基于亲和色谱测定超分子相互作用解离速率常数的方法技术

本发明专利技术涉及基于亲和色谱测定解离速率常数的方法，特别是针对相互作用较弱、较广泛的超分子相互作用。所述方法是将主分子先进行固定再测定的基于定量亲和色谱的方法。所述方法包括：在一定温度条件下，在多个流速下分别采集第一待分析客分子与第二待分析客分子在键合有目标主分子的亲和色谱柱上的色谱流出曲线，通过峰拟合计算保留时间、半峰宽及塔板高度，计算解离速率常数。本发明专利技术无需特殊仪器设备，利用常规色谱分析方法，可测得超分子弱相互作用的动力学速率常数，同时可与紫外、荧光及质谱等多种检测器联用，在低浓度、水溶性差的药物检测方面，以及超分子相互作用动力学参数的低成本、快速测定方面具有独特优势。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基于亲和色谱测定超分子相互作用解离速率常数的方法，该方法包括以下步骤：（1）提供一种键合有目标主分子的亲和色谱柱；（2）用流动相制备一定浓度的第一待分析客分子的样品溶液；（3）以带流出方式将所述第一待分析客分子的样品溶液以一定流速注入色谱系统，采集第一待分析客分子在亲和色谱柱上的流出曲线，并通过峰拟合计算第一待分析客分子流出曲线的保留时间、半峰宽及塔板高度（HR）；（4）用与第一待分析客分子相同的流动相制备第二待分析客分子的样品溶液；（5）采用与第一待分析客分子相同的方式获得第二待分析客分子流出曲线的保留时间、半峰宽及塔板高度（HM,C）；（6）按照（1）～（5）中所述的方法重复测定其他至...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李海燕，葛静文，殷宪振，孙立新，张继稳，
申请(专利权)人：中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31