本发明专利技术公开了一种快速制备高含量花椒不饱和酰胺类成分的方法，采用下述工艺步骤：（1）以花椒油树脂为原料，加入弱极性溶剂搅拌抽滤，得到固体剩余物；（2）向上述固体剩余物中加入正己烷、环己烷、异辛烷中的一种或几种进行加热回流提取后过滤；（3）滤液在-10℃～-20℃条件下冷冻结晶；(4)结晶经洗涤抽滤后，采用高纯氮气在-5～5℃中吹扫干燥，得高含量花椒不饱和酰胺类成分。本方法避免了现有方法中的色谱柱层析方法使用，能快速有效地制备高含量的不饱和酰胺类成分，简单可靠，成本低廉。所得晶体经质谱鉴定为山椒素及同分异构体，经高效液相色谱检测含量在95%以上，可以达到含量测定、质量评价等方面作为对照品应用的基本要求。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种花椒中高含量不饱和酰胺类成分的快速制备方法。
技术介绍
花椒是指红花椒{ZanthoxylumBungeanum Maxim)和青花椒{Zanthoxylumarmatum v.novemfolius)的干燥成熟果皮，隶属芸香科iRutaceae')花椒属{Zanthoxylum)，为我国特有的香辛料资源。花椒特征性香气和麻味使其被广泛应用于各种菜系尤其是川菜的烹饪调味中[2]，赋予菜肴独特的风味。花椒中主要化学成分有挥发油、酰胺类、生物碱等，其中挥发油和酰胺类这两个呈味成分分别反映花椒的香气和麻味特征，也是花椒品质评价中最为重要的两个特征性指标。与一般味觉刺激味蕾不同，麻味是刺激舌黏膜和触觉神经而产生痛感，但具体如何激活以及被激活受体是什么尚未有清晰定论。目前认为，花椒的麻味口感，是其中的山椒素类化合物通过激活体感神经细胞而产生麻感。因此，研究人员通常将花椒中以山椒素为代表的具有感官刺激活性的链状不饱和脂肪族酰胺类化合物统称为花椒麻素。目前已有22种天然长链不饱和脂肪酸酰胺类物质被国内外学者从花椒中分离得到，主要是a-山椒素、β -山椒素、Y -山椒素、δ -山椒素以及在氨基部分氢被羟基取代的同系物。除了烹饪调味方面的应用外，不饱和族酰胺类还具有麻醉、镇痛、抗凝血等药理活性。因此，丰富的药用价值和经济价值使其具有广阔的市场前景。然而，因为花椒中成分复杂，不饱和酰胺类素的分 离纯化主要通过柱层析的方法进行制备，同时由于不饱和酰胺类中的长链不饱和脂肪酸结构十分不稳定，在空气中极易氧化变质，这一系列因素导致了高含量不饱和酰胺类的大规模制备存在技术瓶颈，作为花椒麻味成分定量分析的对照品无商品供应，缺乏对花椒及其产品的麻味进行质量评价的有效手段，同时阻碍了其在医药和食品等领域更广泛深入的应用。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供，为花椒麻味成分分析和质量评价提供对照品。为解决上述技术问题，本专利技术采用下述工艺步骤展开:(1)以花椒油树脂为原料，向不饱和酰胺类含量为30%~60%的花椒油树脂中加入石油醚、6号溶剂油或正己烷中的一种或几种弱极性溶剂，物料与溶剂的比例为:1:5~1:10 (w/v);溶解温度为5~20°C，溶解搅拌，时间为2~4h，反复溶解3~5次，真空抽滤，得到固体剩余物；(2)向上述固体剩余物中按物料和溶剂的比例为:1:10~1:20 (w/v)加入己烷、环己烷、异辛烷中的一种或几种溶剂，在70~90°C温度范围加热回流提取，共提取3~5次，并趁热快速过滤得到滤液；(3)滤液放入密闭容器在自来水浴中快速冷却至常温，放在冰箱中在-10°C~_20°C放置24~48h冷冻析晶、结晶，过滤后得到白色结晶；(4)白色结晶用2-3倍体积己烷、环己烷、异辛烷中的一种或几种溶剂洗涤3-4次，过滤，滤晶放入干燥器中，通入-5~5°C的高纯氮气进行吹扫干燥，得高纯度花椒不饱和酰胺类成分；(5)经质谱分析其分子量为264，对照相关数据，鉴定为为山椒素类成分，经高效液相色谱分析，山椒素类成分含量> 95%。本专利技术基本思路为:本专利技术首先利用极性极弱的溶剂在低温或常温下溶解能够溶解挥发油、油脂等脂溶性成分，有效去除花椒油树脂中的脂溶性杂质，从而提高剩余物中花椒不饱和酰胺类成分的含量；利用不饱和酰胺类在热弱极性溶剂中能够少量溶解，在低温条件下析晶的的特性，采用弱极性溶剂对固体剩余物进行加热回流提取，得到不饱和酰胺类成分的提取液；对提取液冷冻结晶，即可得到高含量的花椒不饱和酰胺类成分的结晶产物。采用上述技术方案所产生的有益效果在于:本专利技术避免了利用现有方法中的硅胶层析柱以及制备型高效液相色谱的制备过程繁琐复杂、制备量小、，能快速有效地提取和分离花椒中的麻味物质，获得高含量的不饱和酰胺类成分，方法既简单可靠又节约成本。本方法所得的晶体进行质谱分析得分子量为264，根据裂解规律并结合文献鉴定为羟基-a-山椒素，对晶体进行高效液相色谱分析，纯度为95%左右，可以达到含量测定、质量评价等方面对标准品的基本要求，又可以充分满足食品医药等领域的应用要求。【附图说明】下面结合附图和【具体实施方式】对本专利技术作进一步详细的说明。图1本专利技术所得花椒不饱和酰胺类成分的质谱图。图2本专利技术所得不饱和酰胺类成分的高效液相色谱图。具体实施方案 实施例1:称取50g含量为50%的超临界CO2萃取法生产的红花椒油树脂，加入300mL石油醚，5°C搅拌溶解3h，共重复3次，5°C真空抽滤后得固体剩余物31.2g ;向固体剩余物中加入250mL己烷，70°C加热回流提取，提取3次，趁热快速过滤；滤液采用_20°C冷冻放置结晶24h，5°C真空抽滤，得白色结晶，再用少量己烷洗涤，_5°C真空抽滤，所得结晶放入干燥器用_5°C高纯氮气进行吹扫干燥20分钟并密封保存，即得高含量的花椒不饱和酰胺类晶体，经高效液相分析，含量为96.9%。实施例2:称取10g含量为30%的乙醇提取的红花椒油树脂，加入800mL6号溶剂油，15°C搅拌溶解2h，共重复3次，4°C真空抽滤后得固体残渣52.8g ;向固体残渣中加入600mL环己烷，80°C加热回流提取，提取3次，趁热快速过滤；滤液采用_15°C冷冻放置结晶24h，0°C真空抽滤，得白色结晶，再用环己烷洗涤，(TC真空抽滤，所得结晶放入干燥器用0°C高纯氮气进行吹扫干燥25分钟密封保存，即得高纯度的花椒不饱和酰胺类晶体，对其进行高效液相分析，含量为95.2%。实施例3:称取150g含量为40%左右的超临界CO2萃取法生产的青花椒油树脂，加入100mL正己烷，25°C搅拌溶解3h，共重复3次，30°C真空抽滤后得固体残渣87.4g ；向固体残渣中加入100mL异辛烷，90°C加热回流提取，提取3次，趁热快速过滤；滤液采用-10°C冷冻放置结晶24h，5°C真空抽滤，得白色结晶，再用异辛烷洗涤，5°C真空抽滤，所得结晶放入干燥器用5°C高纯氮气进行吹扫干燥30分钟密封保存，即得高纯度的花椒不饱和酰胺类晶体，对其进行高效液相分析，含量为95.7%。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种快速制备高含量花椒不饱和酰胺类成分的方法，其特征在于，所述方法的步骤为：（1）杂质脱除：以花椒油树脂为原料，向花椒油树脂中加入弱极性溶剂，常温溶解搅拌，抽滤，脱除精油等脂溶性杂质得到固体剩余物；（2）溶解提取：向上述固体剩余物中加入弱极性溶剂，加热回流提取，过滤得到滤液；（3）冷冻结晶：滤液经冷冻析晶过滤后得到白色结晶；（4）洗涤干燥：结晶采用弱极性溶剂洗涤、过滤、气体吹扫干燥后，即得高含量山椒素类成分。
【技术特征摘要】
1.一种快速制备高含量花椒不饱和酰胺类成分的方法，其特征在于，所述方法的步骤为: (1)杂质脱除:以花椒油树脂为原料，向花椒油树脂中加入弱极性溶剂，常温溶解搅拌，抽滤，脱除精油等脂溶性杂质得到固体剩余物； (2)溶解提取:向上述固体剩余物中加入弱极性溶剂，加热回流提取，过滤得到滤液； (3)冷冻结晶:滤液经冷冻析晶过滤后得到白色结晶； (4)洗涤干燥:结晶采用弱极性溶剂洗涤、过滤、气体吹扫干燥后，即得高含量山椒素类成分。2.根据权利要求1所述的快速制备花椒中不饱和酰胺类成分的方法，其特征在于，所述步骤(1)中:超临界C02萃取或乙醇、丙酮等溶剂提取的花椒油树脂，山椒素类成分含量在 30% ~60%ο3.根据权利要求1所述的快速制备花椒中不饱和酰胺类成分的方法，其特征在于，所述步骤(1)中:弱极性溶剂为石油醚、6号溶剂油或己烷中的一种或几种；花椒油树脂和溶剂的固液比为1:5~1:10 (w/v);溶解温度为5~25°C，时间为2~4h，反复溶解3~...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵伯涛，张卫明，朱羽尧，张国琳，钱骅，黄晓德，陈斌，
申请(专利权)人：中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。