸水溶液为流动相；检测波长为256nm ;流速:lml/min ;柱温:30°C ； b.对照品溶液的制备:取在120°C干燥至恒重的芦丁对照品22mg和槲皮素0.48mg，精密称定，置于100ml量瓶中，用流动相超声处理，使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，制成lml含0.22mg芦丁和4.8ug槲皮素的溶液，摇匀，即得； c.供试品溶液制备:取上述制备得到的杜仲总黄酮提取物0.5847g，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相超声溶解； d.测定:分别精密吸取对照品和供试品溶液lOul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。测得杜仲提取物含槲皮素0.21mg/g和芦丁 2.69mg/g。【主权项】1.一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于:以杜仲叶为原料，粉碎成粗粉，用8~20倍40%~95%的乙醇超声提取，每次30min~60min ;收集提取液，减压回收乙醇，得浓缩液；离心，得上清液；用大孔树脂上样吸附0.5-2.0小时，依次用1~3倍水洗脱除杂，流速为每小时1~3倍水；再以2~4倍30%~95%的乙醇洗脱，洗脱速率为每小时1~4倍；收集所得洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得杜仲总黄酮提取物。2.根据权利要求1所述的一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于:所述超声提取次数为1~3次。3.根据权利要求1所述的一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂选用 HPD-100、HPD-400、HPD600 或 D101 中的一种。4.一种杜仲叶总黄酮提取物的质量检测方法，其特征在于，采用HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量: a.色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以20~50:80~50的甲醇-0.1-1%乙酸水溶液为流动相；检测波长为256nm ;流速:0.8ml/min~l.0ml/min ;柱温:25°C -35°C ;理论塔板数均不低于2000 ; b.对照品溶液的制备:取在120°C干燥至恒重的芦丁对照品和槲皮素对照品适量，精密称定，置于量瓶中，用流动相超声处理，使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，制成芦丁和槲皮素的混合对照溶液，摇匀，即得； c.供试品溶液制备:取上述制备得到的杜仲总黄酮提取物适量，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相超声溶解； d.测定:分别精密吸取对照品和供试品溶液5~15ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。【专利摘要】，涉及天然药物化学成分分离纯化技术。以杜仲叶为原料，粉碎后超声提取得上清液；后依次用水和乙醇洗脱除杂。采用HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量。本专利技术工艺简单，能耗低，得到提取物中总黄酮含量高，具有较好的经济效益和社会效益。检测相对方便，质量易控制。【IP本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：以杜仲叶为原料，粉碎成粗粉，用8~20倍40%~95%的乙醇超声提取，每次30min~60min；收集提取液，减压回收乙醇，得浓缩液；离心，得上清液；用大孔树脂上样吸附0.5~2.0小时，依次用1~3倍水洗脱除杂，流速为每小时1~3倍水；再以2~4倍30%~95%的乙醇洗脱，洗脱速率为每小时1~4倍；收集所得洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得杜仲总黄酮提取物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周朝忠，肖军平，吴永忠，陈梁，杜剑松，
申请(专利权)人：普正药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。