基于TALEN和pMD18载体的定点突变系统及应用技术方案

本发明专利技术涉及基于TALEN和pMD18载体的定点突变系统及应用，由核酸酶TALEN和pMD18载体组成，核酸酶TALEN为剪切目的基因靶序列的转录激活子样效应因子，TALEN由识别所述靶序列5’端的核酸酶TALEN-L和识别所述靶序列3’端的核酸酶TALEN-R组成；pMD18载体为插入人类AR定点突变基因的pMD18同源重组模板质粒，pMD18载体由靶基因的相应上下游序列和嘌呤霉素筛选标记组成。本发明专利技术使细胞基因组在TALEN切断双链DNA分子时，利用pMD18载体提供的同源序列，高效精确地对基因组进行编辑；采用导入同源序列以重新编辑DNA序列的同时，带入嘌呤霉素抗性基因，从而大大简化筛选过程中的人工劳动。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基于TALEN和pMD18载体的定点突变系统，其特征在于：由核酸酶TALEN和pMD18载体组成，所述核酸酶TALEN为剪切目的基因靶序列的转录激活子样效应因子，TALEN由识别所述靶序列5’端的核酸酶TALEN‑L和识别所述靶序列3’端的核酸酶TALEN‑R组成；所述pMD18载体为插入人类AR定点突变基因的pMD18同源重组模板质粒，pMD18载体由靶基因的相应上下游序列和嘌呤霉素筛选标记组成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋春娇，茹国美，郎娟，郭艳，张林，
申请(专利权)人：绍兴市人民医院，
类型：发明
国别省市：浙江;33