金黄色葡萄球菌抗原的含佐剂制剂制造技术

金黄色葡萄球菌(S.aureus)疫苗的功效可通过采用TLR激动剂(优选TLR7激动剂)和不溶性金属盐(优选铝盐)作为金黄色葡萄球菌抗原的佐剂来增强。所述TLR激动剂通常吸附至所述金属盐。金黄色葡萄球菌抗原也可吸附至金属盐。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】金黄色葡萄球菌抗原的含佐剂制剂 本申请要求美国临时申请61/530, 162(2011年9月1日提交）和61/607, 999(2012 年3月7日提交）的权益，这两项申请的全部内容出于所有目的通过引用纳入本文。
本专利技术涉及有佐剂的来自金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)的抗原以增 加其免疫原性的领域。
技术介绍
参考文献1公开了用于制备针对金黄色葡萄球菌（S. aureus)的有效疫苗的不同 免疫原和组合。参考文献1中的表2显示，这些免疫原和组合采用氢氧化铝或采用MF59水 包油乳液作为佐剂。实验部分具体公开了采用氢氧化铝的吸附实验。 本专利技术的目的在于提供其它有佐剂的免疫原性组合物以供针对金黄色葡萄球菌 (S. aureus)的保护，具体地，提供组合物，所述组合物优于采用氢氧化铝作为佐剂的那些。 改善的佐剂效应尤其有利于在金黄色葡萄球菌（S. aureus)感染的高风险个体（例如，准备 接受手术处理的、免疫功能低下的或年纪大的那些个体）中达到快速且强效的免疫响应。
技术实现思路
本专利技术人发现，金黄色葡萄球菌（S. aureus)疫苗的功效可通过采用TLR激动剂 (优选TLR7激动剂，例如后文鉴定的化合物〃K2〃）和不溶性金属盐（优选铝盐，例如氢氧化 铝）作为金黄色葡萄球菌抗原的佐剂来增强。所述TLR激动剂通常吸附至所述金属盐，如 参考文献2中公开的那样。金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原也可吸附至所述金属盐。 -方面，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含（i)TLR激动 齐U、（ii)不溶性金属盐，和（iii)两种或更多种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原。 第二方面中，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含（i)TLR7 激动剂、（ii)不溶性金属盐，和（iii)至少一种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原。 第三方面中，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含（i)TLR 激动剂、（ii)不溶性铝盐，和（iii)至少一种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原。 第四方面中，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含（i)TLR 激动剂、（ii)不溶性金属盐，和（iii)包含EsxA抗原和EsxB抗原的融合蛋白。 第五方面中，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含（i)TLR 激动剂、（ii)不溶性金属盐，和（iii)突变的金黄色葡萄球菌（S. aureus)溶血素。 第六方面中，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含（i)TLR 激动剂、（ii)不溶性金属盐、（iii)缓冲剂和（iv)至少一种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗 原。 第七方面中，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包含（i)TLR 激动剂、（ii)不溶性金属盐，和（iii)至少一种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原，其中所 述组合物的pH是6?8。 第八方面中，本专利技术提供一种用于制备免疫原性组合物的方法，其中所述方法包 括：将TLR激动剂、不溶性金属盐与一种或多种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原混合，由此 提供上述免疫原性组合物。 第九方面中，本专利技术提供一种用于制备免疫原性组合物的方法，所述方法包括以 下步骤之一 ：（i)将金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原和包含TLR激动剂与不溶性金属盐的 混合物合并；（ii)将不溶性金属盐和包含TLR激动剂与金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原 的混合物合并；或（iii)将TLR激动剂和包含不溶性金属盐与金黄色葡萄球菌（S. aureus) 抗原的混合物合并。 第十方面中，本专利技术提供一种组合物，所述组合物包含：(a)包含吸附至不溶性金 属盐的第一 TLR激动剂的佐剂复合物；(b)包含吸附至不溶性金属盐的第二TLR激动剂的 佐剂复合物；和（c) 一种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原。一种或多种所述抗原可吸附至 一种或多种所述金属盐。 第i^一方面中，本专利技术提供一种用于制备免疫原性组合物的方法，所述方法包括 以下步骤（i)制备TLR激动剂和可溶性铝盐的水性混合物，然后向所述水性混合物添加非 铝盐，以形成吸附有TLR激动剂的沉淀铝盐；和（ii)将金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原 和所述沉淀盐及其吸附的激动剂混合。所述TLR激动剂优选是本文中不同描述的TLR激动 剂。 第十二方面中，本专利技术提供一种制备免疫原性组合物的方法，所述方法包括如下 步骤：混合（i)TLR激动剂和可溶性铝盐的水性混合物和（ii)金黄色葡萄球菌（S. aureus) 免疫原的缓冲水性混合物，其中，所述混合步骤导致吸附有所述TLR激动剂和所述免疫原 的铝盐沉淀。本专利技术还提供通过该方法获得的或可通过该方法获得的免疫原性组合物。 第十三方面中，本专利技术提供一种用于制备无菌免疫原性组合物的方法，所述方法 包括如下步骤：合并（i)金黄色葡萄球菌抗原，和（ii)TLR激动剂和不溶性金属盐的无菌复 合物。所述无菌复合物可通过如下方法制备，所述方法包括步骤（a)使TLR激动剂和不溶 性金属盐混合，从而所述TLR激动剂吸附至所述不溶性金属盐以形成所述复合物；和（b)对 该复合物灭菌。灭菌可通过高压灭菌（或类似方法[3])来方便地完成。或者，所述无菌复 合物可通过如下步骤制备：(a)对TLR激动剂的溶液或悬浮液灭菌，和（b)将所述灭菌的溶 液或悬浮液与无菌的不溶性金属盐合并；或通过如下步骤制备：（a)对不溶性金属盐灭菌， 和（b)将所述灭菌的不溶性金属盐和TLR激动剂的无菌溶液或悬浮液合并；或通过如下步 骤制备：合并（a) TLR激动剂的无菌溶液或悬浮液和（b)无菌不溶性金属盐。所述TLR激动 剂溶液/悬浮液的灭菌可通过无菌过滤来方便地完成，而该物质可以浓缩形式制备。所述 不溶性金属盐的灭菌可通过高压灭菌来方便地完成。所述无菌不溶性金属盐通常是水性悬 液。 在一个实施方式中，本专利技术提供一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物包 含： ?氢氧化铝佐剂； ?式⑷的TLR7激动剂，例如化合物K2 ; ?包含SEQ ID N0:6的第一多肽，或者与SEQ ID N0:6有至多5个单氨基变化差异 的经修饰的氨基酸序列，限制条件是，所述经修饰的序列能够引发与由SEQ ID N0:6组成的 多肽结合的抗体； ?包含SEQ ID N0:13的第二多肽，或者与SEQ ID N0:13有至多5个单氨基变化差 异的经修饰的氨基酸序列，限制条件是，所述经修饰的序列能够引发与由SEQ ID N0:13组 成的多肽结合的抗体； ?包含SEQ ID N0:31的第三多肽，或者与SEQ ID N0:31有至多5个单氨基变化差 异的经修饰的氨基酸序列，限制条件是，所述经修饰的序列能够引发与由SEQ ID N0:31组 成的多肽结合的抗体； ?包含SEQ ID N0:33的第四多肽，或者与SEQ ID N0:33有至多5个单氨基变化差 异的经修饰的氨基酸序列，限制条件是，所述经修本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫原性组合物，其包含：(i)TLR激动剂(ii)不溶性金属盐，和(iii)两种或更多种金黄色葡萄球菌(S.aureus)抗原。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.09.01 US 61/530,162;2012.03.07 US 61/607,9991. 一种免疫原性组合物，其包含：（i)TLR激动剂（ii)不溶性金属盐，和（iii)两种或 更多种金黄色葡萄球菌（S. aureus)抗原。2. -种免疫原性组合物，其包含：（i)TLR7激动剂（ii)不溶性金属盐，和（iii)至少一 种金黄色葡萄球菌抗原。3. -种免疫原性组合物，其包含：（i)TLR激动剂（ii)不溶性金属盐，所述不溶性金属 盐是铝盐，和（iii)至少一种金黄色葡萄球菌抗原。4. 一种免疫原性组合物，其包含：（i)TLR激动剂（ii)不溶性金属盐，和（iii)包含金 黄色葡萄球菌EsxA抗原和金黄色葡萄球菌EsxB抗原的融合蛋白。5. -种免疫原性组合物，其包含：（i)TLR激动剂（ii)不溶性金属盐，和（iii)无毒金 黄色葡萄球菌溶血素突变体。6. -种免疫原性组合物，其包含：⑴TLR激动剂（ii)不溶性金属盐（iii)缓冲剂，和 ( iv)至少一种金黄色葡萄球菌抗原。7. -种免疫原性组合物，其包含：（i)TLR激动剂、（ii)不溶性金属盐，和（iii)至少一 种金黄色葡萄球菌抗原，其中所述组合物的pH是6?8。8. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述TLR激动剂是人TLR7的 激动剂。9. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述TLR激动剂包含至少一 个吸附部分，所述吸附部分允许该激动剂吸附至不溶性金属盐。10. 如权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述吸附部分是磷酸盐/酯或膦酸盐/ 酯。11. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述TLR激动剂具有说明书 中定义的式（C)、（D)、（E)、（F)、（G)、（Η)、（I)、（II)、（J)或（K)，或优选地具有式（K'）。12. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述TLR激动剂是 W02012/031140中定义的化合物1?102之一，或其药学上可接受的盐。13. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述TLR激动剂是化合物 K2〇14. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述不溶性金属盐是铝盐。15. 如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述铝盐是氢氧化铝。16. 如权利要求14或权利要求15所述的组合物，其特征在于，所述组合物的Α1+++浓度 是 10 ?500 μ g/ml。17. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，>80%的所述TLR激动剂吸 附至所述不溶性金属盐。18. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含组氨酸缓冲 剂。19. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物的pH是6. 1? 7. 9。20. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括如下全部四 种物质：（i)包含EsxA抗原和EsxB抗原的单一多肽，例如包含SEQ ID NO: 31 ; (ii) Sta006 抗原，例如包含SEQ ID N0:6;(iii)Sta011抗原，例如包含SEQ ID N0:33;和（iv)溶血素 的H35L突变体形式，例如包含SEQ ID N0:13。21. 如前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含： 氢氧化铝佐剂； 式⑷的TLR7激动剂； 包含SEQ ID NO: 6的第一多肽，或者与SEQ ID NO: 6有至多5个单氨基变化差异的经 修饰的氨基酸序列，限制条件是该经修饰的序列能够引发与由SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：F·巴格诺利，B·宝德纳，S·布法力，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH