一种中药不同品质等级的快速鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种中药不同品质等级的快速鉴别方法，该方法依据反映中药体系内在成分含量、种类和结构信息的指纹图谱信息，确定反映不同品质等级中药的信息阈值标准，建立中药的不同品质等级的科学快速鉴别方法。通过提出不同品质等级中药的指纹峰频率阈值范围：优级x＝1；良级x＝0.5；中级x＝0；合格等级x＝-0.5，由此确定研究的所有同类样品的指纹图谱中，属于每个品质等级的指纹峰数。然后确定每个样品指纹图谱中属于不同品质等级的指纹峰数，根据建立的中药优级品标准、良级品标准、中级品标准、合格级品标准，确定每个样品所属的品质等级，实现对中药品质等级的精确快速鉴别。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药领域，具体涉及一种中药不同品质等级的快速鉴别方法。
技术介绍
中药治疗疾病的最直接的物质基础是其中所含有的各类化学成分。由于受到基因变异及环境条件变化的影响，生物体系代谢物及次生代谢物的成分种类及含量将会发生显著地变化,导致其品质发生变化。为了保证中药的品质及其临床治疗疾病稳定的有效性，必须对中药品质进行定量准确判别。中药材的品种、产地、生长时期、采集加工工艺及储存条件的变化，导致其中成分种类及含量的显著变化。中药复方由多味中药材组成，这可能会导致不同厂家的同一配伍组成的中药复方的品质具有比单味药材更加显著的变化范围。中药品质等级分为两个方面,其一,中药材品质等级，目前主要是依据品种、产地、尺寸、多种宏观性状及单位质量药材所包含的个头数来确定其品质等级。生物效价法亦用于研究不同产地的中药材的品质。有学者利用液相色谱指纹图谱,人为主观确定某些参数值标准对不同厂家的十全大补丸进行了品质等级研究,但该法难以保证准确反映其品质的实际差异。中药材及复方皆具有多效性，中药的成分针对不同的疾病作用效果不同。因此，目前中国药典中法定采用一种或几种成分的含量来评价中药的质量，严重缺乏品质及药效的代表性，无法得到准确的质量评价结果。无论是中药材还是中药复方,目前尚缺乏基于生物内在规律建立的内禀品质等级标准，以摆脱主观经验，实现对中药品种的无偏质量评价。上述诸多问题都说明对中药材及中药复方进行准确的品质评价具有重大的意义及应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了解决上述问题，提供一种中药不同品质等级的快速鉴别方法。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种中药不同品质等级的快速鉴别方法，包括以下步骤：(1)将待进行品质鉴别的中药低温(<4℃)冷冻保存；若为固体样品，则粉碎处理所述固体样品，粉碎后的固体样品过40～120目筛，然后将过筛后的粉末在50～90℃烘干1～6h，将烘干后的粉末低温冷冻保存；固体提取物、液体提取物或提取物浓缩液，则可直接低温(<4℃)冷冻保存。固体提取物即采用溶剂提取中药成分，挥干溶剂后是固体的提取物。液体提取物如挥发油等。(2)使用KBr压片法测定步骤(1)中处理过的固体样品或固体提取物的红外指纹图谱；使用液膜法测定步骤(1)中处理过的提取物浓缩溶液或液体提取物的红外指纹图谱；使用色谱法测定提取物浓缩溶液或液体提取物的色谱指纹图谱。(3)确定所有样品的共有峰组：根据Shaprio-Wilk W检验法，红外指纹图谱以指纹峰波数为变量、色谱指纹峰以相对保留值为变量，确定每个样品2个以上指纹图谱的共有峰组以及确定不同样品的指纹图谱之间的共有峰组，红外指纹图谱中每个共有峰组对应的指纹峰的波数，采用该组所有指纹峰波数的平均值表示；色谱指纹图谱中每个共有峰组对应的指纹峰的相对保留时间，采用该组所有指纹峰的相对保留时间的平均值表示。(4)计算同类样品所有指纹图谱中，各个共有峰组对应的峰出现的频率(即次数)，简称峰频率。指纹图谱中指纹峰作为分子层次的多种性状，其频率遵从正态分布，据此构建指纹峰的频率尺度，f≥f‾+xSf---(1)]]>其中，f是指纹峰频率，是指纹图谱中所有指纹峰的平均频率，Sf是指纹图谱中所有指纹峰频率的标准偏差，-3≦x≦3。(5)确定不同品质等级的指纹峰频率分布范围，Fj,j＝1,2,3,4,其中，优级指纹峰F1,f≥f‾+Sf;]]>良级指纹峰F2,f≥f‾+0.5Sf;]]>中级指纹峰F3,f≥f‾;]]>合格级指纹峰F4,f≥f‾]]>-0.5Sf.]]>中药不同品质等级判别标准根据建立的不同品质等级的指纹峰频率分布范围：Fj,j＝1,2,3,4，确定属于不同品质等级的指纹峰，f≥F1的指纹峰组作为该中药的优级品质特征，f≥F2的指纹峰组作为该中药的良级品质特征，f≥F3的指纹峰组作为该中药的中级品质特征，f≥F4的指纹峰组作为该中药的合格级品质特征，f≥Fj中的j越大，说明中药品质越低。(6)中药不同品质等级的快速鉴别根据双指标信息理论方程I＝-(PglnPg+PalnPva+PblnPvb)(Pa，Pb分别是相互比较的两个指纹图谱a,b中，a，b的变异峰数与两个指纹图谱独立峰数的比值；Pva与Pvb分别是相互比较的两个指纹图谱a,b中，a，b的变异峰率)，依据其得到的相同品质等级生物体系的相似度满足Pg≥61％,作为生物体系属于同一品质等级的定量判别标准，而不同品质等级样品的判别规则如下：优级品标准：良级品标准：中级品标准：合格级品标准：优选的，步骤(1)中所述粉碎处理过的固体样品，过80目筛，在60℃下烘干2h。优选的，所述KBr压片法测定指纹图谱的过程如下：取1～30mg经步骤(1)处理后的样品粉末或采用溶剂提取的固体成分于研钵中，再取样品质量的60～200倍的KBr粉末于研钵中，与样品混合，并且在红外灯下研磨均匀；将适量研磨好的样品装于干燥的模具内，放入压片机中在10～20MPa压力下加压，维持1～4min，放气卸压后，取出模具脱模，得到了KBr压片；全部用KBr粉末并且按以上步骤制片，用做参照物；测量，每个样品平行测定2～15次，得相应的红外指纹图谱。优选的，所述KBr粉末的质量为样品质量的100倍。优选的，将适量研磨好的样品装于干燥的模具内，放入压力机中在14MPa压力下加压。优选的，所述液膜法为用KBr晶体片做载体，以空气为参照物，采用液膜法测定药品的红外指纹图谱的方法，每个样品平行测定2～15次，得相应的红外指纹图谱。优选的，在最佳色谱分离分析条件下，测定中药提取物色谱指纹图谱2～15次，得相应的色谱指纹图谱。优选的，每个样品平行测定9～12次；红外指纹图谱以14～40cm-1平滑处理，标峰灵敏度范围是50～90。优选的，红外指纹图谱以25cm-1平滑处理，测定脂溶性提取物的灵敏度范围为50～70，中等极性提取物的灵敏度范围为60～80、强极性提取物的灵敏度范围为70～90，中药复方粉末的灵敏度范围为60～80。优选的，所述步骤(2)中采用色谱法测定每个中药样品提取物浓缩液或液体提取物的色谱指纹图谱，每个样品平行测定9～12次。优选的，中药的不同品质等级的鉴别顺序为:依次进行优级、良级、中级、合格级鉴别。这些品质等级具有排它等本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中药不同品质等级的快速鉴别方法，包括以下步骤：(1)将待进行品质鉴别的中药在<4℃下冷冻保存；若为固体，则粉碎处理所述固体样品，粉碎后的固体样品过40～120目筛，然后将过筛后的粉末在50～90℃烘干1～6h，将烘干后的粉末低温冷冻保存；若为固体提取物、液体提取物或提取物浓缩溶液，则可直接在<4℃下冷冻保存；(2)使用KBr压片法测定步骤(1)中处理过的固体样品或固体提取物的红外指纹图谱；使用液膜法测定步骤(1)中处理过的提取物溶液或液体提取物的红外指纹图谱；使用色谱法测定步骤(1)中处理过的提取物溶液或液体提取物的色谱指纹图谱；(3)确定所有样品的共有峰组：根据Shaprio‑Wilk W检验法，红外指纹图谱以指纹峰波数为变量、色谱指纹峰以相对保留值为变量，确定每个样品2个以上指纹图谱的共有峰组以及确定不同样品的指纹图谱之间的共有峰组，每个共有峰组对应的指纹峰的波数，采用该组所有指纹峰波数的平均值表示；色谱指纹图谱中每个共有峰组对应的指纹峰的相对保留时间，采用该组所有指纹峰的相对保留时间的平均值表示；(4)计算同类样品所有指纹图谱中，各个共有峰组对应的峰出现的频率，简称峰频率，构建指纹峰的频率尺度，f≥f‾+xSf---(1),]]>其中，f是指纹峰频率，是指纹图谱中所有指纹峰的平均频率，Sf是指纹图谱中所有指纹峰频率的标准偏差，‑3≤x≤3；(5)确定不同品质等级的指纹峰频率分布范围，Fj,j＝1,2,3,4,其中，优级指纹峰F1,良级指纹峰F2,中级指纹峰F3,合格级指纹峰F4,(6)中药不同品质等级的快速鉴别根据双指标信息理论方程I＝‑(PglnPg+Pa lnPva+Pb lnPvb)，Pa，Pb分别是相互比较的两个指纹图谱a，b中，a，b的变异峰数与两个指纹图谱独立峰数的比值；Pva与Pvb分别是相互比较的两个指纹图谱a，b中，a，b的变异峰率；依据其得到的相同品质等级生物体系的相似度满足Pg≥61％，作为生物体系属于同一品质等级定量判别标准，而不同品质等级样品的判别规则如下：优级品标准：良级品标准：中级品标准：合格级品标准：...

【技术特征摘要】
1.一种中药不同品质等级的快速鉴别方法，包括以下步骤：
(1)将待进行品质鉴别的中药在<4℃下冷冻保存；若为固体，则粉碎处理所述固体样
品，粉碎后的固体样品过40～120目筛，然后将过筛后的粉末在50～90℃烘干1～6h，将烘干
后的粉末低温冷冻保存；若为固体提取物、液体提取物或提取物浓缩溶液，则可直接在<4℃
下冷冻保存；
(2)使用KBr压片法测定步骤(1)中处理过的固体样品或固体提取物的红外指纹图
谱；
使用液膜法测定步骤(1)中处理过的提取物溶液或液体提取物的红外指纹图谱；
使用色谱法测定步骤(1)中处理过的提取物溶液或液体提取物的色谱指纹图谱；
(3)确定所有样品的共有峰组：根据Shaprio-Wilk W检验法，红外指纹图谱以指纹峰
波数为变量、色谱指纹峰以相对保留值为变量，确定每个样品2个以上指纹图谱的共有峰
组以及确定不同样品的指纹图谱之间的共有峰组，每个共有峰组对应的指纹峰的波数，采
用该组所有指纹峰波数的平均值表示；色谱指纹图谱中每个共有峰组对应的指纹峰的相对
保留时间，采用该组所有指纹峰的相对保留时间的平均值表示；
(4)计算同类样品所有指纹图谱中，各个共有峰组对应的峰出现的频率，简称峰频率，
构建指纹峰的频率尺度，
f≥f‾+xSf---(1),]]>其中，f是指纹峰频率，是指纹图谱中所有指纹峰的平均频率，Sf是指纹图谱中所
有指纹峰频率的标准偏差，-3≤x≤3；
(5)确定不同品质等级的指纹峰频率分布范围，Fj,j＝1,2,3,4,其中，优级指纹峰F1,
良级指纹峰F2,中级指纹峰F3,合格级指纹峰F4,(6)中药不同品质等级的快速鉴别
根据双指标信息理论方程I＝-(PglnPg+Pa lnPva+Pb lnPvb)，Pa，Pb分别是相互比较的
两个指纹图谱a，b中，a，b的变异峰数与两个指纹图谱独立峰数的比值；Pva与Pvb分别
是相互比较的两个指纹图谱a，b中，a，b的变异峰率；依据其得到的相同品质等级生物体
系的相似度满足Pg≥61％，作为生物体系属于同一品质等级定量判别标准，而不同品质等
...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹华彬，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37