本实用新型专利技术提供的一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，包括由高到低、按照设定高度梯度依次设置的1号瓶，2号瓶和制胶板，1号瓶与2号瓶之间、2号瓶与制胶板之间分别设置联通管，1号瓶上设置与外界相通的空气联通管，在2号瓶的底部放置磁力搅拌器，1号瓶与2号瓶的瓶口设置密封塞。本实用新型专利技术的有益效果是：整个装置结构简单、造价低廉、容易操作；该装置利用的是玻璃瓶内的自动虹吸作用，除搅拌外不需要借助外力，非常环保。
【技术实现步骤摘要】
本技术涉及一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置。
技术介绍
变性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳（DGGE)是分析核酸分子的碱基差异，有效检测基 因突变和复杂微生物群落成分的必备实验技术，是微生物学、遗传学和分子生物学研宄的 有力工具。 目前克隆测序法和DGGE法均为分析微生物群落的结构和种群多样性变异的分子 遗传学手段。这两种技术的优势均为通过核酸信息对微生物群落进行表征测定，比传统的 菌种分离培养方法更快捷，可鉴定出难培养或不能培养分离的菌种。DGGE法比克隆测序更 为快捷，由于省去了将PCR产物连接到载体并克隆扩增的步骤，因此实验周期更短，费用更 低。并且可对DGGE条带切割分离后进行DNA序列分析，或与特异性探针杂交分析鉴定微生 物种属，现有配制该凝胶的有一种梯度混合仪，而在制备过程中，常常因为聚合反应过快， 造成制备凝胶的各组成还没充分混均，凝胶便已经聚合，这样部分浓度会不均一，同时易产 生气泡；此外，商用的混合仪一般价格较高。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种结构简单、造价低廉、容易操作的变性梯度聚丙烯 酰胺凝胶配制装置。 为了达成上述目的，本技术采用如下技术方案： 一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，包括由高到低、按照设定高度梯度依次 设置的1号瓶，2号瓶和制胶板，1号瓶与2号瓶之间、2号瓶与制胶板之间分别设置联通管， 1号瓶上设置与外界相通的空气联通管，在2号瓶的底部放置磁力搅拌器，1号瓶与2号瓶 的瓶口设置密封塞。 1号瓶和所述2号瓶均为带胶塞的玻璃瓶。 磁力搅拌器带有磁力搅拌棒。 该装置的具体制作步骤是：将2个25mL带胶塞玻璃瓶与制胶板按设定梯度放置 好，在2个玻璃瓶之间、第二个玻璃瓶和制胶板之间设置联通管，第一玻璃瓶内设置与空气 相通的空气联通管，第一个玻璃瓶即1号瓶内放置低变性浓度丙烯酰胺溶液，第二个玻璃 瓶即2号瓶内放置高变性浓度丙烯酰胺溶液，在使用过程中，整个装置的工作动力来自于 玻璃瓶内液体的自动虹吸作用，且使用中要保持瓶塞与瓶口之间以及瓶塞与联通管之间的 密封性。 本技术的有益效果是： 1)整个装置结构简单、造价低廉、容易操作； 2)该装置利用的是玻璃瓶内的自动虹吸作用，除搅拌外不需要借助外力，非常环 保； 3)可随意调整凝胶内的变性剂浓度梯度以满足不同的分析目的； 4)经过计算发现凝胶内变性剂浓度梯度呈指数变化，能显著提高核酸分子的分离 效果。【附图说明】 图1是本技术的结构原理图； 其中，L空气联通管；2.1号瓶；3.联通管；4. 2号瓶；5.磁力搅拌棒；6.磁力搅拌 器；7.制胶板。【具体实施方式】 下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行 清楚、完整的描述。 如图1所示，一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，包括由高到低、按照设定高 度梯度依次设置的1号瓶2, 2号瓶4和制胶板7,1号瓶2与2号瓶4之间、2号瓶4与制 胶板7之间分别设置联通管3,1号瓶上设置与外界相通的空气联通管1，在2号瓶的底部 放置磁力搅拌器6,1号瓶与2号瓶的瓶口设置密封塞，在实际应用中，联通管的前侧要没入 1号瓶液体液面以下位置，联通管的后侧设置在2号瓶液体液面以上位置，另一联通管的前 侧要没入2号瓶液体液面以下位置。 1号瓶和所述2号瓶均为带胶塞的玻璃瓶。 磁力搅拌器带有磁力搅拌棒5,磁力搅拌棒的上端固定在磁力搅拌器上，磁力搅拌 棒为一块顺磁性铁氧体棒或者普通的铁棒，外裹一层聚四氟乙烯塑料，外形接近长椭圆形。 该装置的具体制作步骤是：将2个25mL带胶塞玻璃瓶与制胶板按设定梯度放置 好，在2个玻璃瓶之间、第二个玻璃瓶和制胶板之间设置联通管，第一玻璃瓶内设置与空气 相通的空气联通管，第一个玻璃瓶即1号瓶内放置低变性浓度丙烯酰胺溶液，第二个玻璃 瓶即2号瓶内放置高变性浓度丙烯酰胺溶液，在使用过程中，整个装置的工作动力来自于 玻璃瓶内液体的自动虹吸作用，且使用中要保持瓶塞与瓶口之间以及瓶塞与联通管之间的 密封性；再者，使用该装置时，根据事先确定的变性梯度范围，可以确定1号瓶和2号瓶内应 设置的溶液体积，具体推导过程如下： 设定1号瓶内低变性浓度丙烯酰胺溶液变性浓度为a，2号瓶内高变性浓度丙烯酰 胺溶液初始浓度为bmax，体积为V tl。由于制胶过程中2号瓶中的液体流入速度和流出速度 相等，故Vtl保持恒定。输液管的容积忽略不计。设制胶板的有效容积为V。 制胶过程可以等效为2号瓶中的高变性浓度胶液被1号瓶中的低变性浓度胶液连 续等比例稀释。为便于计算，假设共作η次稀释，所以每次稀释时2号瓶中的入液量和出液 量均为V/n， 稀释一次后2号瓶中胶液浓度： 每次的稀释比： 灌胶完成后制胶板中最上层浓度： 由于液体的流动是连续的，相当于在整个制胶过程中共对2号瓶中的胶液作无限 多次稀释，即η -c?，制胶完成时制胶板最上端的胶液变性梯度最低，其值为： 制胶板最下端的胶液变性梯度最高且等于2号瓶内胶液的初始变性浓度，因此变 性梯度 范围是 bmin- b max。 为了解本方法所配制变性胶的浓度变化规律，可假设制胶板的高度为h，与高垂直 的截面积为s，则式（4)可写为： 由式（5)可见用此装置制作的凝胶变性梯度在垂直方向上呈指数变化，随着电泳 过程的进行，条带内核酸分子迅速到达高变性浓度区域，能显著提高核酸分子的分离效果， 而商业制胶设备制作的凝胶其变性梯度为线性变化。 而商业制胶设备制作的凝胶其变性梯度为线性变化。 由式（5)可知，在已知V。，b_，a，s，h的情况下，可算得I^niin;反之，如事先确定变 性梯度的范围值，也可通过计算得出高变性浓度溶液量的体积。 以上所述，仅为本技术的具体实施方案，但本技术的保护范围并不局限 于此，任何未违背本技术的精神实质与原理下所作的变化或替换，都包含在本实用新 型的保护范围之内。因此，本技术的保护范围应以权利要求书所限定的保护范围为准。【主权项】1. 一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，其特征在于，包括由高到低、按照设定高度 梯度依次设置的1号瓶，2号瓶和制胶板，1号瓶与2号瓶之间、2号瓶与制胶板之间分别设 置联通管，1号瓶上设置与外界相通的空气联通管，在2号瓶的底部放置磁力搅拌器，1号瓶 与2号瓶的瓶口设置密封塞。2. 如权利要求1所述的一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，其特征在于，所述1号 瓶和所述2号瓶均为带胶塞的玻璃瓶。3. 如权利要求1所述的一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，其特征在于，所述磁 力搅拌器带有磁力搅拌棒。【专利摘要】本技术提供的一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，包括由高到低、按照设定高度梯度依次设置的1号瓶，2号瓶和制胶板，1号瓶与2号瓶之间、2号瓶与制胶板之间分别设置联通管，1号瓶上设置与外界相通的空气联通管，在2号瓶的底部放置磁力搅拌器，1号瓶与2号瓶的瓶口设置密封塞。本技术的有益效果是：整个装置结构简单、造价低廉、容易操作；该装置利用的是玻璃瓶内的自动虹吸作用，除搅拌外不需要借助外力，非常环保。【IPC分类】C12M1/02【公开号】CN204676067【申请号】CN201520356431【专利技术人】王希娣, 姜国胜, 刘本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种变性梯度聚丙烯酰胺凝胶配制装置，其特征在于，包括由高到低、按照设定高度梯度依次设置的1号瓶，2号瓶和制胶板，1号瓶与2号瓶之间、2号瓶与制胶板之间分别设置联通管，1号瓶上设置与外界相通的空气联通管，在2号瓶的底部放置磁力搅拌器，1号瓶与2号瓶的瓶口设置密封塞。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王希娣，姜国胜，刘振东，张华，成丽娟，刁玉涛，赵颖馨，
申请(专利权)人：山东省医学科学院基础医学研究所，
类型：新型
国别省市：山东;37
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