具有粉红色果实的番茄植物制造技术

本发明专利技术涉及番茄种的栽培植物，其包含具有一个或多个突变的myb12等位基因，所述突变导致产生突变myb12蛋白，所述植物的果实显示出粉红色外观。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术设及植物生物技术和植物育种的领域。本专利技术提供了的栽培番茄（Solanum lycopersicum)植物，其包含具有一个或多个突变的mybl2等位基因，所述突变导致产生突 变mybl2蛋白，其中所述突变mybl2蛋白在SEQIDN0:1或其变体中具有G50R氨基酸置换， 所述变体与SEQIDN0:1具有至少85%的氨基酸序列同一性；或者，其中所述突变mybl2蛋 白在SEQIDNO: 1或其变体中包含氨基酸61至338的缺失，所述变体与SEQIDNO: 1具有 至少85%的氨基酸序列同一性。本专利技术还提供了包含编码本专利技术的突变mybl2蛋白的内源 基因的番茄植物，其果实在果实发育的澄色后期和红熟期显示出无色的表皮并具有粉红色 的外观。此外，本专利技术提供了本专利技术的番茄植物的番茄果实、种子、花粉、植物部分和后代。 本专利技术还提供了运样的番茄种子：本专利技术的植物可从其中生长，和/或本专利技术的突变mybl2 基因可从其中可获得并可通过常规育种被引入任何其他番茄植物中，W生成其他产生粉红 色果实的番茄植物。本专利技术还提供了包含本专利技术的植物果实或由其组成的食品和食品产 品。本文还包括将本专利技术的植物、种子、植物组织和细胞和/或由运些制成的食品和/或饲 料产品与任何其他番茄植物、种子、组织、细胞、食品或饲料区分开的方法，由此检测了突变 mybl2基因、mRNA(cDNA)和/或蛋白质的存在。 阳00引本专利技术还提供了内源性突变mybl2基因、mRNA(cDNA)和/或由所述基因编码的mybl2蛋白，具有至少一个人工诱导的非转基因突变；化及产生本专利技术的植物的方法。
技术介绍
番茄果实的表皮颜色是由Y基因决定。基因Y产生遍布果实表皮 细胞壁的独特的黄色素，而其等位基因，y，在表皮壁中产生透明状或无色状 (E.W.Lindstrom, 1925,InheritanceinTomatoes,Genetics,issue10 (4)pp305 - 317)。 W04] 粉红色番茄果实在亚洲非常流行用于食用。首次记载的粉红色果实 是在带有缺乏黄色素的透明表皮的果实中化inds化om, 1925,Inheritancein Tomatoes,Genetics,issue10 (4)pp305 - 317)。遗传研究表明粉红色果实是由1号染 色体上存在的单基因的隐性y(黄色）基因座造成，而红色的果实具有显性的Y等位基因 (Xindstrom1925)。所述Y基因已被鉴定为MYB12度allesteretal，见下文）。 阳〇化]番茄果实的颜色主要取决于类胡萝h素和类黄酬。成熟番茄果实的红色主要是由 于在果实成熟过程中产生的类胡萝l·素全反式-番茄红素的累积。除了番茄红素，番茄果 实包含显著水平的紫黄素（violaxanthin)和叶黄素（lutein)。在类胡萝h素途径中具有 突变的番茄植物具有改变的类胡萝l·素组成，其导致不同的果实颜色，例如澄色（橘子0) 或黄色（r)果实（Xewinsohnetal. 2005TrendsFoodSciTechnol. ,Vol16pp407_415)。 此外，类黄酬在决定番茄果实的颜色中起作用。类黄酬主要在果皮中积累，因为 果肉中的类黄酬途径不活跃。番茄果皮中最丰富的类黄酬之一是黄色的抽配基查尔酬 (naringeninchalcone)。此外，已经在番茄果实中鉴定出最多达70种不同的类黄酬。Ballester等人进行了来源于番茄"Moneyberg"和野生种克梅留斯基番茄 (Solanumchmielewskii)之间的杂交的渐渗系（IL)群体的表型分析，其显示出Ξ个具有 粉红色果实颜色的IL。运些IL在1号染色体的短臂上具有纯合型克梅留斯基番茄基因 渗入，与已知导致无色表皮的y(黄色）突变的位点一致，并因此在与红色果肉结合时为粉 红色的果实。该同一研究表明，粉红色果实在果皮中缺少黄色类黄酬抽配基查尔酬的成熟 依赖性的累积一一该物质在Moneyberg果实的表皮中随成熟而增加，而类胡萝h素水平不 受影响度allesteretal. 2010PlantPhysiology,vol15化P71-84)。在同一研究中， Ballesteretal.度allesteretal.2010PlantPhysiology,vol15化P77,右栏）公开 了 "推断的获自商业来源的粉红色MYB12等位基因的氨基酸序列与红色Moneyberg等位 基因相同"，表明了"在所有测试的粉红色表型中观察到的失调的 MYB12基因表达，而非异常的MYB12功能，是粉红色表型的主要原因"。使用基因沉 默研究遗传作图、分离分析和VIGS(病毒诱导的基因沉默）结果确认了粉红色的运一原因。 [000引因此，到目前为止，现有的商业非-GM0无色皮（即粉红色）y突变体的分析显示在 mybl2等位基因和其启动子序列中都没有突变，运表明y突变体表型是由于调苄基因，即额 外的突变等位基因中的突变（Adatoetal2009PL0SGeneticsvol5issue12el000777)。 尽管如此，目前为止还没有发现番茄果实的替代的非-GMO粉红色突变体。因此，需要产生粉红色番茄果实的替代的、非-GM0的、栽培的番茄植物。
技术实现思路
本专利技术人惊奇地发现，具有异常的MYB12蛋白质功能，而非失调的MYB12基因表达 的番茄种的栽培植物产生粉红色外观的番茄果实。考虑到Ballester et al. 2010和Adato et al. (2009)(在上文），运是非常令人惊奇的。 因此，本专利技术设及番茄种的栽培植物，其包含具有一个或多个突变的mybl2等位 基因，所述突变导致产生突变mybl2蛋白，其中所述突变mybl2蛋白在SEQIDN0:1或其变 体中具有G50R氨基酸置换，所述变体与SEQIDNO: 1具有至少约85%的氨基酸序列同一 性； 或者，其中所述突变mybl2蛋白在SEQIDNO: 1或其变体中包含氨基酸61至338 的缺失，所述变体与SEQIDNO: 1具有至少约85%的氨基酸序列同一性。 在一个实施方案中，本专利技术设及本专利技术的栽培的番茄植物，其中基因组mybl2基 因中的所述突变导致所述植物的果实在果实发育的澄色期后期和红熟期显示出粉红色外 观。一般忡定女 术语"核酸序列"（或核酸分子）是指单链或双链形式的DNA或RNA分子，尤其是 编码本专利技术的蛋白质或蛋白质片段的DNA。"分离的核酸序列"是指运样的核酸序列，即其 不再处于分离出其的天然环境中，例如，在细菌宿主细胞中或者在植物细胞核或质体基因 组中的核酸序列。 术语"蛋白质"或"多肤"可互换使用并且指的是由氨基酸链组成的分子，不管具体 的作用模式、大小、Ξ维结构或来源。因此，Mybl2蛋白的"片段"或"部分"仍可被称为"蛋 白质"。"分离的蛋白质"用于指不再处于其天然环境中的蛋白质，例如在体外或者在重组的 细菌或植物宿主细胞中。[001引术语"基因"意指DM序列，其包含与适合的调节区（例如启动子）可操作地连接 的区域（转录区），所述区域（转录区）在细胞中被转录为RNA分子（例如mRNA、hpRNA或 RNAi分子）。因此，基因可W包含若干个可操作地本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种番茄(Solanum lycopersicum)种的栽培植物，其包含具有一个或多个突变的myb12等位基因，所述突变导致产生突变myb12蛋白，其中所述突变myb12蛋白在SEQ ID NO:1或其变体中具有G50R氨基酸置换，所述变体与SEQ ID NO:1具有至少85％的氨基酸序列同一性；或者，其中所述突变myb12蛋白在SEQ ID NO:1或其变体中包含氨基酸61至338的缺失，所述变体与SEQ ID NO:1具有至少85％的氨基酸序列同一性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：H·W·维里森，
申请(专利权)人：纽海姆有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL