一种亮叶冬青的组培快速繁殖方法技术

本发明专利技术公开了一种亮叶冬青的组培快速繁殖方法，包括无菌顶芽的获得、丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根培养、炼苗等步骤。采用本发明专利技术所提供的组培技术方法对亮叶冬青进行组培微繁，解决了亮叶冬青污染率高，繁殖率低等技术难题，达到了增殖系数好，成活率高的要求，可以为亮叶冬青的产业化生产提供一种周期短的人工培育方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，包括无菌顶芽的获得、丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根培养、炼苗等步骤。采用本专利技术所提供的组培技术方法对亮叶冬青进行组培微繁，解决了亮叶冬青污染率高，繁殖率低等技术难题，达到了增殖系数好，成活率高的要求，可以为亮叶冬青的产业化生产提供一种周期短的人工培育方法。【专利说明】
本专利技术涉及，属于生物
。
技术介绍
\冬着，Ilex nitidissima C.J.冬青科,常绿小乔木,产于中国江西东北部、湖南南部和广西东北部及南部，高可达6米；叶片革质，背面具腺点或无，先端尾状渐尖；花序簇生，雄花序的每个分枝具3花，雌花序的每个分枝具I花，稀具2?5花；花4基数，稀5或6基数；败育子房球形或垫状，具短喙；果球形，直径约5毫米，成熟时，红色，具隆起的条纹，内果皮革质。果期7?10月。生于海拔960?1250米的山坡密林、疏林或杂木林中。为冬青科植物亮叶冬青的根叶。树皮含树脂。功效:凉血解毒、通络止痛。主治:治热毒疮肿、痢疾、跌扑闪挫、瘀血作痛、风湿热痹。性味归经:苦、微辛，凉，入心、肝二经，目前主要采用常规栽植，组培方法可以快速获得大量的亮叶冬青幼苗，保持遗传性状的稳定性，克服地域的局限性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供，由该方法所制备得到的亮叶冬青达到了增殖系数好，成活率高的要求，可以为其产业化生产提供一种周期短的人工培育方法。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:取亮叶冬青顶芽，剪去多余叶片，保留一小叶，用毛刷去除污垢，加入漂白粉浸泡3分钟，流水冲洗0.5小时，使用10%安替福民溶液处理6min，无菌水冲洗5_7遍，切去切口，获得的无菌芽接种入B5+NAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+2,4-D0.lmg/L+300Pg/g节氨进行丛生芽诱导，培养条件采用8001x弱光强下培养，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度25°C，光期8h，暗期16h，诱导出来的亮叶冬青丛生芽转接于B5+6-BAl.5mg/L+IBA0.lmg/L进行丛生芽增殖培养，培养条件为光照20001x，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度27°C，光期12h，暗期12h，增殖的丛生芽处理后接入含1/2 B5+IBA0.05mg/L+ACl.0g/L的培养基中进行生根诱导，培养条件光照60001x,光期16h,暗期8h,长约5cm的试管苗取出栽植于伯爵泥岩525#:蛭石=3:2的基质中，三周后喷施叶面肥，湿度85%，温度25°C，遮盖两层薄膜，透光率保持在35%左右。 采用本专利技术制备的亮叶冬青组培幼苗生产周期短、繁殖率高，生根率92%。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1取亮叶冬青顶芽，剪去多余叶片，保留一小叶，用毛刷去除污垢，加入漂白粉浸泡3分钟，流水冲洗0.5小时，使用10%安替福民溶液处理6min，无菌水冲洗5_7遍，切去切口，获得的无菌芽接种入B5+NAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+2,4-D0.lmg/L+300Pg/g节氨进行丛生芽诱导，培养条件采用8001x弱光强下培养，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度25°C，光期8h，暗期16h，诱导出来的亮叶冬青丛生芽转接于B5+6-BAl.0mg/L+IBA0.05mg/L进行丛生芽增殖培养，培养条件为光照20001x，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度27°C，光期12h，暗期12h，增殖的丛生芽处理后接入含1/2 B5+IBA0.05mg/L+AC0.5g/L的培养基中进行生根诱导，培养条件光照60001x，光期16h，暗期8h，长约5cm的试管苗取出栽植于伯爵泥岩525#:蛭石=3:2的基质中，三周后喷施叶面肥，湿度85%，温度25°C，遮盖两层薄膜，透光率保持在35%左右，生根率为86%。 实施例2取亮叶冬青顶芽，剪去多余叶片，保留一小叶，用毛刷去除污垢，加入漂白粉浸泡3分钟，流水冲洗0.5小时，使用10%安替福民溶液处理6min，无菌水冲洗5_7遍，切去切口，获得的无菌芽接种入B5+NAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+2,4-D0.lmg/L+300Pg/g节氨进行丛生芽诱导，培养条件采用8001x弱光强下培养，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度25°C，光期8h，暗期16h，诱导出来的亮叶冬青丛生芽转接于B5+6-BAl.5mg/L+IBA0.lmg/L进行丛生芽增殖培养，培养条件为光照20001x，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度27°C，光期12h，暗期12h，增殖的丛生芽处理后接入含1/2 B5+IBA0.05mg/L+ACl.5g/L的培养基中进行生根诱导，培养条件光照60001x,光期16h,暗期8h,长约5cm的试管苗取出栽植于伯爵泥岩525#:蛭石=3:2的基质中，三周后喷施叶面肥，湿度85%，温度25°C，遮盖两层薄膜，透光率保持在35%左右，生根率为87%。 实施例3取亮叶冬青顶芽，剪去多余叶片，保留一小叶，用毛刷去除污垢，加入漂白粉浸泡3分钟，流水冲洗0.5小时，使用10%安替福民溶液处理6min，无菌水冲洗5_7遍，切去切口，获得的无菌芽接种入B5+NAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+2,4-D0.lmg/L+300Pg/g节氨进行丛生芽诱导，培养条件采用8001x弱光强下培养，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度25°C，光期8h，暗期16h，诱导出来的亮叶冬青丛生芽转接于B5+6-BAl.5mg/L+IBA0.05mg/L进行丛生芽增殖培养，培养条件为光照20001x，蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH值5.8，温度27°C，光期12h，暗期12h，增殖的丛生芽处理后接入含1/2 B5+IBA0.05mg/L+ACl.0g/L的培养基中进行生根诱导，培养条件光照60001x，光期16h，暗期8h，长约5cm的试管苗取出栽植于伯爵泥岩525#:蛭石=3:2的基质中，三周后喷施叶面肥，湿度85%，温度25°C，遮盖两层薄膜，透光率保持在35%左右，生根率为89%。【权利要求】1.，其步骤如下: (I)无菌顶芽的获得:取幼嫩的亮叶冬青顶芽，对其进行消毒处理； (2 )芽诱导培养:将步骤(I)获得的无菌芽接种入Β5+ΝΑΑ0.lmg/L+KT0.5mg/L+2，4-D0.lmg/L+300Pg/g节氨进行丛生芽诱导； (3)丛生芽增殖培养:步骤(2)中诱导出来的亮叶冬青丛生芽转接于B5+6-BAl-l.5mg/L+IBA0.lmg/L进行丛生芽增殖培养； (4)生根诱导:将步骤(3)增殖的丛生芽处理后接入含1/2B5+IBA0.05-0.1mg/L+AC0.5-1.5g/L的培养基中进行生根诱导； (5)炼苗:将生根后的试管苗栽植于苗床上，一个月后统计成活率。2.根据权利要求1所述的，其特征在于:亮叶冬青顶芽的消毒方法为取亮叶冬青顶芽，剪去多余叶片，保留一小叶，用毛刷去除污垢，加入漂白粉浸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种亮叶冬青的组培快速繁殖方法，其步骤如下：（1）无菌顶芽的获得：取幼嫩的亮叶冬青顶芽，对其进行消毒处理；（2）芽诱导培养：将步骤（1）获得的无菌芽接种入B5+NAA0.1mg/L+KT0.5mg/L+2，4‑D0.1mg/L+300µg/g苄氨进行丛生芽诱导；（3）丛生芽增殖培养：步骤（2）中诱导出来的亮叶冬青丛生芽转接于B5+6‑BA1‑1.5mg/L+IBA0.1mg/L进行丛生芽增殖培养；（4）生根诱导：将步骤（3）增殖的丛生芽处理后接入含1/2 B5+IBA0.05‑0.1mg/L+AC0.5‑1.5g/L的培养基中进行生根诱导；（5）炼苗：将生根后的试管苗栽植于苗床上，一个月后统计成活率。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨存，
申请(专利权)人：南京通泽农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32