N末端脑钠肽前体测定试剂条制造技术

一种N末端脑钠肽前体测定试剂条，其特征在于，所述试剂条包括以下组件：用于接收待测样品的接收层；同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体的结合层，其中所述第一抗体和第二抗体分别特异性识别N末端脑钠肽前体的不同表位；具有相间隔的检测带和质控带的检测层，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体；吸水层；和底层，其中所述接收层、结合层、检测层和吸水层在所述底层上顺序排列并顺次搭接。本实用新型专利技术的试剂条能够实现N末端脑钠肽前体的高灵敏性检测。

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种用于免疫检测的试剂条，具体涉及一种联合应用量子点与稀土荧光材料来检测的N末端脑钠肽前体的试剂条。
技术介绍
脑钠肽前体原在心肌细胞内合成，其脱去信号肽成为脑钠肽前体分子，随后脑钠肽前体变为脑钠肽和N末端脑钠肽前体。心衰患者血浆脑钠肽浓度可增至几个ng/ml，而N末端脑钠肽前体浓度可高达几十个ng/ml。且心衰患者血液中这两种多肽的浓度与疾病的严重程度成正比。因此，血液中N末端脑钠肽前体检测被广泛用于鉴定心衰患者和检测心衰的严重程度。在临床诊断领域，目前常用的检测目的标志物的方法包括:酶联免疫法、化学发光法、胶乳增强免疫比浊法、胶体金免疫层析法、荧光免疫层析法等。酶联免疫法及化学发光法检测灵敏度高，可实现准确定量，但其耗时过长，而且无法进行单份样本的即时测定。胶乳增强免疫比浊法虽可实现高通量筛选，但由于方法学本身的限制，其检测灵敏度较低，无法对低值样品(如含量在Pg/ml-ng/ml水平)进行精确测定。胶体金免疫层析法操作简单，无需特殊的仪器设备，但只能实现半定量。在荧光免疫层析法中，传统应用的有机荧光化合物如异硫氰基荧光素、罗丹明类荧光染料等虽在水溶液中具有很高的灵敏度，但其标记抗体或抗原后用于复杂的血清、体液、细胞等生物样品免疫分析测定时，一旦样品中的待检物浓度在低浓度水平时(如Pg/ml-ng/ml)，共存杂质(如血清蛋白质、胆红素等)的浓度将大大高于待检物浓度。此时，高浓度的共存杂质产生的背景荧光就会对免疫产物的荧光测定造成严重的干扰，进而显著降低荧光免疫测定的灵敏度，这极大地限制了其在临床诊断领域的应用。因此，需要有一种能够对N末端脑钠肽前体进行高灵敏度测定并满足临床需要的检测手段，特别是能够满足临床大规模样品快速检测的试剂条。
技术实现思路
抟术问题目前现有技术中缺乏能够实现对N末端脑钠肽前体进行高灵敏度测定的试剂条。针对现有技术中存在的对目前N末端脑钠肽前体检测试剂条改进的需求，本技术提供了一种精确检测N末端脑钠肽前体的试剂条。_7] 技术方案一方面，本技术提供了一种N末端脑钠肽前体测定试剂条，其特征在于，所述试剂条包括以下组件:i)用于接收待测样品的接收层，ii)同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体的结合层，其中所述第一抗体和第二抗体分别特异性识别N末端脑钠肽前体的不同表位，iii)具有相间隔的检测带和质控带的检测层，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，和iv)吸水层，和V)底层，其中所述接收层、结合层、检测层和吸水层在所述底层上顺序排列并顺次搭接。在一个实施方式中，所述量子点为微球形式且具有2nm-30nm的粒径范围，且所述量子点选自以下组中:CdTe、CdSe, PbSe, InP和GaN。在一个实施方式中，所述结合层上进一步包被有微球，其中所述微球负载有所述稀土荧光材料和所述第一抗体。在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为50nm_400nm。在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为100nm-300nm。在一个实施方式中，所述微球的粒径大小为10nm或300nm。在一个实施方式中，所述检测带和所述质控带之间的间隔在0.lcm-0.6cm之间。在一个实施方式中，所述试剂条的宽度在0.2cm_lcm之间。有益效果本技术的试剂条的主要优点包括:I)联合应用量子点与稀土荧光材料，极好的克服了单独应用量子点或者稀土荧光材料存在的低值灵敏度和检测线性范围无法兼顾的问题；和2)通过引入生物素-亲和素级联放大系统，进一步提高了检测灵敏度。【附图说明】图1本技术的试剂条的侧视图。图2本技术的试剂条的俯视图。附图标记:I接收层；2结合层；3检测层；4吸水层；5底层；6量子点微球；7检测带；和8质控带。【具体实施方式】下文中将参照附图来更详细地描述示例性实施方式。所述附图用于图示说明本技术，而非对其进行限制。在附图中，为了清楚的说明，放大了试剂条部分区域的尺寸及其相对比例。图1是本技术的试剂条的侧视图。如图1所述，本技术的试剂条包括在底层5上顺序排列并顺次搭接的接收层1、结合层2、检测层3和吸水层4。结合层2上同时包被有由量子点6和稀土焚光材料(未不出)分别单独标记的第一抗体以及由生物素(未示出)标记的第二抗体。检测层3上具有相间隔的检测带7和质控带8。接收层I用于接收样品，其在试剂条的结构中与结合层2搭接。接收层I与结合层2搭接的方式并不受图1的限制。在一个实施方式中，接收层I搭接在结合层2之上。在一个实施方式中，结合层2搭接在接收层I之上。本技术的试剂条在传统试剂条的基础上采用单独的接收层I来接收样品。接收层I可由选自玻璃纤维素膜或者聚酯膜、棉纤的材料制成，优选由玻璃纤维素膜制成。接收层I可以起到样品过滤的作用。例如，当待检测样品为血浆、血清时，接收层可以过滤样品中的颗粒性不溶物。本技术的试剂条所适合检测的样品包括但不限于血清、血浆、尿液。在一个实施方式中，接收层所接收的样品为血浆。在另一个实施方式中，接收层所接收的样品为血清。采用单独接收层的设计方式可以使得进入后续结合层2的样品纯度更高，这有助于提高检测的精确度和灵敏度。结合层2位于接收层I和检测层3之间，用于布置与待测样品中特定蛋白反应的抗体。结合层2与接收层I和检测层3搭接的方式并不受图1所示方式的限制。对于本技术而言，所述特定蛋白本身可为N末端脑钠肽前体，或者为包含在待测样品诸如血清、血浆、尿液等中的N末端脑钠肽前体。结合层2上同时包被有以下可以特异性结合N末端脑钠肽前体的抗体，即由量子点6和稀土荧光材料分别单独标记的抗N末端脑钠肽前体的第一抗体以及由生物素标记的抗N末端脑钠肽前体的第二抗体。在本技术的试剂条中，抗N末端脑钠肽前体的第一抗体分别由量子点6和稀土焚光材料(未示出)分别单独标记。量子点是由半导体材料制成的、稳定直径在2nm-30nm的纳米粒子，通常呈现微球形。量子点可由例如IIB-VIA或IIIA-VA族元素制成。量子点的电子和空穴被量子限域，连续能带结构变成具有分子特性的分立能级结构，所以量子点在受激后可以发射荧光。量子点与传统的荧光试剂相比具有发射波长可调、激发谱带宽、发射谱带窄、荧光量子产率高及光化学稳定性好等优良的光学特性。采用量子点来标记抗体可以极大的提高检测的精确度和灵敏度。在一个实施方式中，所述量子点具有几nm至几十nm的粒径。在另一个实施方式中，所述量子点具有2nm-30nm的粒径。在一个优选实施方式中，所述量子点具有2nm-20nm的粒径。在一个优选实施方式中，所述量子点具有5nm-20nm的粒径。在一个实施方式中，所述量子点为I1-VI族量子点(如CdTe、CdSe等)。在另一个实施方式中，所述量子点为II1-V族量子点(如InP、GaN等)。在又一个实施方式中，所述量子点为IV-VI族量子点(如 PbSe 等)ο稀土荧光材料包括化学元素周期表中镧系元素一镧(La)、铈(Ce)、镨(Pr)、钕(Nd)、钷(Pm)、钐(Sm)、铕(Eu)、钆(Gd)、铽(Tb)、镝(Dy)、钬(Ho)、铒(Er)、铥(Tm)、镱(Yb)、镥(Lu)，以及与镧系的15本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种N末端脑钠肽前体测定试剂条，其特征在于，所述试剂条包括以下组件：i)用于接收待测样品的接收层，ii)同时包被有由量子点和稀土荧光材料分别单独标记的第一抗体以及由生物素标记的第二抗体的结合层，其中所述第一抗体和第二抗体分别特异性识别N末端脑钠肽前体的不同表位，iii)具有相间隔的检测带和质控带的检测层，其中所述检测带固定有亲和素，所述质控带固定有抗鼠IgG的抗体，和iv)吸水层，和v)底层，其中所述接收层、结合层、检测层和吸水层在所述底层上顺序排列并顺次搭接。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘勇，祁双，宋小力，宋芳，朱世伟，李鼎锋，戈军，
申请(专利权)人：北京安百胜生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：北京;11