一种从蛇毒中提取降纤酶的方法技术

技术编号:11270380 阅读:150 留言:0更新日期:2015-04-08 16:54
本发明专利技术公开了一种从蛇毒中提取降纤酶的方法。其特征在于包含以下步骤:蛇毒干粉的溶解、亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤纯化和冷冻干燥以得到降纤酶成品。本发明专利技术与现有技术相比,优点在于本发明专利技术采用多次层析能有效去除杂质,提高降纤酶的纯度,进而以较高的收率获得纯度高、活性好的降纤酶干粉,大大提高了产品的市场竞争力。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种从蛇毒中提取降纤酶的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)蛇毒干粉用含NaCl、EDTA的Tris‑HCl缓冲液溶解,离心去沉淀,得上清液;(2)亲和层析:用含NaCl的Tris‑HCl平衡液平衡Argmatin‑ Sepharose柱,上清液上柱后,用含NaCl、盐酸胍的Tris‑HCl缓冲液洗脱,洗脱液经超滤脱盐至无氯离子;(3)离子交换层析:将上述超滤脱盐后的溶液加NaCl和1mol/L Tris‑HCl稀释至一定浓度,上样于DEAE‑Sepharose Fast Flow柱,用含NaCl的Tris‑HCl平衡液冲洗,换用含不同浓度NaCl的Tris‑HCl洗脱液洗脱,紫外检测,收集酶活性部分,超滤浓缩;(4)凝胶过滤层析:将上述浓缩液上样于Sepharcyl S‑200凝胶柱,用含NaCl的Tris‑HCl缓冲液平衡,紫外检测仪检测并记录,洗脱酶活性峰,超滤后冷冻干燥,即得成品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘乃山于晓娜刘翠珍
申请(专利权)人:青岛康原药业有限公司
类型:发明
国别省市:山东;37

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