一种炙甘草诱变育种的快速繁殖方法技术

本发明专利技术研究了一种炙甘草诱变育种的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变、愈伤组织的分化、生根诱导等步骤，本发明专利技术方法通过对炙甘草愈伤组织的诱変处理，可获得分化率高、代谢产物含量高的优良品株，为炙甘草的研究提供技术基础。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术研究了，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变、愈伤组织的分化、生根诱导等步骤，本专利技术方法通过对炙甘草愈伤组织的诱変处理，可获得分化率高、代谢产物含量高的优良品株，为炙甘草的研究提供技术基础。【专利说明】
本专利技术涉及炙甘草组织培养的快繁方法，属于植物栽培
。
技术介绍
炙甘草，Glycyrrhizae.，豆科，多年生草本，根与根状茎粗状，直径1-3厘米，外皮褐色，里面淡黄色，具甜味。茎直立，多分枝，高30-120厘米，密被鳞片状腺点、刺毛状腺体及白色或褐色的绒毛，叶长5-20厘米；托叶三角状披针形，长约5毫米，宽约3毫米，两面密被白色短柔毛；叶柄密被褐色腺点和短柔毛；小叶5-17枚，卵形、长卵形或近圆形，长1.5-5厘米，宽0.8-3厘米，上面暗绿色，下面绿色，两面均密被黄褐色腺点及短柔毛，顶端钝，具短尖，基部圆，边缘全缘或微呈波状，多少反卷。甘草常生于干旱沙地、河岸砂质地、山坡草地土壤中。产东北、华北、西北各省区。蒙古及俄罗斯西伯利亚地区也有。炙甘草含有甘草甜素、甘草次酸、甘草多糖等多种化学成分，具有抗炎及抗变态反应作用，可调节机体免疫功能，抗肿瘤和止痛作用。因此炙甘草的主要功效是和中缓急，润肺，解毒，调和诸药。常用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心动悸，脉结代，可解附子毒。主要是种子繁殖和根状茎等常规的繁殖方法，诱变育种结合组培技术可以获得更高产更优良的炙甘草幼苗。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供，本专利技术方法通过对炙甘草愈伤组织的诱変处理，可获得分化率高、代谢产物含量高的优良品株，为炙甘草的研究提供技术基础。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:选取炙甘草新抽的叶片洗去表面污垢，1%的溴水溶液处理6min，无菌水冲洗干净，消毒处理过的炙甘草叶片切成0.5 X 0.5的小块，接种到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度22±2°C，培养出来的愈伤组织进行20-80Gy3X 14Li+束照射，培养出来的愈伤组织接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培养基中进行愈伤组织的分化诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度24±2°C，光强60001x，光照时间10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培养基中进行生根诱导，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度25±2°C，光强160001x，光照时间14h/d。 采用本专利技术制备的炙甘草诱变率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1选取炙甘草新抽的叶片洗去表面污垢，1%的溴水溶液处理6min，无菌水冲洗干净，消毒处理过的炙甘草叶片切成0.5 X 0.5的小块，接种到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度22±2°C，培养出来的愈伤组织进行20Gy3X 14Li+束照射，培养出来的愈伤组织接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培养基中进行愈伤组织的分化诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度24±2°C，光强60001x，光照时间10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培养基中进行生根诱导，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度25±2°C，光强160001x，光照时间14h/d，诱变生根率89%。 实施例2选取炙甘草新抽的叶片洗去表面污垢，1%的溴水溶液处理6min，无菌水冲洗干净，消毒处理过的炙甘草叶片切成0.5 X 0.5的小块，接种到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度22±2°C，培养出来的愈伤组织进行40Gy3X 14Li+束照射，培养出来的愈伤组织接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培养基中进行愈伤组织的分化诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度24±2°C，光强60001x，光照时间10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培养基中进行生根诱导，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度25±2°C，光强160001x，光照时间14h/d，诱变生根率90%。 实施例3选取炙甘草新抽的叶片洗去表面污垢，1%的溴水溶液处理6min，无菌水冲洗干净，消毒处理过的炙甘草叶片切成0.5 X 0.5的小块，接种到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度22±2°C，培养出来的愈伤组织进行80Gy3X 14Li+束照射，培养出来的愈伤组织接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培养基中进行愈伤组织的分化诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度24±2°C，光强60001x，光照时间10h/d，分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培养基中进行生根诱导，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度25±2°C，光强160001x，光照时间14h/d，诱变生根率95%。【权利要求】1.，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变、愈伤组织的分化、生根诱导，其主要步骤如下: (1)取炙甘草幼嫩的叶片，进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的炙甘草叶片切成0.5X0.5的小块，接种到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BAl.0mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.86，温度 22±2°C ; (3)取步骤(2)培养出来的愈伤组织进行20-80Gy3X14Li+束照射； (4)取步骤(3)培养出来的愈伤组织接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.lmg/L培养基中进行愈伤组织的分化诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度24±2°C，光强60001x，光照时间10h/d ； (5)取步骤(4)分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培养基中进行生根诱导，附加蔗糖 50g/L，琼脂 6.5g/L，ρΗ5.86，温度 25±2。。，光强 160001χ，光照时间 14h/d。2.按照权利要求1所述的，其特征在于:步骤(O中炙甘草叶片的消毒方法为选取炙甘草新抽的叶片洗去表面污垢，1%的溴水溶液处理6min,无菌水冲洗干净。【文档编号】A本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种炙甘草诱变育种的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变、愈伤组织的分化、生根诱导，其主要步骤如下：（1）取炙甘草幼嫩的叶片，进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的炙甘草叶片切成0.5×0.5的小块，接种到MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6‑BA1.0mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度22±2℃；（3）取步骤（2）培养出来的愈伤组织进行20‑80Gy3×104Li+束照射；（4）取步骤（3）培养出来的愈伤组织接入MT+TDZ0.02mg/L+NAA0.5mg/L+6‑BA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的分化诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度24±2℃，光强6000lx，光照时间10h/d；（5）取步骤（4）分化后的芽苗接入1/2MT+IBA0.3mg/L的培养基中进行生根诱导，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.86，温度25±2℃，光强16000lx，光照时间14h/d。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京帝道农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32