一种粉末状尿苷三磷酸的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种粉末状尿苷三磷酸的制备方法，所述方法包括步骤：将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和5-20倍体积的甲醇混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸；或包括步骤：（1）将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-20倍体积的第一有机溶剂混合，得到第一沉淀物；（2）将第一沉淀物和2-20倍体积的乙二醇或丙三醇混合，得到溶解液；和（3）将溶解液和2-20倍体积的第二有机溶剂混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，所述方法包括步骤：将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和5-20倍体积的甲醇混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸；或包括步骤：（1）将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-20倍体积的第一有机溶剂混合，得到第一沉淀物；（2）将第一沉淀物和2-20倍体积的乙二醇或丙三醇混合，得到溶解液；和（3）将溶解液和2-20倍体积的第二有机溶剂混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸。【专利说明】
本专利技术涉及核苷酸制备领域，尤其涉及。
技术介绍
尿苷三磷酸可用于防治肺炎，治疗窦炎、纤毛运动障碍、中耳炎及支气管炎等疾 病。另外，其衍生物：曲氟尿苷三磷酸酯，可抑制病毒和在较小程度上抑制DNA聚合酶，可以 用于SARS的辅助治疗；尿二磷葡萄糖临床上用于治疗中毒性及传染性肝炎。 目前，随着尿苷三磷酸及其衍生物等在医药领域应用范围的扩大，尿苷三磷酸的 市场需求量增加，对于稳定的粉末状尿苷三磷酸的需求尤其巨大。 因此，本领域迫切需要提供。
技术实现思路
本专利技术旨在提供有效、简便的粉末状尿苷三磷酸的制备方法。 本专利技术中，提供了，所述方法包括步骤：将含有 尿苷三磷酸的酸性溶液和5-20倍体积的甲醇混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸； 或所述方法包括步骤： ( 1)将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-20倍体积的第一有机溶剂混合，得到第一 沉淀物； (2)将第一沉淀物和2-20倍体积的乙二醇或丙三醇混合，得到溶解液；和 (3)将溶解液和2-20倍体积的第二有机溶剂混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸。 在另一优选例中，所述含有尿苷三磷酸的酸性溶液的pH为2. 0-6. 0 ;更佳地，所述 含有尿苷三磷酸的酸性溶液的pH为2. 5-5. 5。 在另一优选例中，所述含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-10倍体积的第一有机溶 剂混合；更佳地，含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-5倍体积的第一有机溶剂混合；最佳地， 含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-3倍体积的第一有机溶剂混合。 在另一优选例中，将溶解液和2-10倍体积的第二有机溶剂混合；更佳地，将溶解 液和3-10倍体积的第二有机溶剂混合；最佳地，将溶解液和3-7倍体积的第二有机溶剂混 合。 在另一优选例中，所述含有尿苷三磷酸的酸性溶液通过下述步骤制备得到： (a)将尿苷一磷酸和酶液混合，得到尿苷三磷酸转化液；和 (b)将尿苷三磷酸转化液经纳滤除盐后通过柱层析得到含有尿苷三磷酸的酸性溶 液。 在另一优选例中，步骤（a)中所述的酶液是将啤酒酵母和含有酶激活剂、葡萄糖的 磷酸缓冲液混合，经发酵、分离而制得。 本专利技术提供的上述制备方法中，所述第一有机溶剂选自下述的一种或一种以上： 90%-100%乙醇、丙酮、正丙醇、异丙醇；所述第二有机溶剂选自下述的一种或一种以上：无 水乙醇、甲醇、90%-100%乙醇（除无水乙醇外)、正丙醇、异丙醇、丙酮。 据此，本专利技术提供了。 【专利附图】【附图说明】 图1显示了实施例9-19获得的产品的形态。 【具体实施方式】 专利技术人经过广泛而深入的研究，意外地发现使用甲醇可以通过一次性沉淀得到粉 末状的尿苷三磷酸；或者使用乙醇等其它有机溶剂先进行一次沉淀，然后用丙三醇或乙二 醇将沉淀溶解，再用乙醇等进行第二次沉淀便能够得到粉末状尿苷三磷酸。在此基础上，完 成了本专利技术。 本专利技术提供，所述方法有两种实施方案： 第一种是将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和5-20倍体积的甲醇混合、沉淀，得到粉 末状尿苷三磷酸； 第二种实施方案包括步骤： 第一步，将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-20倍体积的第一有机溶剂混合，得到 第一沉淀物； 第二步，将第一沉淀物和2-20倍体积的乙二醇或丙三醇混合，得到溶解液； 第三步，将溶解液和2-20倍体积的第二有机溶剂混合、沉淀，得到粉末状尿苷三 磷酸。 本专利技术提供的粉末状尿苷三磷酸的制备方法中所述的含有尿苷三磷酸的酸性溶 液的pH为2. 0-6. 0 ;较佳地，pH为2. 5-5. 5 ;更佳地，pH为3. 0-5. 0。 在上述第一种实施方案中，较佳地，所述含有尿苷三磷酸的酸性溶液和5-15倍体 积的甲醇混合；更佳地，含有尿苷三磷酸的酸性溶液和5-10倍体积的甲醇混合；最佳地，含 有尿苷三磷酸的酸性溶液和5-7倍体积的甲醇混合。 在上述第二种实施方案的第一步中，较佳地，所述含有尿苷三磷酸的酸性溶液和 2-10倍体积的第一有机溶剂混合；更佳地，含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-5倍体积的第 一有机溶剂混合；最佳地，含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2-3倍体积的第一有机溶剂混合。 在上述第二种实施方案的第二步中，较佳地，将溶解液和2-10倍体积的第二有机 溶剂混合；更佳地，将溶解液和3-10倍体积的第二有机溶剂混合；最佳地，将溶解液和3-7 倍体积的第二有机溶剂混合。 在上述第二种实施方案中，当第二步中使用乙二醇时，第一步中所述第一有机溶 剂选自体积百分比为90%_100%的乙醇水溶液，第三步中所述第二有机溶剂选自下述的一 种或一种以上：无水乙醇、甲醇、体积百分比为90%_100%的乙醇水溶液（除无水乙醇外)、正 丙醇、异丙醇、丙酮；第一步中所述第一有机溶剂选自下述的一种或一种以上：正丙醇、异 丙醇、丙酮，第三步中所述第二有机溶剂选自下述的一种或一种以上：无水乙醇、甲醇、正丙 醇、异丙醇、丙酮。 在上述第二种实施方案中，当第二步中使用丙三醇时，第一步中所述第一有机溶 剂选自下述的一种或一种以上：体积百分比为90%-100%的乙醇水溶液、正丙醇、异丙醇、丙 酮，第三步中所述第二有机溶剂选自无水乙醇和/或甲醇。 经本专利技术提供的上述方法制备得到的粉末状尿苷三磷酸还可经过本领域常用的 方法进行干燥处理，比如抽滤干燥、真空干燥等。 本专利技术提供的粉末状尿苷三磷酸制备方法中涉及的含有尿苷三磷酸的酸性溶液 可以通过本领域已有的方法获得，也可以通过下述步骤制备得到： 先将尿苷酸原料，利用发酵啤酒酵母获得酶促转化反应所需要的酶，经酶促反应 得到尿苷三磷酸转化液；然后将所述的尿苷三磷酸转化液经纳滤除盐和分离纯化得到含有 尿苷三磷酸的酸性溶液。 在本专利技术的一个实施例中，尿苷一磷酸作为原料，以选用高纯度为佳，如HPLC纯 度在90%以上；所述UMP的投料量为每升酶液中投入6 - 24gUMP (折纯)。 在本专利技术的一个实施例中，上述酶促转化反应所需酶的提取方式为将经冷库冷 冻的啤酒酵母，加入到含有酶激活剂、葡萄糖的磷酸缓冲液中，经发酵、分离而制得；较佳 地，将经冷库冷冻的啤酒酵母（200 - 400g/L)，加入到含有酶激活剂（氯化镁：0. 01 - 0? 05mol/L)、葡萄糖（0? 3 - 0? 5mol/L)的磷酸缓冲液（0? 2 - 0? 4mol/L)中，经发酵、分离而 制得。 在本专利技术的一个实施例中，采用HPLC法跟踪判定转化反应终点，转化率应在70% 以上；较佳地，得到的尿苷三磷酸转化液为除去酸性蛋白等杂质，采用酸终止方法，如加入 盐酸调节PH至2.0 - 3.0,过滤分离后，再采用碱处理法，除去碱性蛋白等杂质本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种粉末状尿苷三磷酸的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和5‑20倍体积的甲醇混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸；或包括步骤：（1）将含有尿苷三磷酸的酸性溶液和2‑20倍体积的第一有机溶剂混合，得到第一沉淀物；（2）将第一沉淀物和2‑20倍体积的乙二醇或丙三醇混合，得到溶解液；和（3）将溶解液和2‑20倍体积的第二有机溶剂混合、沉淀，得到粉末状尿苷三磷酸。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王宏，傅得响，
申请(专利权)人：杭州美亚药业有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33