本发明专利技术属医药领域，涉及一种生脉提取物、及其制备方法和应用。研究表明约90%胰腺、50%结肠癌、30%-40%肺腺癌及5%-40%的白血病是由ras基因过表达造成的，ras基因已成为公认的筛选抗相关恶性肿瘤药物的靶标。本发明专利技术公开了一种生脉提取物的制备工艺，与单纯的水煎处理相比，该工艺制备得到的生脉提取物的毒性低，抑制ras基因通路过度激活的效果更好。另外，本发明专利技术提供了生脉提取物的新用途，可在抑制ras原癌基因过表达中应用和在制备由ras原癌基因过表达导致的肿瘤药物中应用，有望开发成新一代的抗肿瘤药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生脉提取物及其制备方法，具体涉及生脉提取物在制备抑制ras 原癌基因过表达的抗肿瘤药物中的应用和在抑制ras原癌基因过表达中的应用，属于医药 领域。
技术介绍
生脉散是中医千古名方，首载于金代医家张元素所著《医学启源·卷下》"麦门冬" 条内；内外伤辨惑论及医方考中也有记载。由人参、麦冬、五味子组成，意在取"人参之甘补 气，麦门（即麦冬）苦寒泻热补水之源，五味子之酸清肃燥金"。 生脉散最早用于治疗暑热汗多，气阴两伤之证，表现为汗多、身疲、体倦、气短、咽 干、脉虚等症状。古代医家也用于金叶耗伤，脉微欲绝等症状，又用作气阴两虚病人的补益 剂。此方经过几百年的长期使用，安全有效，经久不衰。随着现代医学的发展，生脉散的临 床应用不断扩大，其剂型除散剂外，还有生脉饮、生脉注射液；该方剂经加减变化后还发展 了参麦饮和生脉散党参方等。现在主要用于治疗心血管病中的抗休克、抗心衰、抗心肌缺血 等症状、糖尿病、慢性支气管炎，各类心源性休克、冠心病、心律失常等。 汤铭新等发现生脉散可显著抑制肺癌的自发转移，但是实验证明这种抗肿瘤作用 并非生脉散直接作用于癌细胞，而是通过提高机体免疫功能间接实现抗肿瘤。中国专利 201010148044. 0公开了一种具有抗肿瘤作用的组合物及其在制备治疗肿瘤药物中的应用， 该专利将生脉散与其他中药复方添加到以含主药蟾酥的抗肿瘤药物组合物中，生脉散减少 了蟾酥所带来的心脏毒性问题；中国专利200510053562. 9公开了生脉注射液在制备治疗 肿瘤减毒药物中的用途，在对荷瘤小鼠化疗过程中，同时应用生脉散可保护肝肾功能。中国 专利03142266. 7公开了生脉注射液在制备治疗肿瘤增效药物中的用途。该专利中应用生 脉散注射液处理结肠癌、乳腺癌、肝癌和胰腺癌细胞株，证明生脉注射液单独应用时的抗肿 瘤作用效果时有时无，生脉散仅具较稳定的协同增效作用。 约30%的人类肿瘤是由于ras原癌基因突变后激活导致RAS蛋白表达水平增高造 成的。若RAS蛋白持续处于活化状态，可与下游的效应蛋白结合，将信号传递到下游信号元 件，引起细胞的异常增殖，导致肿瘤的发生。因此，ras原癌基因已成为公认的筛选抗相关 恶性肿瘤药物的靶标。 生脉散仅用水煎的方法可以显著抑制评估抑制ras原癌基因通路过度激活药物 的模型秀丽隐杆线虫ras通路的过度激活，但是同时具有显著毒性，能导致模式生物秀丽 隐杆线虫死亡。本专利技术提供了一种生脉提取物的制备工艺，与单纯的水煎处理相比，在保证 能够显著抑制秀丽隐杆线虫ras通路过度激活的同时，可以显著降低毒性，对秀丽隐杆线 虫的致死率低，效果更好。另外，本专利技术提供了生脉提取物的新用途，可在抑制ras原癌基 因过表达中应用和在制备由ras原癌基因过表达导致的肿瘤药物中应用，有望开发成新一 代的抗肿瘤药物。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种生脉提取物及其制备工艺，以期提供一种毒性小，廉价 的药物，本专利技术的另一目的是提供一种生脉提取物的新用途，具体涉及生脉提取物在制备 抑制ras原癌基因过表达的抗肿瘤药物中的应用和在抑制ras原癌基因过表达中的应用。 本专利技术通过下述技术方案予以实施。 本专利技术所述的一种生脉提取物，其中生脉提取物是由下列方法制备的：取人参、麦 冬和五味子，加水，浸泡，加热回流，过滤，减压浓缩，得总浸膏；将总浸膏用蒸馏水完全溶 解，上大孔树脂柱，吸附24h，之后用洗脱液洗脱，洗脱液浓缩至稠膏，干燥，即得。 本专利技术所述的一种生脉提取物，以人参、麦冬、五味子为原料制成，所述原料药的 质量比为9 :9 :6。 本专利技术所述的一种生脉提取物，在制备时所述的大孔树脂为D101型大孔树脂。 本专利技术所述的一种生脉提取物，所述的生脉提取物总浸膏分离纯化洗脱时的洗脱 量为5倍柱体积。 本专利技术所述的一种生脉提取物，其特征在于，所述生脉提取物总浸膏在洗脱时的 洗脱液为乙醇溶液。 本专利技术所述的一种生脉提取物，其特征在于，所述洗脱时所用的乙醇溶液是无水 乙醇。此时，在保证生脉提取物使秀丽隐杆线虫MT2124的野生型比例显著增加的同时，且 有效成分几乎不显示毒性。 本专利技术为一种生脉提取物在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的肿瘤是由ras原癌 基因突变后过表达导致的。 本专利技术为一种生脉提取物在抑制ras原癌基因过表达中的应用。 本专利技术所述的生脉提取物在制备治疗抗肿瘤药物中的应用，可以将生脉提取物添 加药学上可接受的载体如填充剂、润滑剂、湿润剂、促进吸收剂、吸附载体、稀释剂、赋形剂 等，必要时可加入甜味剂、香味剂等，制备成注射剂、散剂、颗粒剂、粉剂、丸剂、口服液、片剂 等药物的多种剂型，这是本领域技术人员可以理解的。 本专利技术提供一种生脉提取物的制备工艺以及在制备抑制ras原癌基因过表达的 抗肿瘤药物的新用途。本专利技术公开的生脉提取物的应用具有以下的优势： (1)利用本专利技术中的制备工艺制备的生脉提取物效果好，能显著降低毒性，使评 估抑制ras原癌基因通路过度激活药物的模型秀丽隐杆线虫的死亡率降低，野生型比例升 商。 (2)生脉提取物可以显著抑制ras原癌基因过表达，可在制备治疗由ras原癌基因 过表达导致的肿瘤药物中应用。 (3)生脉提取物中人参、麦冬和五味子之间的组方配比可以根据中药组方原则合 理改动，其仍然可以显著下调ras原癌基因过度激活，具有抗肿瘤活性。 (4)生脉提取物仅仅作用于过表达的突变体RAS蛋白，而对野生型RAS蛋白无影 响。提示生脉提取物在应用上安全，它仅作用于癌细胞，而不会作用于正常细胞。今后，我 们有望将生脉提取物应用在抗相关恶性肿瘤药物的制备中，其中，所述肿瘤是由ras原癌 基因的过表达导致的，从而为此类肿瘤患者提供更好的治疗，为一些疑难癌症的治疗提供 新的途径。 (5)生脉提取物显著下调ras原癌基因过表达，并不是致突变引起的，不致畸。 (6)由于ras信号通路从线虫到人高度保守，在秀丽隐杆线虫中let-60基因编码 保守的RAS蛋白，它与人类的RAS蛋白相比具有83%的同源性。如果ras突变，在秀丽隐 杆线虫中会引起线虫产生多阴门，在人类中则是引起细胞的恶性增殖，导致肿瘤的发生。因 此，模式生物秀丽隐杆线虫（Caenorhabditiselegans)Ras/MAPK信号通路过度激活型突变 体被作为受试群体广泛应用于筛选抑制ras原癌基因通路过度激活的抗肿瘤药物。因此， 本专利技术采用了秀丽隐杆线虫突变株作为评估抑制ras原癌基因通路过度激活药物的模型， 并得出了生脉提取物对ras原癌基因过表达有明显下调作用、具有抑制ras原癌基因通路 过度激活的结论。【具体实施方式】 以下提供具体实施例来说明本专利技术，但不限于这些实施例。 实施例一生脉复方的制备 材料：人参、麦冬、五味子购自兰州黄河市场。 (1)生脉水煎剂的制备 称取人参18g、麦冬18g、五味子12g;水煎，得总浸膏29g，溶于水，定容至100ml， 最后将所得样品配制成2. 5mg/ml溶液备用，使用时可按倍数稀释。 (2)生脉提取物的制备 称取人参18g、麦冬18g、五味子12g;水煎，得总浸膏29g，溶于水，定容至100ml; 用D101大孔树脂装填色谱柱，预处理，备用。取上述浸膏液20ml，上D10本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种生脉提取物，其特征在于生脉提取物是由下列方法制备的：取人参、麦冬和五味子，加水，浸泡，加热回流，过滤，减压浓缩，得总浸膏；将总浸膏用蒸馏水完全溶解，上大孔树脂柱，吸附24h，之后用洗脱液洗脱，洗脱液浓缩至稠膏，干燥，即得。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李红玉，李孟惠，支德娟，李洋，李莹辉，陈晓雨，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：甘肃;62
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。