本发明专利技术公开一种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法及其应用，制备方法包括以下步骤：取海参粉，加入去离子水，在水浴中加热；匀浆，得到海参匀浆液；调节pH值至7.0～10.0，加入蛋白酶I，进行酶解反应2～4h后，向所述反应体系中加入蛋白酶II，继续酶解2～4h，终止反应，得到海参蛋白水解液；灭活其中的蛋白酶I和蛋白酶II；冷却后离心除杂质，保留上清液；加入95％乙醇，静置后离心取上清液，调节上清液pH值至6.0～8.0，并将所述上清液通过截流分子量为3000～10000Da的超滤膜，收集超滤液，即得。采用本发明专利技术方法制备的海参蛋白肽对糖尿病和高脂血症患者可起到良好的降糖降脂作用，食用安全性高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及水产品深加工及生物
，特别涉及一种基于海参蛋白的降糖降 脂肽制备方法及其应用。
技术介绍
随着社会进步和经济发展，人们的生活方式发生了很大的改变，糖尿病和高脂 血症等代谢性疾病的发病率逐年升高。据国际糖尿病联盟（International Diabetes Federation，IDF)统计，截止2013年，全球糖尿病人数已达到3. 82亿。预计到2035年，全 球将有5. 92亿人受到糖尿病的困扰。目前，我国已成为糖尿病患者人数最多的国家，患者 人数已接近1亿。长期高血糖会诱发机体脂肪代谢紊乱，导致血脂异常，增加心血管疾病的 患病风险。据世界卫生组织（World Health Organization，WHO)公布数据显示，2008年全 球大约有1730万人死于心血管疾病。截止2012年，我国心血管疾病患者人数为2. 9亿， 每年约有350万人死于心血管疾病。目前，治疗糖尿病的方法包括注射胰岛素和口服降糖 药物，但是这些治疗方法易引起低血糖、肝脏损伤、乳酸中毒以及胃肠道不适等不良反应。 对于高脂血症的治疗，常用的他汀类降脂药物，长期服用也会对人体产生毒副作用。因此， 积极研宄食物中的降糖降脂功能成分，开发来源于食物中的安全、天然、高效的降糖降脂肽 产品已成为今后糖尿病和高脂血症等代谢性疾病非药物治疗的重要部分。例如中国专利 201210462662. 1，吴成业等利用中性蛋白酶水解紫菜，制备具有降糖降脂和降血压活性的 海藻多肽。 海参是海洋中重要的食物和药物资源。海参体壁是海参主要食（药）用部位，含 有丰富的胶原蛋白、黏多糖以及皂苷，其中海参蛋白含量占其体壁干重80%以上。海参蛋白 富含多种生物活性序列，在适当的蛋白酶作用下可释放出来，成为具有抗氧化、免疫调节、 降血压以及降糖降脂等生物学活性的肽段。近年来，海参蛋白水解产物的活性得到了广泛 的研宄。李伟等在中国专利201310215842. 4中公开了具有免疫调节、改善睡眠和抗辐射功 能的海参果汁饮料；刘凯等在中国专利201410114474. 9中利用中性蛋白酶水解海参蛋白 制备具有促进术后伤口愈合功效的海参蛋白肽。 目前，关于酶水解海参蛋白的专利技术大多采用单酶或复合酶一步水解的酶解模 式，这种酶解模式不利于海参蛋白的水解，也不宜于海参蛋白中生物活性序列的释放。尽管 王纳在中国专利201310278840. X中利用碱性蛋白酶和固定化酶（包括中性蛋白酶和木瓜 蛋白酶）分步水解海参蛋白，但为了提高固定化酶的酶解效率，需过滤除去碱性蛋白酶初 步水解液中的不溶物，此过程会损失部分未水解的海参蛋白。此外，由于酶解过程中碱液的 使用以及海洋生物与生俱来的腥味，会使制得的海参蛋白肽具有不良气味。汪秋宽等在中 国专利201210053085. 0中利用阴离子树脂对海参蛋白肽进行脱腥，此法操作繁琐且耗时、 效率低，不利于工业化生产；吴庆林在中国专利201110449621. 4中利用活性炭对海参蛋白 肽进行去味处理，这种处理方法会损失蛋白多肽中的功能成分而降低其生物学活性。而采 用微囊化技术既可以掩盖海参蛋白肽的不良气味，又不会损失多肽中的功能成分。 采用双酶分步水解模式提高海参蛋白的水解度，制备具有降糖降脂活性的海参蛋 白肽以及利用微囊化技术提升其品质的研宄尚未发现。因此，开发一种可控制的酶法制备 高活性、风味优良的海参蛋白降糖降脂肽的方法具有重要的理论意义和应用价值。
技术实现思路
针对上述现有技术的不足，本专利技术提供一种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法 及其应用，采用该方法制备的降糖降脂肽活性高、风味优良。 本专利技术的技术方案是这样的实现的： 一种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法，包括以下步骤： 1)取新鲜海参洗净、去除内脏，冷冻干燥后粉碎，得海参粉；取海参粉，按1:20~ 1:30重量比例加入去离子水，然后在75~95°C水浴中加热15~30min。在匀浆功率1500~ 3500r/min条件下，勾衆5~lOmin，得到海参勾衆液； 2)调节步骤1)所述海参匀浆液的pH值至7.0~10. 0,加入蛋白酶I，使海参蛋白 和蛋白酶I在40~60°C条件下进行酶解反应；所述蛋白酶I为碱性蛋白酶或胰蛋白酶； 3)步骤2)酶解反应进行在2~4h后，保持所述酶解反应的反应体系温度不变，向 所述反应体系中加入蛋白酶II，继续酶解2~4h，终止反应，得到海参蛋白水解液； 4)将步骤3)所得的海参蛋白水解液升温至75~95°C，保持15~30min，灭活其 中的蛋白酶I和蛋白酶II ;冷却后离心除杂质，保留上清液；所述蛋白酶II为复合风味蛋 白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶中的任意一种； 5)向步骤4)所得上清液中加入95%乙醇，使其终体积达到总体系的60~80%， 4°C静置10~15h后离心取上清液，调节所述上清液pH值至6. 0~8. 0,并将所述上清液通 过截流分子量为3000~1000 ODa的超滤膜，收集超滤液，得到海参蛋白降糖降脂肽。 -种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法，还包括以下微囊化技术处理的步骤： 6)将微囊化壁材溶于水中，制成壁材溶液； 7)将步骤6)所得的壁材溶液按一定比例加入到步骤5)得到的海参蛋白降糖降脂 肽中，室温下搅拌〇. 5~2h，得到混合溶液； 8)对步骤7)所得的混合溶液进行喷雾干燥，得到微囊化蛋白多肽。 所述步骤2)中蛋白酶I的加入量为每100g海参粉加入200~800KU蛋白酶I。 其中，IU定义为40°C下每分钟水解酪蛋白产生1 μ g酪氨酸的量，KU为1000U。 所述步骤3)中蛋白酶II的加入量为每100g海参粉加入200~800KU蛋白酶II。 其中，IU定义为40°C下每分钟水解酪蛋白产生1 μ g酪氨酸的量，KU为1000U。 所述步骤2)中调节pH值所用的碱液为食品级碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢二钠、碳 酸钾、碳酸氢钾、磷酸氢二钾或氢氧化钾溶液中的任意一种；调节pH值所用的酸液为食品 级乳酸或柠檬酸溶液中的任意一种。 所述步骤7)中的壁材为蛋白质含量多80%的浓缩乳清蛋白。 所述步骤7)中的壁材为海藻酸钠和蛋白质含量多80%的浓缩乳清蛋白的混合 物，浓缩乳清蛋白与海藻酸钠混合重量比为1:10~1:35。 所述步骤7)中海参蛋白降糖降脂肽与壁材的质量比为1:1~1:5。 所述壁材溶液中壁材的质量浓度可根据蛋白多肽溶液中多肽的质量，以及混合溶 液的干物质含量来确定。 -种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法制得的海参蛋白的降糖降脂肽在食源 性降糖降脂保健食品中的应用。 本专利技术的有益效果： 1.本专利技术采用双酶分步水解的酶解模式，可有效提高海参蛋白的水解度，工艺简 单易行，便于工业化生产； 2.本专利技术中采用的微囊化技术，可有效地掩盖海参蛋白肽的不良气味，而且并不 影响多肽的原始结构和生物学活性； 3.采用本专利技术方法制备的海参蛋白肽食用安全性高、无副作用、吸收效果好，对糖 尿病和高脂血症患者可起到良好的降糖降脂作用，对健康人群可起到保健作用。【具体实施方式】 下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例 仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种基于海参蛋白的降糖降脂肽制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）取新鲜海参洗净、去除内脏，冷冻干燥后粉碎，得海参粉；取海参粉，按1:20～1:30重量比例加入去离子水，然后在75～95℃水浴中加热15～30min；在匀浆功率1500～3500r/min条件下，匀浆5～10min，得到海参匀浆液；2）调节步骤1）所述海参匀浆液的pH值至7.0～10.0，加入蛋白酶I，使海参蛋白和蛋白酶I在40～60℃条件下进行酶解反应；所述蛋白酶I为碱性蛋白酶或胰蛋白酶；3）步骤2）酶解反应进行在2～4h后，保持所述酶解反应的反应体系温度不变，向所述反应体系中加入蛋白酶II，继续酶解2～4h，终止反应，得到海参蛋白水解液；4）将步骤3）所得的海参蛋白水解液升温至75～95℃，保持15～30min，灭活其中的蛋白酶I和蛋白酶II；冷却后离心除杂质，保留上清液；所述蛋白酶II为复合风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶中的任意一种；5）向步骤4）所得上清液中加入95%乙醇，使其终体积达到总体系的60～80%，4℃静置10～15h后离心取上清液，调节所述上清液pH值至6.0～8.0，并将所述上清液通过截流分子量为3000～10000Da的超滤膜，收集超滤液，得到海参蛋白降糖降脂肽。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘学玲，姜乃义，毛学英，宋佳佳，
申请(专利权)人：姜乃义，
类型：发明
国别省市：山东;37
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