用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂及制备和检测方法技术

本发明专利技术提供了一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂及制备和检测方法；旨在提供一种检测灵敏度高，检测结果可靠的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，以及提供一种全程封闭推注式，避免溶液本身特殊的腥臭味对操作者的刺激，同时减短溶液接触空气的时间，避免快速氧化造成假阳性结果，充分保证检测结果准确性的检测方法；该用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，由下述重量百分数的组分制成：0.03％-2％的亚甲基蓝、5％-10％果糖、0.1％-1％抗坏血酸、1％-5％叶酸、40％二甲基亚砜、3％-5％乙酸-乙酸钠缓冲液、0.1％-1％表面活性剂，余量为纯化水。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供了一种；旨在提供一种检测灵敏度高，检测结果可靠的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，以及提供一种全程封闭推注式，避免溶液本身特殊的腥臭味对操作者的刺激，同时减短溶液接触空气的时间，避免快速氧化造成假阳性结果，充分保证检测结果准确性的检测方法；该用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，由下述重量百分数的组分制成：0.03％-2％的亚甲基蓝、5％-10％果糖、0.1％-1％抗坏血酸、1％-5％叶酸、40％二甲基亚砜、3％-5％乙酸-乙酸钠缓冲液、0.1％-1％表面活性剂，余量为纯化水。【专利说明】
本专利技术涉及一种检测试剂，具体地说，是一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂， 本专利技术还涉及该检测试剂的制备方法和检测方法。
技术介绍
目前，用于上皮组织进行细胞特殊染色的方法主要有醋酸白化反应、碘试验、以及 亚甲基蓝染色等。特殊染色液体外诊断疾病有很长的历史，是一种侵入式体外染色诊断方 法，广泛用于上皮组织等常规病变的初筛。 醋酸白化反应是通过3 % -5 %乙酸溶液，涂抹在上皮组织上，等待一段时间后观 察所涂抹的上皮组织有无白化反应，若有则被怀疑有肿瘤细胞，此方法特异性差，易造成假 阳。碘试验是基于糖原反应，特异性同样较低。 专利CN103808551A利用虹吸法将溶液储存于棉签杆中，运输过程中溶液易渗出 和氧化，使用时染色液流出缓慢，操作不便。 中国专利：2014100628449中提及调节染色液pH采用的是乙酸，我们研宄发现， 当乙酸的量达到3% -5%时，容易极易氧化，且pH值也下降到3左右，不符合该染色液 pH5. 0-6. 0的要求，若乙酸含量达不到3% -5%，就无法实现醋酸白化反应，不能实现棉签 染色与肿瘤组织醋酸白化反应双重定位。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术的目的在于提供一种检测灵敏度高，检测结果可靠的用于 上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，以及提供一种全程封闭推注式，避免溶液本身特殊的腥臭 味对操作者的刺激，同时减短溶液接触空气的时间，避免快速氧化造成假阳性结果，充分保 证检测结果准确性的检测方法。 为解决上述技术问题，本专利技术提供的第一技术方案是这样的： 该用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的试剂由下述重量百分数的组分制 成：0. 03% -2%的亚甲基蓝、5% -10%果糖、0. 1% -1%抗坏血酸、1% -5%叶酸、40%二甲 基亚砜、3% -5%乙酸-乙酸钠缓冲液、0. 1% -1 %表面活性剂，余量为纯化水。 进一步的，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的3%-5%乙酸-乙酸 钠缓冲液的pH值为5. 5 ±0. 5。 进一步的，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的表面活性剂为Tween-20。 为制备该检测试剂，本专利技术的另外一个技术方案是这样的： 上述用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的制备方法，依次包括下述步骤： 1)按权利要求1所述的重量百分数称取各个组分； 2)将步骤1)称取的叶酸溶入二甲基亚砜中，搅拌溶解； 3)将亚甲基蓝加入至步骤2)溶液中，搅拌溶解后继续搅拌40-80min; 4)将表面活性剂加入步骤3)溶液中，搅拌混匀； 5)将果糖和抗坏血酸和碱性水溶液加入至步骤4)溶液中再次搅拌溶解； 6)将乙酸-乙酸钠缓冲液按加入至步骤5)溶液中搅拌均匀即得。 为了更好的使用本专利技术，本专利技术还有一个技术方案是这样的： 上述用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方法，该方法检测时采用下述检测 组件取样后，棉签插入杆端部插接在装有权利要求1所述的检测试剂的试剂瓶的接入管端 部，倒置挤压瓶体，使检测试剂流向取样后的棉签头； 所述的检测组件包括一试剂瓶以及与试剂瓶配套使用的棉签，所述试剂瓶包括螺 纹状软瓶体，瓶体上设有柱状空心接入管，所述瓶体与接入管一体成型，所述棉签包括一空 心插入杆，插入杆的一端端部设有萌芦头状棉花头，所述插入杆的外径与接入管的内径相 同。 作为本专利技术的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方 法，所述的接入管上还设有密封接口端的瓶塞。 作为本专利技术的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方 法，所述的棉签外部还设有密封棉签的包装袋。 作为本专利技术的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方 法，所述的插入杆的长度160_220mm，直径3_6mm。 作为本专利技术的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方 法，所述的棉花头尖头直径为2. 5-3. 5mm，下半部分直径为7-12mm，下半部分与插入杆连 接。 与现有技术相比，本专利技术将还原性亚甲基蓝与叶酸结合在一起，通过叶酸受体介 导进入癌变细胞。通过染色和发生颜色变化而快速定位和检测上皮肿瘤细胞。本专利技术采 用的尖头萌芦形棉签，依据妇女宫颈解剖学结构设计；尖头可伸入宫颈口取样，取样面积更 大，能提高检出阳性率。使用密封塑料瓶储存染色液，运输方便，能与棉签巧妙地结合在一 起，全程封闭推注，相对于直接蘸取溶液，能避免溶液本身特殊的腥臭味对操作者的刺激； 同时减短溶液接触空气的时间，避免快速氧化造成假阳性结果，充分保证检测结果的准确 性。叶酸容易在酸性条件下析出，且当在碱性条件下还原亚甲基蓝时，亚甲基蓝难溶解，本 专利技术加入适量表面活性剂能促进各成分溶解，使反应更充分；并且将乙酸改为PH5. 0的乙 酸-乙酸钠缓冲液，能有效的解决这些问题。我们通过602例临床样本验证，以病理诊断为 金标准，本专利技术的染色液与TCT检查对比差异无统计学意义。 【专利附图】【附图说明】 图1是本专利技术提供的检测组件结构示意图； 图2是本专利技术检测组件组装状态示意图； 图3本专利技术检测组件使用状态示意图。 【具体实施方式】 下面结合【具体实施方式】对本专利技术的权利要求作进一步的详细说明，但本专利技术并不 限于此，任何人在本专利技术权利要求范围内所做的有限次的修改仍在本专利技术权利要求保护范 围之内。 实施例1 本专利技术一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的试剂由下述重量百分数的 组分制成：2g的亚甲基蓝、5g果糖、Ig抗坏血酸、Ig叶酸、40g二甲基亚砜、5gpH值为5. 5 乙酸-乙酸钠缓冲液、0.IgTween-20,余量为纯化水。 实施例2 本专利技术一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的试剂由下述重量百分数的 组分制成：〇. 03g的亚甲基蓝、IOg果糖、0.Ig抗坏血酸、5g叶酸、40g二甲基亚砜、3gpH值 为5. 5乙酸-乙酸钠缓冲液、IgTween-20,余量为纯化水。 实施例3 本专利技术一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的试剂由下述重量百分数的 组分制成：〇. 06g的亚甲基蓝、7g果糖、0. 5g的抗坏血酸、3g叶酸、40g二甲基亚砜、4gpH值 为5. 5乙酸-乙酸钠缓冲液、0. 5gTween-20,余量为纯化水。 实施例4 本专利技术一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的试剂由下述重量百分数的 组分制成：Ig的亚甲基蓝、8g果糖、0. 3g的抗坏血酸、2g叶酸、40g二甲基亚本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，其特征在于，所述的试剂由下述重量百分数的组分制成：0.03％‑2％的亚甲基蓝、5％‑10％果糖、0.1％‑1％抗坏血酸、1％‑5％叶酸、40％二甲基亚砜、3％‑5％乙酸‑乙酸钠缓冲液、0.1％‑1％表面活性剂，余量为纯化水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：汪艳涛，龚成，赵肃清，汤永平，潘秀华，张晓丽，
申请(专利权)人：广州市微米生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44