在哺乳动物个体中检测5T4阳性循环肿瘤细胞的方法和诊断5T4阳性癌症的方法技术

提供了检测哺乳动物个体中5T4阳性循环肿瘤细胞的方法。提供了诊断哺乳动物个体中5T4阳性癌症的方法。检测或诊断方法表明存在5T4阳性转移性癌症或早期5T4阳性癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在哺乳动物个体中检测5T4阳性循环肿瘤细胞的方法和诊断5T4阳性癌症的方法
本专利技术大体上涉及检测哺乳动物个体的5T4阳性循环肿瘤细胞的方法，以及诊断哺乳动物个体的5T4阳性癌症的方法。
技术介绍
人5T4抗原在许多癌症类型中表达，并且基本上不存在于正常组织中。近来，已经研发了特异性结合5T4抗原的高亲和性单克隆抗体，并且已经将细胞毒性药物与5T4抗体缀合，来形成用于治疗5T4阳性癌症的抗体药物缀合物(美国专利8,044,178和8,309,094)。随后评估5T4的表达可能是鉴定患有5T4阳性癌症患者的有用方法。一种方法是检测癌症患者循环肿瘤细胞(CTC)上的5T4抗原。已经在患有上皮源性癌症患者的外周血中观察到超低浓度的循环肿瘤细胞(Kraeftetal.,ClinCancerRes10:3020-3028,2004)。取样时，这些细胞的数量显示与多组患有渐进性疾病的转移性乳腺癌患者的结果有关(Cristofanillietal.,NEnglJMed351:781-791,2004)。为此，为了研究这些细胞如何通过血流自动到达遥远的部位并形成转移性疾病，这些细胞的表征具有重要的本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测疑似患有5T4阳性癌症的哺乳动物个体中5T4阳性循环肿瘤细胞的方法，其包括：测试来自所述哺乳动物个体的血液样品，其中所述血液样品包含细胞群；将所述血液样品置于基质上；检测所述血液样品中是否存在选择性结合有核细胞的第一标记；检测所述血液样品中是否存在结合所述循环肿瘤细胞的第二标记；检测所述血液样品中是否存在结合确定为不是肿瘤细胞的细胞群或所述细胞群的子集的第三标记；检测所述血液样品中选择性结合所述循环肿瘤细胞的第四标记的表达水平，其中所述第四标记是人5T4抗原；以及分析通过所述第一、第二、第三以及第四标记所检测到的细胞群，以鉴定和表征所述循环肿瘤细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.01.24 US 61/590,066;2013.01.17 US 61/753,6651.抗5T4抗体在制备用于检测疑似患有5T4阳性癌症的哺乳动物个体中5T4阳性循环肿瘤细胞的诊断剂中的用途，所述检测通过包括以下步骤的方法进行：测试来自所述哺乳动物个体的血液样品，其中所述血液样品包含细胞群；将所述血液样品置于基质上；使用第一标记检测所述血液样品中是否存在有核细胞；检测所述血液样品中的细胞上是否存在第二标记的表达，其中所述第二标记是细胞角蛋白；检测所述血液样品中的细胞上是否存在第三标记的表达，其中所述第三标记是CD45；检测所述血液样品中的细胞上是否存在第四标记的表达，其中所述第四标记是人5T4抗原；以及分析细胞群中的所述第一、第二、第三以及第四标记，以鉴定和表征所述循环肿瘤细胞。2.权利要求1的用途，其中检测到所述血液样品中存在5T4阳性循环肿瘤细胞表明所述哺乳动物个体中存在早期5T4阳性癌症。3.权利要求1的用途，其中检测到所述血液样品中不存在5T4阳性循环肿瘤细胞表明所述哺乳动物个体处于无疾病状态或非可度量的疾病状态，其中所述疾病是5T4阳性癌症。4.权利要求1的用途，其中检测到所述血液样品中5T4阳性循环肿瘤细胞的存在与否指示5T4阳性癌症治疗或癌症恢复过程中的治疗管理。5.权利要求1的用途，其中所述细胞群是混合细胞群。6.权利要求1的用途，其中所述基质是平面基质。7.权利要求1的用途，其中所述基质是微流体装置。8.权利要求1的用途，其中所述基质是容纳富集的细胞群的盒。9.权利要求1的用途，其中将所述样品置于所述基质上形成生物单细胞层。10.权利要求1的用途，其中使用荧光检测所述第一标记、所述第二标记、所述第三标记或所述第四标记。11.权利要求1的用途，其中所述第一标记用于通过细胞核详情、细胞核轮廓、核仁的存在与否、细胞质的特质或细胞质的量分析所述细胞群。12.权利要求11的用途，其中所述第一标记是DAPI。13.权利要求11的用途，其中所述方法还包括通过测量具有高核质比的完整细胞、具有低核质比的完整细胞、早期凋亡细胞或晚期凋亡细胞分析所述细胞群，并鉴定所述循环肿瘤细胞和循环肿瘤细胞簇。14.权利要求1的用途，其中所述方法还包括细胞染色，以通过形态、大小或核质比鉴定所述循环肿瘤细胞。15.权利要求14的用途，其中所述细胞染色使用瑞氏姬姆萨染料进行。16.权利要求1的用途，其中所述方法还包括通过细胞对所述基质的附着分析所述细胞群、扫描所述基质上的所述细胞群以及用重定位通过数字显微镜使所述细胞成像。17.权利要求1的用途，其中所述方法还包括定量所述循环肿瘤细胞上的人5T4抗原以产生H得分，其中所述H得分用于选择5T4阳性癌症患者群。18.权利要求1的用途，其中检测到存在所述第一标记、存在所述第二标记、不存在所述第三标记并且存在所述第四标记表明存在5T4阳性循环肿瘤细胞。19.权利要求1的用途，其中在所述血液样品中检测到存在5T4阳性循环肿瘤细胞表明哺乳动物个体中存在5T4阳性癌症。20.权利要求19的用途，其中所述5T4阳性癌症选自膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、子宫内膜癌、肾癌、肺癌、食道癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、皮肤癌、胃癌以及睾丸癌。21.抗5T4抗体在制备用于诊断疑似患有5T4阳性癌症的哺乳动物个体中5T4阳性癌症的诊断剂中的用途，所述诊断通过包括如下步骤的方法进行：测试来自所述哺乳动物个体的血液样品，其中所述血液样品包含细胞群；将所述血液样品置于基质上；使用第一标记检测所述血液样品中是否存在有核细胞；检测所述血液样品中的细胞上是否存在第二标记的表达，其中所述第二标记是细胞角蛋白；检测所述血液样品中的细胞上是否存在第三标记的表达，其中所述第三标记是CD45；检测所述血液样品中的细胞上是否存在第四标记的表达，其中所述第四标记是人5T4抗原；以及分析和定量细胞群中的所述第一、第二、第三以及第四标记，以鉴定和表征循环肿瘤细胞。22.权利要求21的用途，其中定量所述循环肿瘤细胞上的人5T4抗原用于产生H得分，其中所述H得分用于选择5T4阳性癌症患者群。23.权利要求21的用途，其中所述第一标记是DAPI。24.权利要求21的用途，其中检测到存在所述第一标记、存在所述第二标记、不存在所述第三标记并且存在所述第四标记表明存在5T4阳性循环肿瘤细胞。25.抗5T4抗体在制备用于筛选用于治疗疑似患有癌症的哺乳动物个体中5T4阳性癌症的抗体药物缀合物的活性或功效的诊断剂中的用途，所述筛选通过包括如下步骤的方法进行：给所述哺乳动物个体施用治疗有效量的抗体药物缀合物；测试来自所述哺乳动物个体的血液样品，其中所述血液样品包含细胞群；将所述血液样品置于基质上；使...

【专利技术属性】
技术研发人员：HP·格贝尔，D·马里努奇，S·皮里谢泼德，E·塔克，
申请(专利权)人：辉瑞公司，艾匹克科学公司，
类型：发明
国别省市：美国;US