短抗微生物脂肽制造技术

本发明专利技术公开了具有生物活性及治疗活性的肽。具体公开了展现抗微生物活性的KPV或KdPT的脂化二肽或三肽类似物。具体而言，本发明专利技术的肽提供比基础三肽，赖氨酸-脯氨酸-缬氨酸及赖氨酸-d-脯氨酸-酪氨酸增强的抗微生物活性。所公开的肽具有通式C12-18脂质-KXZ-NH2，其中K是赖氨酸；X是脯氨酸、d-脯氨酸、组氨酸或精氨酸；Z是任选地且如果存在则Z是缬氨酸、苏氨酸、丙氨酸或亮氨酸；且末端COOH是NH2酰胺化的。该C12-18脂质优选是月桂酸(C12)、肉豆蔻酸(C14)、十五烷酸(C15)、棕榈酸(C16)或硬脂酸(C18)的脂质部分。本发明专利技术进一步涉及使用这些肽来治疗侵袭皮肤及其它相关粘膜体表(例如口腔)的多种损伤、发炎或细菌感染的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】短抗微生物脂肽本申请要求2012年3月20日提交的美国临时申请号61/613,212的优先权益，其通过引用整体并入本文。
本专利技术涉及具有生物活性及治疗活性的肽。具体而言，本专利技术涉及展现抗微生物活性的KPV或KdPT的脂化二肽或三肽类似物。具体而言，本专利技术的肽提供比基础三肽，赖氨酸-脯氨酸-缬氨酸和赖氨酸-d-脯氨酸-酪氨酸增强的抗微生物活性。本专利技术进一步涉及使用这些肽来治疗侵袭皮肤及其它相关体表(例如口腔)的多种损伤、发炎或细菌感染的方法。专利技术背景数十年来研究者一直致力于开发抗微生物治疗和试剂。最近，存在对用于治疗数目渐增的耐药性细菌、病毒及真菌感染的新的抗微生物剂的需求。在科学文献和已颁布专利二者中已报道多种生物活性肽。肽在历史上已从天然来源分离，且最近已成为结构-功能关系研究的对象。此外，天然肽已充当设计合成肽类似物的起点。有多个专利描述了含有短肽的化妆品组合物。例如，美国专利号6,492,326提出了含有五肽和皮肤护理活性成份的皮肤护理组合物的制备和用途。Strom等人2003(JournalofMedicinalChemistry46:1567-1570)描述含有化学修饰的抗细菌短肽，主要集中于极短肽(二聚体和三聚体)。也描述了某些六肽。然而，并未测试或讨论这些六肽的抗微生物活性。α-促黑激素(α-MSH)是具有有效抗炎活性的13-氨基酸神经肽。其是通过较大前体分子前阿黑皮素(pre-opiomelanocortin)的翻译后加工来产生。已证实α-MSH的羧基末端三肽(由残基11至13构成)KPV在体内和体外发挥抗炎活性(Brzoska,T.、Luger,TA.等人，α-melanocyte-stimulatinghormoneandrelatedtripeptides:biochemistry,anti-inflammatoryandprotectiveeffectsinvitroandinvivo,andfutureperspectivesforthetreatmentofimmune-mediatedinflammatorydiseases.EndocrineReviews2009.29(5):581-602)。已描述了结构相关衍生物KdPT(KPT)与IL-1β的残基193-195共线且似乎能够与IL-1I型受体相互作用(LugerT.A.及BrzoskaT.α-MSHrelatedpeptides:anewclassofanti-inflammatoryandimmunomodulatingdrugs.AnnRheumDis2007;66(增刊III):iii52-iii55)。有一篇报道提出，KPV对金黄色葡萄球菌(S.aureus)及白色念珠菌(C.albicans)具有抗微生物影响但并未确定MIC(CutuliM等人，2000,antimicrobialeffectsofα-MSHpeptides,J.LeukocyteBiology,67:233-239)。与KPV不同，从未报道KdPT三肽具有抗微生物影响。因此，本领域需要开发具有针对众多微生物(包含革兰氏(gram)阴性及革兰氏阳性细菌)的宽范围有效抗微生物活性的肽。抗微生物肽的制造成本对医药及化妆品应用而言也是关键考虑因素。我们在本专利技术中公开了有成本效益的抗微生物短肽，其可在医药或化妆品组合物中使用，用于局部治疗或管控与细菌及真菌感染相关的皮肤状况。
技术实现思路
本专利技术涉及展现抗微生物活性的KPV或KdPT的脂化二肽或三肽类似物。具体而言，本专利技术的肽提供比基础三肽赖氨酸-脯氨酸-缬氨酸及赖氨酸-d脯氨酸-酪氨酸增强的抗微生物活性。分离肽的目标抗细菌活性是针对那些侵袭皮肤及相关粘膜表面的细菌。尽管不欲限于任何具体机制，但本专利技术肽能够通过抑制细菌生长和抑制与细菌感染相关的发炎来促进皮肤健康。本专利技术的一个实施方案是关于以下通式的脂化二肽或三肽：C12-18脂质-KXZ-NH2，其中K是赖氨酸；X是脯氨酸、D-脯氨酸(脯氨酸的D-异构体)、组氨酸或精氨酸；Z是任选的，且如果存在则Z是缬氨酸、苏氨酸、丙氨酸或亮氨酸；且末端COOH经NH2酰胺化。该肽是经C12-18脂质脂化且优选是经以下酸的脂质部分：月桂酸(C12)、肉豆蔻酸(C14)、十五烷酸(C15)、棕榈酸(C16)或硬脂酸(C18)。十五烷酰基及棕榈酰基是最优选的脂质基团。优选的脂化二氨基酸及三氨基酸包含C12-18脂质-赖氨酸-脯氨酸-缬氨酸-NH2；C12-18脂质-赖氨酸-d-脯氨酸-苏氨酸-NH2；C12-18脂质-赖氨酸-脯氨酸-丙氨酸-NH2；C12-18脂质-赖氨酸-脯氨酸-亮氨酸-NH2；C12-18脂质-赖氨酸-脯氨酸-NH2；C12-18脂质-赖氨酸-d-脯氨酸-NH2；C12-18脂质-赖氨酸-组氨酸-NH2；及C12-18脂质-赖氨酸-精氨酸-NH2。本专利技术的另一实施方案是关于含有医药上或化妆品上可接受的载体和一或多种上述肽的组合物。这些组合物中的肽浓度优选介于约0.1μg/mL至约20μg/mL或约0.1μg/mL至约10%(w/v)范围内。适于局部应用的优选组合物形式是气溶胶、乳液、液体、水溶液、洗剂、乳霜、糊剂、软膏、粉剂及泡沫剂。本专利技术还涉及使用上述组合物来治疗或预防哺乳动物皮肤的微生物感染的方法。通常，治疗方法意味着向皮肤(表皮)及相关粘膜组织的受侵袭区域施用有效量的含肽组合物且保持有效时间量。当细菌感染是由选自痤疮丙酸杆菌(P.acnes)、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(E.coli)及白色念珠菌的细菌引起时也可使用这些方法。此外，本专利技术的肽及含有这些肽的组合物可提供纳入一般皮肤护理及化妆品制剂(例如各种皮肤化妆品、皮肤乳霜、洗剂、防晒剂及治疗性洗剂或乳霜(例如抗痤疮制剂))中的有用特征。专利技术详述为更充分理解本文所描述的本专利技术，进行以下详细描述。本专利技术一般性涉及包括以下通式的KPV或KdPT的抗微生物脂化二肽或三肽类似物的组合物及方法：C12-18脂质-KXZ-NH2，其中K是赖氨酸；X是脯氨酸、d-脯氨酸、组氨酸或精氨酸；Z是任选的，且如果存在则Z是缬氨酸、苏氨酸、丙氨酸或亮氨酸；且末端COOH经NH2酰胺化。可用来提供本专利技术化合物的C12-18脂质组份的饱和或不饱和脂肪酸的实例包含：系统名常用名简写名十二烷酸月桂酸12:0十四烷酸肉豆蔻酸14:0十六烷酸棕榈酸16:0十七烷酸珠光脂(曼陀罗)酸17:0十八烷酸硬脂酸18:09-顺-十四碳烯酸肉豆蔻油酸14:1(n−5)9-顺-十六碳烯酸棕榈油酸16:1(n−7)6-顺-十六碳烯酸Sapienicacid16:1(n−10)全顺-7,10,13-十六碳三烯酸16:3(n−3)9-顺-十八碳烯酸油酸18:1(n−9)全顺-9,12-十八碳二烯酸亚麻油酸18:2(n−6)α-促黑激素(α-MSH)是具有有效抗炎活性的13-氨基酸神经肽。其是通过较大前体分子前阿黑皮素的翻译后加工来产生。已证实α-MSH的羧基末端三肽(包括残基11至13)KPV在体内和体外发挥抗炎活性(Brzoska,T.、Luger,TA.等人，α-melanocyte-stimulatinghormonean本文档来自技高网...

【技术保护点】
式C12‑18脂质‑KXZ‑NH2的肽，其中K是赖氨酸；X是脯氨酸、d‑脯氨酸、组氨酸或精氨酸；Z是任选的，且如果存在则Z是缬氨酸、苏氨酸、丙氨酸或亮氨酸；且末端COOH经NH2酰胺化。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.03.20 US 61/6132121.包括下式中的至少一种肽和医药上可接受的载体的组合物在制备用于预防或治疗哺乳动物皮肤或粘膜组织的微生物感染的药物中的用途：C12-18脂质-赖氨酸-脯氨酸-NH2；或C12-18脂质-赖氨酸-d-脯氨酸-NH2。2.如权利要求1的用途，其中所述C12-18脂质是月桂酸(C12)、肉豆蔻酸(C14)、十五烷酸(C15)、棕榈酸(C16)或硬脂酸(C18)的脂质部分。3.如权利要求1或2的用途，其中所述肽是棕榈酰基-赖氨酸-脯氨酸-NH2；棕榈酰基-赖氨酸-d-脯...

【专利技术属性】
技术研发人员：L张，R卡迈克尔，
申请(专利权)人：赫里克斯生物医疗公司，
类型：发明
国别省市：美国;US