The present invention provides a method for making transgenic mice that integrate human proto oncogene c - Ha RAS DNA in the genome. The 4 coding exons, introns and regulatory sequences of DNA containing human C - Ha - ras gene were transferred. The regulatory sequence is preferentially selected from the promoter region of the C Ha ras gene itself and to the polyA tail signal sequence. The transgenic mice, making use of the method of offspring, embryos, organs and / or derived cells can be used for preclinical safety evaluation of cancer screening, canceration mechanism research, drug carcinogens or tumor suppressor of.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及制作癌症转基因动物模型的方法；该动物模型在多种癌 症的癌变机理研究、致癌物或抑癌物的筛选研究、药物的临床前安全 性评价研究中的用途；以及由该模型动物衍生出来的细胞、组织、器 官及胚胎及其在上述领域中的用途。
技术介绍
自80年代初首例转基因小鼠诞生以来，已经建立和发展了较多的 基因导入方法，包括显微注射、反转录病毒介导的基因转移、胚胎干 细胞技术、核移植技术、基因敲除(敲入)技术与RNA干涉，以及精子 载体等，并由此也产生了众多专利(美国专利US6576811B1，2003)。其中，因为其稳定性和成功率较高，显微注射方法成为转基因的最 为常用的方法之一。它是将含有重组DNA的溶液直接注射进入胚胎 中，在多数情况下，是将DNA注射到雄性前核中。在精制用于显微注 射的DNA溶液时， 一般采用酶切、回收目的DNA片段，凝力交DNA 纯化等步骤获得纯净的DNA样品。合适的显微注射针和持定针是把 DNA成功注射入0.5天的胚胎雄性前核的关键。胚胎的质量也是转基 因成功的关键，良好的胚胎形状规则，饱满。把经显微注射的胚胎移植到假孕母鼠受体是一项技术性强但很直 ...
【技术保护点】
人原癌基因ｃ－Ｈａ－ｒａｓ，其序列如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１所示。
【技术特征摘要】
1. 人原癌基因c-Ha-ras，其序列如SEQ ID NO1所示。2. 如权利要求l所述的人原癌基因c-Ha-ras，其含有4个编码外显子、 启动子区域及多聚腺苷酸加尾信号序列polyA。3. 如权利要求2所述的人原癌基因c-Ha-ras，其中所述的启动子是啮 齿类绒毛蛋白启动子或巨细胞病毒CMV的启动子；所述的加尾序列是 SV40或BGH的polyA信号序列。4. 含有如权利要求1所述的人原癌基因c-Ha-ras的宿主细胞。5. 由如权利要求4所述的宿主细胞形成的组织，器官。6. 如权利要求4或5所述的宿主细胞、组织或器官在致癌物筛选或评 价、抑癌物的筛选、药物的安全性评价中的用途。7. 如权利要求4或5所述的宿主细胞、组织或器官在毒理学中的用途。8. 如权利要求4或5所述的宿主细胞、组织或器官在免疫毒理学中的 用途。9....
【专利技术属性】
技术研发人员：范昌发，岳秉飞，王军志，李波，左琴，胡培丽，
申请(专利权)人：中国药品生物制品检定所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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