本发明专利技术公开了来源于大豆的干旱诱导启动子GmMYB363P及其应用。GmMYB363P，是如下a）、b）或c）的DNA分子：a）核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA分子；b）与a）限定的核苷酸序列具有75%或75%以上一致性，且具有启动子功能的DNA分子；c）在高严谨条件下与a）或b）限定的核苷酸序列杂交，且具有启动子功能的DNA分子。GmMYB363P为干旱诱导型启动子。利用GmMYB363P可以使基因在干旱诱导条件下表达，因而避免了组成型启动子过量表达带来的负作用—产生大量的异源蛋白和有毒物质。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了来源于大豆的干旱诱导启动子GmMYB363P及其应用。GmMYB363P，是如下a）、b）或c）的DNA分子：a）核苷酸序列是SEQ?ID?No.1的DNA分子；b）与a）限定的核苷酸序列具有75%或75%以上一致性，且具有启动子功能的DNA分子；c）在高严谨条件下与a）或b）限定的核苷酸序列杂交，且具有启动子功能的DNA分子。GmMYB363P为干旱诱导型启动子。利用GmMYB363P可以使基因在干旱诱导条件下表达，因而避免了组成型启动子过量表达带来的负作用—产生大量的异源蛋白和有毒物质。【专利说明】来源于大豆的干旱诱导启动子GmMYB363P及其应用
本专利技术涉及来源于大豆的干旱诱导启动子GmMYB363P及其应用。
技术介绍
启动子（Promoter)是基因组基因的一个重要组成部分，它像"开关"一样，在转录 水平上基本决定其控制下的编码基因是否表达、何时表达、何处表达和表达强度。一般根据 启动子作用方式和功能将其大体可以分为三大类：组成型启动子、特异性启动子和诱导型 启动子。组成型启动子（Constitutive promoter)是指能够驱使其控制下的编码基因在不 同器官和/或组织大体恒定表达的一类启动子。它的特点是：受其控制的编码基因的表达 具有持续性，但不具有时空特异性；RNA和蛋白质表达量相对恒定，不受外界因素的诱导。 诱导型启动子（Inducible promoter)是指能够响应某些特定的物理、化学和生物信号（统 称为"诱导子"或"诱导因子")而驱动其控制的编码基因大幅度地增加转录水平的一类启动 子。诱导型启动子常常根据其诱导信号来分类和命名，例如：真菌诱导启动子、共生细菌诱 导启动子、化学诱导启动子、金属离子诱导启动子、光诱导启动子、热诱导启动子和创伤诱 导启动子等。器官和/或组织特异性启动子（〇rgan-and/or Tissue-specific promoter), 能够驱使其控制下的编码基因仅仅在生物体的某一或某些特定的器官和/或组织，或者仅 仅在生长发育的某一或某些特定阶段表达的一类基因。它的特征为，受其控制或调节的基 因表达具有明显的时空性，并往往表现出发育调节的特性。例如，植物上的根特异性启动 子、叶片特异性启动子、花特异性启动子、气孔特异性启动子、气孔绒毡层特异性启动子、花 粉特异性启动子、果实特异性启动子、种子特异性启动子、胚乳特异性启动子、棉花纤维特 异性启动子和韧皮部特异性启动子等等。 在自然环境中，植物生长在开放的系统中，经常会遇到冷、热、旱、涝、盐碱、大气 污染等不良环境的影响。不良环境作用于植物，将会引起植物体内发生一系列的生理代谢 反应，表现为代谢和生长的可逆性抑制，严重时甚至引起不可逆伤害，导致整个植株死亡。 在各种环境胁迫中，干旱、低温、高热和高盐等非生物胁迫对植物的影响尤为突出，表现为 不同程度地对植物体内水分状况的影响，因此又成为水分胁迫，是制约植物生长和农作物 产量的最主要非生物性逆境因子。植物在长期的进化中，逐渐形成了一系列应答逆境胁迫 的生理、代谢以及防御系统。从植物中克隆非生物逆境诱导启动子将为提高植物对非生物 胁迫的抗性奠定物质基础。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供植物受干旱诱导启动子。 本专利技术所提供的启动子，名称为GmMYB363P，来源于大豆，是如下a)、b)或c)的DNA 分子： a)核苷酸序列是SEQ ID No. 1的DNA分子； b)与a)限定的核苷酸序列具有75%或75%以上一致性，且具有启动子功能的DNA 分子； c)在高严谨条件下与a)或b)限定的核苷酸序列杂交，且具有启动子功能的DNA 分子。 其中，SEQ ID No. 1由1384个核苷酸组成。 上述75%或75%以上一致性，可为80%、85%、90%、95%以上的一致性。 所述高严谨条件是指，将杂交膜置于预杂交液（〇. 25mol/L磷酸钠缓冲液，pH7. 2， 7%SDS)中，65°C预杂交30min ;弃预杂交液，加入杂交液（0. 25mol/L磷酸钠缓冲液，pH7. 2， 7%SDS，同位素标记的核苷酸片段)，65°C杂交12hr ;弃杂交液，加入洗膜液I (20mmol/L磷酸 钠缓冲液，PH7. 2, 5%SDS)，65°C洗膜2次，每次30min ;加入洗膜液II (20mmol/L磷酸钠缓冲 液，ρΗ7· 2,1%SDS)，65°C洗膜 30min。 本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方 法，对本专利技术的启动子核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本专利技术分离得 到的启动子核苷酸序列70%或者更高同源性的核苷酸，只要保持了表达靶基因的启动子活 性，均是衍生于本专利技术的核苷酸序列并且等同于本专利技术的序列。 这里使用的术语"同源性"指与天然核酸序列的序列相似性。"同源性"包括与本 专利技术的启动子核苷酸序列具有优选地75%或更高，更优选地85%或更高，甚至更优选地90% 或更高，以及最优选地95%或更高同一性的核苷酸序列。同源性可以用肉眼或计算机软件 进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同源性可以用百分比（％)表示，其可以 用来评价相关序列之间的同源性。 含有GmMYB363P的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系也属于本专利技术 的保护范围。 所述含有GmMYB363P的表达盒，是指能够在宿主细胞中表达目的基因的DNA， 该DNA不但包括启动所述目的基因的GmMYB363P，还可包括终止所述目的基因转录的 终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。所述转录终止子包括但不限于：农 杆菌胭脂碱合成酶终止子（N0S终止子)、花椰菜花叶病毒CaMV35S终止子、tml终止子、 豌豆rbcS E9终止子和胭脂氨酸和章鱼氨酸合酶终止子（参见，例如：0dell等人（I985) Nature 313:810 ;Rosenberg 等人（1987)Gene, 56:125 ;Guerineau 等人（1991)Mol. Gen. Genet, 262:141;Proudfoot(1991)Cell, 64:671;Sanfacon 等人 Genes Dev.，5:141;Mogen 等人（1990)卩13拉〇611，2:1261以11111'〇6等人（1990)66116,91:151;83113(1等人（1989) Nucleic Acids Res. 17:7891 Joshi 等人（1987)Nucleic Acid Res.，15:9627)。 所述的含有GmMYB363P的重组载体具体可为用SEQ ID No. 1的第1-1384位所示 的启动子GmMYB363P替换pCAMBIA-1301的Hind III和Bgl II之间片段得到的⑶S基因重 组表达载体pCAMBIA-1301-GmMYB363P-⑶S。所述重组微生物具体可为细菌，酵母，藻和 真菌。其中，细菌可来自埃希氏菌属（Escherichia),欧文氏菌（Erwinia),根癌农杆菌属 (Agrobacteriu本文档来自技高网...
【技术保护点】
如下a）、b）或c）的DNA分子：a）核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA分子；b）与a）限定的核苷酸序列具有75%或75%以上一致性，且具有启动子功能的DNA分子；c）在高严谨条件下与a）或b）限定的核苷酸序列杂交，且具有启动子功能的DNA分子。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张劲松，陈受宜，李擎天，马彪，刘云峰，张万科，林晴，何锶洁，
申请(专利权)人：中国科学院遗传与发育生物学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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