AB-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺制造技术

本发明专利技术公开了AB-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺，花生壳→粉碎→称量→浸取→抽滤→离心→冷藏沉淀→过滤→离心→减压蒸馏→黄酮粗提液，AB-8大孔树脂使用前的预处理包括活化处理或使用后的再生处理，将活化或再生后的AB-8树脂缓慢注入层析柱内，使用少量蒸馏水通柱，然后静置一段时间使树脂晾干；AB-8大孔树脂对黄酮提取液进行吸附；吸附条件：上柱液浓度2.0862mg/ml，上柱液流速100.1907r/min，上柱液pH5.0105。本发明专利技术的有益效果是提供了AB-8大孔树脂纯化黄酮的最佳工艺，工艺吸附选择性好、洗脱率高、纯化率高。

【技术实现步骤摘要】
AB-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺
本专利技术属于化合物
，涉及AB-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺。
技术介绍
我国是农业大国，盛产花生，在加工的过程中产生大量的花生壳，大部分作为燃料燃烧处理，不仅造成了资源浪费，还产生了严重的环境污染问题。现代研究表明，花生壳中含有木犀草素等黄酮类物质，具有多种生物活性，在体内具有改善微循环、改变体内酶活性、降血脂、降低胆固醇含量、抗自由基、抗氧化、增强免疫功能、抗菌抗炎等药理作用。近几年来，从花生壳中提取的黄酮类化合物应用于保健食品或药品行业，前景良好。花生壳资源的深度开发利用，既解决了环境污染的问题，又提高了经济效益。花生属豆科一年生草本科植物，果实外皮粗糙，呈黄色或褐色，多数带有方格花纹，在我国各省区均有种植，近年来总产量达到14,500kt以上，已成为我国重要的经济作物。花生脂肪含量在50％左右，蛋白质含量达30％左右，是我国重要的油料作物，也是重要的植物蛋白资源，经过简单加工投入使用，在加工过程中每年产生花生壳约4,500kt。研究表明，花生壳主要成分是碳水化合物和粗纤维，以及，还含有少量的黄酮类化合物，以木犀草素含量较高，是主要有效成分。目前对于花生的利用还不够充分，其花生仁主要用来榨取食用油或者加工成副食品，而花生壳的传统处理方法是少部分用制作牲畜饲料和食用菌培养基，大部分当作燃料或者直接作为废弃物丢掉，造成了资源的闲置和浪费。随着科技的进步，花生壳的利用也进入到一个新的阶段，有关研究表明，花生壳具有较好的抗氧化、降血压、降低胆固醇含量等作用，以花生壳为原料生产的纯中药制剂“脉舒胶囊”已被用于治疗高血脂症。花生壳还可以用来提取木犀草素等黄酮类物质，作为纯天然无污染的染色剂和抗氧化剂，已被广泛用于食品行业和保健品行业中。黄酮类化合物(flavonoidscompound)是由植物光合作用产生的，广泛存在于然植物的根、茎、花、果实等中，是植物次生代谢产物，泛指两个苯环通过中央三碳链相互连结而成的一系列化合物，以黄酮(2-苯基色原酮)为母核，连有羟基、甲氧基、黄烷醇基等取代基，常以与糖结合为苷的形式存在，有的以游离态形式存在。黄酮类化合物分子结构复杂多样，数目种类繁多，表现出多种多样的药理活性，按结构可分为黄酮类(Flavone)、黄烷醇类(Flavanol)、黄烷酮类(Flavanone)、花色素类(Anthocynidia)等。黄酮类化合物存在形式多为结晶性固体，少数为无定形粉末，由于分子中存在的交叉共轭体系以及助色团类型、数目的不同，一般呈黄色或浅黄色。多数游离苷元难溶或不溶于水，易溶于乙醇、乙酸乙酯等有机溶剂中及碱液中，由于分子中多有酚羟基，故一般显酸性。常见的黄酮类化合物有芦丁、儿茶素、木犀草素、白藜芦醇及其衍生物等。近年来随着纯化技术的发展，纯度较高的黄酮物质在医药、食品等行业中得到越来越多的应用，开发了多种以黄酮类物质为主要成分的产品。(1)黄酮类化合物在医药行业中的应用在医药方面，根据其药理作用，花生壳在民间被当作中草药煎服用于治疗哮喘、痰多、肥胖等，其单方制剂“脉舒胶囊”用于治疗高血脂症。(2)黄酮类化合物在食品工业中的应用黄酮类化合物因其天然无污染、色调鲜艳纯正等特性已广泛应用于食品行业中，有关文献表明，黄酮类化合物是一种天然抗氧化剂，可以防止食品的氧化变质，在某些物质体系中其抗氧化效果优于维生素E；同时也是一种天然色素，用作一些食品的着色剂。(3)黄酮类化合物在化妆品行业中的应用黄酮类化合物具有美容、保湿、增白等功效，广泛应用于化妆品行业中，作为天然防晒剂、增白剂、皮肤调理剂、天然无毒染发剂和发用调理剂等已投产使用。皮肤中黑色素含量是影响肤色的重要物质，由酪氨酸酶催化产生，当黑色素含量足够高时可产生黄褐斑。而黄酮类物质既能消除自由基又能抑制酪氨酸酶的活性，可减少黑色素的产生，使皮肤变白。黄酮物质具有生物活性，与皮肤中物质相近，不同于化学制品，会大大减小对人体的刺激，皮肤不易发生过敏反应。花生壳黄酮粗提液杂质多、成分复杂，不符合医学和食品行业标准，需要进一步精制。目前国内外关于花生壳黄酮纯化工艺的研究报道还相对较少，缺乏系统性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供AB-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺，解决了现有方法纯化黄酮提取物纯化率低的问题。本专利技术所采用的技术方案是按照以下步骤进行：步骤1：将洁净干燥的花生壳利用高效粉碎机进行粉碎，称量25g花生壳粉放于三角烧瓶内；步骤2：按料液比为1∶30加入75％乙醇750mL，然后放置于温度为75℃恒温振荡器内浸取2h；步骤3：振荡后将溶液进行真空抽滤，滤液放于离心机内在1500r/min的条件下离心30min；步骤4：取出离心后的上清液于烧杯内，用保鲜膜封存，放置于冰箱内进行冷藏沉淀24h；步骤5：冷藏沉淀后取出再放置于离心机内在4000r/min的条件下离心30min；步骤6：离心后取出上清液于旋转蒸发仪的旋转瓶内并加入蒸馏水，进行减压加热蒸馏，直到乙醇全部蒸馏出来，将得到的黄酮提取液稀释成上柱液所需浓度2.0862mg/ml；步骤7：AB-8大孔树脂使用前的预处理：(1)活化处理：先取适量的树脂于三角烧瓶内，加入95％乙醇进行浸泡，浸泡24h后用蒸馏水在耐酸碱漏斗内进行抽滤淋洗，并用蒸馏水进行清洗，洗至无乙醇味为止，再放入三角烧瓶内加入5％盐酸进行浸泡，浸泡4h后再用耐酸漏斗进行抽滤清洗至中性，清洗使用蒸馏水，酸洗后重新放入三角烧瓶内加入5％的氢氧化钠进行浸泡，浸泡4h后取出用耐酸碱漏斗进行抽滤清洗，清洗同样用蒸馏水，清洗至至中性后便完成了树脂的活化；(2)使用后的再生处理：将已经使用过的树脂放于在耐酸碱漏斗内进行抽滤并用用蒸馏水进行淋洗，洗至抽滤液为无色，取出树脂至三角烧瓶内，加70％的乙醇进行45℃恒温振荡2h，振荡后进行过滤，将树脂重新放置三角烧瓶内重复上述步骤几次，直至树脂恢复原来的颜色，然后进行蒸馏水淋洗，洗至无乙醇味为止，将树脂重新放入三角烧瓶内再加5％盐酸进行浸泡4h后再用蒸馏水淋洗至中性，然后再用5％的氢氧化钠进行浸泡，浸泡4h后取出使用蒸馏水淋洗至中性，完成树脂的再生；(3)装柱：安装好铁架台，将层析柱竖直固定，将活化或再生后的AB-8树脂缓慢注入层析柱内，使用少量蒸馏水通柱，然后静置一段时间使树脂晾干；步骤8：AB-8大孔树脂对黄酮提取液进行吸附；吸附条件：上柱液浓度2.0862mg/ml，上柱液流速100.1907r/min，上柱液pH5.0105。本专利技术的有益效果是提供了AB-8大孔树脂纯化黄酮的最佳工艺，工艺吸附选择性好、洗脱率高、纯化率高。附图说明图1是芦丁标准曲线示意图；图2是Box-Behnken试验第2次结果示意图；图3是Box-Behnken试验第3次结果示意图；图4是Box-Behnken试验第4次结果示意图；图5是Box-Behnken试验第5次结果示意图；图6是Box-Behnken试验第6次结果示意图；图7是Box-Behnken试验第7次结果示意图；图8是Box-Behnken试验第8次结果示意图；图9是Box-Behnken试验第9次结果示意图；图10是Box-Behnken试验第10次结果示意图；本文档来自技高网...

【技术保护点】
AB‑8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺，其特征在于：按照以下步骤进行：步骤1：将洁净干燥的花生壳利用高效粉碎机进行粉碎，称量25g花生壳粉放于三角烧瓶内；步骤2：按料液比为1∶30加入75％乙醇750mL，然后放置于温度为75℃恒温振荡器内浸取2h；步骤3：振荡后将溶液进行真空抽滤，滤液放于离心机内在1500r/min的条件下离心30min；步骤4：取出离心后的上清液于烧杯内，用保鲜膜封存，放置于冰箱内进行冷藏沉淀24h；步骤5：冷藏沉淀后取出再放置于离心机内在4000r/min的条件下离心30min；步骤6：离心后取出上清液于旋转蒸发仪的旋转瓶内并加入蒸馏水，进行减压加热蒸馏，直到乙醇全部蒸馏出来，将得到的黄酮提取液稀释成上柱液所需浓度2.0862mg/ml；步骤7：AB‑8大孔树脂使用前的预处理：(1)活化处理：先取适量的树脂于三角烧瓶内，加入95％乙醇进行浸泡，浸泡24h后用蒸馏水在耐酸碱漏斗内进行抽滤淋洗，并用蒸馏水进行清洗，洗至无乙醇味为止，再放入三角烧瓶内加入5％盐酸进行浸泡，浸泡4h后再用耐酸漏斗进行抽滤清洗至中性，清洗使用蒸馏水，酸洗后重新放入三角烧瓶内加入5％的氢氧化钠进行浸泡，浸泡4h后取出用耐酸碱漏斗进行抽滤清洗，清洗同样用蒸馏水，清洗至中性后便完成了树脂的活化；(2)使用后的再生处理：将已经使用过的树脂放于在耐酸碱漏斗内进行抽滤并用蒸馏水进行淋洗，洗至抽滤液为无色，取出树脂至三角烧瓶内，加70％的乙醇进行45℃恒温振荡2h，振荡后进行过滤，将树脂重新放置三角烧瓶内重复上述步骤几次，直至树脂恢复原来的颜色，然后进行蒸馏水淋洗，洗至无乙醇味为止，将树脂重新放入三角烧瓶内再加5％盐酸进行浸泡4h后再用蒸馏水淋洗至中性，然后再用5％的氢氧化钠进行浸泡，浸泡4h后取出使用蒸馏水淋洗至中性，完成树脂的再生；(3)装柱：安装好铁架台，将层析柱竖直固定，将活化或再生后的AB‑8树脂缓慢注入层析柱内，使用少量蒸馏水通柱，然后静置一段时间使树脂晾干；步骤8：AB‑8大孔树脂对黄酮提取液进行吸附；吸附条件：上柱液浓度2.0862mg/ml，上柱液流速100.1907r/min，上柱液pH5.0105。...

【技术特征摘要】
1.AB-8大孔树脂对花生壳黄酮粗提液动态吸附工艺，其特征在于：按照以下步骤进行：步骤1：将洁净干燥的花生壳利用高效粉碎机进行粉碎，称量25g花生壳粉放于三角烧瓶内；步骤2：按料液比为1∶30加入75％乙醇750mL，然后放置于温度为75℃恒温振荡器内浸取2h；步骤3：振荡后将溶液进行真空抽滤，滤液放于离心机内在1500r/min的条件下离心30min；步骤4：取出离心后的上清液于烧杯内，用保鲜膜封存，放置于冰箱内进行冷藏沉淀24h；步骤5：冷藏沉淀后取出再放置于离心机内在4000r/min的条件下离心30min；步骤6：离心后取出上清液于旋转蒸发仪的旋转瓶内并加入蒸馏水，进行减压加热蒸馏，直到乙醇全部蒸馏出来，将得到的黄酮提取液稀释成上柱液所需浓度2.0862mg/ml；步骤7：AB-8大孔树脂使用前的预处理：(1)活化处理：先取适量的树脂于三角烧瓶内，加入95％乙醇进行浸泡，浸泡24h后用蒸馏水在耐酸碱漏斗内进行抽滤淋洗，并用蒸馏水进行清洗，洗至无乙醇味为止，再放入三角烧瓶内加入5％盐酸进行浸泡，浸泡4h...

【专利技术属性】
技术研发人员：李杰，罗建成，杜朝军，程爽，许彬，王莹，田启良，
申请(专利权)人：李杰，
类型：发明
国别省市：河南;41