本发明专利技术公开了从夜香树中提取多糖极其在预防或治疗肝纤维化中的应用。其特点在于：取夜香树全草，加10倍体积浸泡2h后水煎2h，真空泵减压抽滤，滤液经大孔吸附树脂D101，浓缩上清液后加三氯乙酸沉淀(按1∶5比例)，沉淀物加5倍体积的水，煮沸，冷却后过滤，滤液用60-80％乙醇沉淀，沉淀物反复加水煮和乙醇沉淀，最后得夜香树多糖(以下简称PCN)。动物实验结果表明，PCN干预CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型后可显著改善大鼠肝功能，降低血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、LN(层粘连蛋白)、Pc III(III型胶原)以及减少肝组织中HYP(羟脯氨酸)的含量，减轻肝细胞变性坏死，保护肝细胞的稳定性，从而促进肝细胞的增殖，具有良好的抗肝纤维化作用。此外夜香树多糖还具有具有毒性低、副作用小等优点，能够用于预防或治疗肝纤维化相关疾病。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了从夜香树中提取多糖极其在预防或治疗肝纤维化中的应用。其特点在于：取夜香树全草，加10倍体积浸泡2h后水煎2h，真空泵减压抽滤，滤液经大孔吸附树脂D101，浓缩上清液后加三氯乙酸沉淀(按1∶5比例)，沉淀物加5倍体积的水，煮沸，冷却后过滤，滤液用60-80％乙醇沉淀，沉淀物反复加水煮和乙醇沉淀，最后得夜香树多糖(以下简称PCN)。动物实验结果表明，PCN干预CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型后可显著改善大鼠肝功能，降低血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、LN(层粘连蛋白)、Pc III(III型胶原)以及减少肝组织中HYP(羟脯氨酸)的含量，减轻肝细胞变性坏死，保护肝细胞的稳定性，从而促进肝细胞的增殖，具有良好的抗肝纤维化作用。此外夜香树多糖还具有具有毒性低、副作用小等优点，能够用于预防或治疗肝纤维化相关疾病。【专利说明】夜香树多糖的提取及在预防或治疗肝纤维化中的应用
本专利技术属于医药领域，尤其涉及从夜香树中提取多糖极其在预防或治疗肝纤维化 中的应用。
技术介绍
当肝细胞发生坏死和炎症刺激，肝脏中细胞外基质的增生与降解失衡，过多细胞 外基质在肝内沉积，这一病理过程称为肝纤维化；如果肝小叶结构发生改变、而且出现假小 叶和结节形成，形成肝硬化。肝硬化致病因素很多种，如病毒性肝炎，慢性酒精中毒，寄生 虫，药物或化学毒物等。调查显示，我国乙型肝炎病毒携带超过1. 4亿人，慢性活动性肝炎 患者，大约有10%?15%可能在5?10年内发展为肝炎后肝硬化。因此，研究和开发廉价 预防和治疗肝硬化药物有重要意义。 目前，肝纤维化治疗效果不尽人意。在寻找安全有效的抗肝纤维化方法中，传统中 药由于副作用小，开发成本低成为近年来抗肝纤维化研究的热点。 近来研究表明，夜香树提取物对体外培养的肝癌、肺癌、胃癌、宫颈癌、神经性肿瘤 细胞株、黑色素瘤、白血病等肿瘤细胞均有不同程度的增值抑制作用。夜香树留体皂苷体内 能延缓S 18tl肉瘤和H22肝癌小鼠的瘤体生长，明显延长荷瘤小鼠的生存期，改善生活质量；能 抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长，机制可能与抑制肿瘤血管新生有关。 夜香树多糖是夜香树主要成分之一，专利技术人前期通过大量的夜香树提取物体内外 抗肿瘤作用及机制研究基础上，发现了夜香树多糖在预防或治疗肝纤维化中有较好的功 效。
技术实现思路
本专利技术的内容在于提供夜香树多糖在制备抗肝纤维化中的应用，其治疗效果好、 安全性高。 本专利技术提供如下技术方案： 夜香树多糖在制备预防或治疗肝纤维化的药物中的应用。 夜香树多糖在制备预防或治疗肝细胞脂肪变性、肝细胞坏死或/和肝纤维组织增 生的药物中的应用。此外，夜香树多糖还可以降低血清中谷丙转氨酶（ALT)、谷草转氨酶 (AST)、透明质酸（HA)、LN(层粘连蛋白）、Pc III (III型胶原）以及减少肝组织中HYP (羟 脯氨酸）的含量。 本专利技术中夜香树多糖可以采用文献报道的方法制得，优选为本专利技术的方法制备， 该方法不需要添加有害成分，具体为：取夜香树全草，加10倍体积浸泡2h后水煎2h，真空 泵减压抽滤，滤液经大孔吸附树脂D101，浓缩上清液后加三氯乙酸沉淀（按1 : 5比例）， 沉淀物加5倍体积的水，煮沸，冷却后过滤，滤液用60-80%乙醇沉淀，沉淀物反复加水煮和 乙醇沉淀，最后得夜香树多糖（以下简称CNP)。优选的，所述加水煎煮为加入相当于药材重 量5倍的水煎煮两次，每次2小时。 优选的，所述大孔吸附树脂DlOl纯化为将上清液加入活化的大孔吸附树脂DlOl 柱中，然后用相当于树脂重量5倍的蒸馏水洗脱。 优选的，所述乙醇沉淀的条件为在温度为0_8°C条件下静置12-48小时。 本专利技术的有益效果在于：本专利技术公开了夜香树多糖在制备抗肝纤维化的药物中的 应用，其治疗效果好，能够有效降低肝功能系列生化指标，降低肝细胞脂肪变性、肝细胞坏 死或/和肝纤维组织增生的发生，本专利技术不仅拓宽了夜香树多糖的应用范围，同时还提高 了夜香树多糖的市场价值，同时安全性好，在高剂量用药范围内未见急性毒性反应，因此本 专利技术为抗肝纤维化治疗提供了一种安全、高效的备选药物，利于满足临床治疗的多方面需 求。 【具体实施方式】 为了使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对夜香树多糖的抗肝纤 维化作用及其抗肝纤维化效果进行详细的描述。 实施例1 夜香树多糖的制备，具体步骤如下： 方法1 :称取2kg夜香树药材，加入相当于药材重量10倍的水浸泡2h后煎煮两次，每次 2小时，过滤，合并滤液，将滤液在转速为3000转/分条件下离心20分钟，收集上清液，将 上清液活化的大孔吸附树脂DlOl柱，然后用相当于树脂重量5倍的蒸馏水进行洗脱，收集 洗脱液，将洗脱液浓缩至相当于药材重量的1倍，然后加入乙醇至乙醇的体积分数为65%， (TC冷藏静置12小时，除去上清液，收集沉淀；向沉淀中加入相当于沉淀重量3倍的水，煮沸 10分钟，放置至室温（10?30°C )，过滤，收集滤液，向滤液中加入乙醇使乙醇体积分数为 65%，(TC冷藏静置12小时，除去上清液，收集沉淀，重复加水煮沸、乙醇沉淀步骤2次，得夜 香树多糖沉淀，干燥得夜香树多糖（PCN)。 方法2 :称取2kg夜香树药材，加入相当于药材重量10倍的水煎煮两次，每次2小 时，过滤，合并滤液，将滤液在转速为4000转/分条件下离心20分钟，收集上清液，将上清 液活化的大孔吸附树脂DlOl柱，然后用相当于树脂重量5倍的蒸馏水进行洗脱，收集洗脱 液，将洗脱液浓缩至相当于药材重量的2倍，然后加入乙醇至乙醇的体积分数为80%，8°C 冷藏静置48小时，除去上清液，收集沉淀；向沉淀中加入相当于沉淀重量5倍的水，煮沸 20分钟，放置至室温（10?30°C )，过滤，收集滤液，向滤液中加入乙醇使乙醇体积分数为 85%，8°C冷藏静置48小时，除去上清液，收集沉淀，重复加水煮沸和乙醇沉淀3次，得夜香 树多糖沉淀，干燥得夜香树多糖（PCN)。 本实施例制得的夜香树多糖纯度为85. 74%。 实施例2 一、夜香树多糖的抗肝纤维化作用 1、实验动物 选取雄性SPF级SD大鼠（由广西医科大学动物中心提供），体重为160?180g， 适应环境5天后随机分为6组，即正常组、模型组、阳性药物组（秋水仙碱）、夜香树多糖高、 中、低剂量组，每组10只。造模期间，模型组及给药组皮下注射四氯化碳原液（〇.5ml/100g) (首次按5ml/kg皮下注射，以后按3ml/kg皮下注射），正常组皮下注射相同体积的生理盐 水，每周2次，共12周。造模的同时灌胃给药，剂量分别为秋水仙碱组0. 2mg/kg，夜香树多 糖高、低剂量分别为36g/kg、18g/kg (以药材量计），对照组36g/kg (以药材量计），正常组 和模型组给予相应生理盐水，每天灌胃给药一次，共12周。实验结束后次日，腹腔注射20 % 乌拉坦使大鼠麻醉，腹主动脉抽血，30分钟后3000转/分离心标本分离血清。用10%甲醛 溶液固定肝组织。肝组织切片HE染色，纤维增生程度分为0-4级。 血清检测项目为谷本文档来自技高网...
【技术保护点】
从夜香树中提取多糖及其在预防或治疗肝纤维化中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：赵世元，
申请(专利权)人：赵世元，
类型：发明
国别省市：广西;45
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