阳离子性脂质制造技术

本发明专利技术提供使得容易将核酸导入到例如细胞内的式(A)表示的阳离子性脂质等、包含该阳离子性脂质及核酸的组合物、使用包含该阳离子性脂质及核酸的组合物将核酸导入细胞内的方法等，所述式(A)中，R1为链烯基等；R2为链烯基等；R3及R4为烷基，或者连接在一起形成亚烷基，或者R3与R5一起形成亚烷基；R5为氢原子等，或者与R3一起形成亚烷基；X1为亚烷基；X2为单键，或者为亚烷基。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及使得容易将核酸导入到例如细胞内等的阳离子性脂质、包含该阳离子性脂质的组合物等。
技术介绍
阳离子性脂质是具有脂质亲和性区域和亲水性区域的两亲性分子，所述脂质亲和性区域含有一个或多个烃基，所述亲水性区域含有至少一个带正电的极性首基(headgroup)。阳离子性脂质与核酸等巨大分子通过形成以总电荷计带正电的复合体，使得核酸等巨大分子容易通过细胞的原生质膜进入细胞质，因此阳离子性脂质是有用的。可在体外及体内进行的该过程作为转染而被人们知晓。专利文献1及2公开了一种阳离子性脂质及包含该脂质的脂质粒子，所述阳离子性脂质有利于在体内将核酸送达至细胞内，并且有利于在适于治疗疾病的核酸-脂质粒子组合物中使用。专利文献1中公开了例如2,2－二亚油基－4－(2－二甲基氨基乙基)－[1,3]－二氧戊环(2,2－dilinoleyl－4－(2－dimethylaminoethyl)－[1,3]－dioxolane；DLin－KC2－DMA，结构式如下所示)等阳离子性脂质，专利文献2中公开了例如4－(二甲基氨基)丁酸(6Z,9Z,28Z,31Z)－三十七碳－6,9,28,31－四烯－19－基酯((6Z,9Z,28Z,31Z)－heptatriaconta－6,9,28,31－tetraen－19－yl 4－(dimethylamino)butanoate；DLin－MC3－DMA，结构式如下所示)等阳离子性脂质，<br>现有技术文献专利文献专利文献1:国际公开第2010/042877号小册子专利文献2:国际公开第2010/054401号小册子
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供使得容易将核酸导入到例如细胞内等的阳离子性脂质、包含该阳离子性脂质的组合物等。本专利技术涉及以下的(1)～(22)。(1)式(A)、式(B)或式(C)表示的阳离子性脂质，(式(A)中，R1为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，R2为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基乙基或炔氧基丙基，R3及R4相同或不同，为碳原子数1～3的烷基，或者连接在一起形成碳原子数2～8的亚烷基，或者R3与R5一起形成碳原子数2～8的亚烷基，R5为氢原子，碳原子数1～6的烷基，碳原子数3～6的链烯基，氨基，单烷基氨基，羟基，烷氧基，氨基甲酰基，单烷基氨基甲酰基，二烷基氨基甲酰基，或者被相同或不同的1～3个氨基、单烷基氨基、羟基、烷氧基、氨基甲酰基、单烷基氨基甲酰基或二烷基氨基甲酰基取代的碳原子数1～6的烷基或碳原子数3～6的链烯基，或者与R3一起形成碳原子数2～8的亚烷基，X1为碳原子数1～6的亚烷基，X2为单键，或者为碳原子数1～6的亚烷基，其中，X1与X2的碳原子数之和为7以下，R5为氢原子时，X2为单键，R5与R3一起形成碳原子数2～6的亚烷基时，X2为单键，或者为亚甲基或亚乙基)；(式(B)中，R6为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，R7为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基乙基或炔氧基丙基)；(式(C)中，R8为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，R9为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基乙基或炔氧基丙基，X3为碳原子数1～3的亚烷基，R10为氢原子，或碳原子数1～3的烷基)。(2)如上述(1)所述的阳离子性脂质，其中，R1、R2、R6、R7、R8及R9各自独立地为十四烷基、十六烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基或(Z)-二十二碳-13-烯基。(3)如上述(1)所述的阳离子性脂质，其中，R1、R2、R6、R7、R8及R9各自独立地为(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基或(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基。(4)如上述(1)～(3)中任一项所述的阳离子性脂质，其中，X1为碳原子数1～3的亚烷基，X2为单键或亚甲基。(5)如上述(1)～(4)中任一项所述的阳离子性脂质，其中，X3为亚甲基或亚乙基。(6)如上述(1)～(5)中任一项所述的阳离子性脂质，其中，R3及R4相同或不同，为甲基或乙基，或者连接在一起形成正亚戊基或正亚己基。(7)如上述(1)～(5)中任一项所述的阳离子性脂质，其中，R3及R5连接在一起形成正亚丙基或正亚丁基，R4为甲基或乙基。(8)如上述(1)～(7)中任一项所述的阳离子性脂质，其中，R5及R10各自独立地为氢原子或甲基。(9)一种组合物，含有上述(1)～(8)中任一项所述的阳离子性脂质及核酸。(10)如上述(9)所述的组合物，其中，该阳离子性脂质与该核酸形成复合体，或者该阳离子性脂质与中性脂质及/或高分子组合所得的物质与该核酸形成复合体。(11)如上述(9)所述的组合物，其中，该阳离子性脂质与该核酸形成复合体，或者该阳离子性脂质与中性脂质及/或高分子组合所得的物质与该核酸形成复合体，所述组合物含有将该复合体封入的脂质膜。(12)如上述(9)～(11)中任一项所述的组合物，其中，核酸为具有利用了RNA干扰(RNAi)的、靶基因表达抑制作用的核酸。(13)如上述(12)所述的组合物，其中，靶基因为在肝脏、肺、肾脏或脾脏中表达的基因。(14)使用上述(9)～(13)中任一项所述的组合物将该核酸导入细胞内的方法。(15)如上述(14)所述的方法，其中，细胞为哺乳类动物的肝脏、肺、肾脏或脾脏中的细胞。(16)如上述(14)或(15)所述的方法，其中，向细胞内导入的方法是通过静脉内施予该组合物来向细胞内导入的方法。(17)肝脏、肺、肾脏或脾脏相关疾病的治疗方法，包括将上述(13)所述的组合物施予至哺乳动物的步骤。本文档来自技高网...

【技术保护点】
式(A)、式(B)或式(C)表示的阳离子性脂质，式(A)中，R1为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，R2为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基乙基或炔氧基丙基，R3及R4相同或不同，为碳原子数1～3的烷基，或者连接在一起形成碳原子数2～8的亚烷基，或者R3与R5一起形成碳原子数2～8的亚烷基，R5为氢原子，碳原子数1～6的烷基，碳原子数3～6的链烯基，氨基，单烷基氨基，羟基，烷氧基，氨基甲酰基，单烷基氨基甲酰基，二烷基氨基甲酰基，或被相同或不同的1～3个氨基、单烷基氨基、羟基、烷氧基、氨基甲酰基、单烷基氨基甲酰基或二烷基氨基甲酰基取代的碳原子数1～6的烷基或碳原子数3～6的链烯基，或者与R3一起形成碳原子数2～8的亚烷基，X1为碳原子数1～6的亚烷基，X2为单键，或者为碳原子数1～6的亚烷基，其中，X1与X2的碳原子数之和为7以下，R5为氢原子时，X2为单键，R5与R3一起形成碳原子数2～6的亚烷基时，X2为单键，或者为亚甲基或亚乙基；式(B)中，R6为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，R7为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基乙基或炔氧基丙基；式(C)中，R8为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，R9为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基乙基或炔氧基丙基，X3为碳原子数1～3的亚烷基，R10为氢原子，或碳原子数1～3的烷基。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.07.06 JP 2012-152423;2013.04.25 JP 2013-092321.式(A)、式(B)或式(C)表示的阳离子性脂质，
式(A)中，R1为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或
者炔基，
R2为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，
烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基
乙基或炔氧基丙基，
R3及R4相同或不同，为碳原子数1～3的烷基，或者连接在一起形
成碳原子数2～8的亚烷基，或者R3与R5一起形成碳原子数2～8的亚烷
基，
R5为氢原子，碳原子数1～6的烷基，碳原子数3～6的链烯基，氨基，
单烷基氨基，羟基，烷氧基，氨基甲酰基，单烷基氨基甲酰基，二烷基
氨基甲酰基，或被相同或不同的1～3个氨基、单烷基氨基、羟基、烷氧
基、氨基甲酰基、单烷基氨基甲酰基或二烷基氨基甲酰基取代的碳原子
数1～6的烷基或碳原子数3～6的链烯基，或者与R3一起形成碳原子数
2～8的亚烷基，
X1为碳原子数1～6的亚烷基，
X2为单键，或者为碳原子数1～6的亚烷基，其中，X1与X2的碳原
子数之和为7以下，R5为氢原子时，X2为单键，R5与R3一起形成碳原
子数2～6的亚烷基时，X2为单键，或者为亚甲基或亚乙基；
式(B)中，R6为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或
者炔基，
R7为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，
烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基
乙基或炔氧基丙基；
式(C)中，R8为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或
者炔基，
R9为碳原子数8～24的直链状或支链状的烷基、链烯基或者炔基，
烷氧基乙基，烷氧基丙基，链烯基氧基乙基，链烯基氧基丙基，炔氧基
乙基或炔氧基丙基，
X3为碳原子数1～3的亚烷基，
R10为氢原子，或碳原子数1～3的烷基。
2.如权利要求1所述的阳离子性脂质，其中，R1、R2、R6、R7、
R8及R9独立地为十四烷基、十六烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳
-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-
十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳
-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基或
(Z)-二十二碳-13-烯基。
3.如权利要求1所述的阳离...

【专利技术属性】
技术研发人员：洼山刚之，江良公宏，直井智幸，八木香机，细江慎太郎，
申请(专利权)人：协和发酵麒麟株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP