从蛋壳中提取溶菌酶的方法技术

本发明专利技术公开了从蛋壳中提取溶菌酶的方法，它的技术方案是这样实现的：从蛋壳中提取溶菌酶的方法：其操作步骤如下：将新鲜的蛋壳加入氯化钠溶液浸泡；用稀盐酸调节PH值，加热，过滤，收集滤液；将滤渣按照上述的方法提取两次，合并三次滤液，调节滤液PH值，水浴加热后速冷至室温，离心去除沉淀，收集上清液A；调节上清液A的PH值，然后加入聚丙烯酸，有凝聚物沉淀时，收集凝聚物；加氢氧化钠溶解凝聚物，加氯化钙，解离凝聚物，过滤得澄清液；澄清液调节PH值，沉淀，将白色沉淀过滤除去，取出清液，再加入氯化钠溶液静置，滤取晶体，干燥。本发明专利技术具有的有益效果：实现资源的充分利用，变废为宝，鸡蛋在等重量的情况下提高了溶菌酶的产量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及活性酶制备领域，尤其涉及。
技术介绍
溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用，广泛存在于人体多种组织中，鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最为丰富。用蛋清提取溶菌酶时，弃之不用的蛋壳中，主要是蛋壳膜中也含有少量的溶菌酶。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，充分利用有限的资源，贯彻变废为宝的理念。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的:，其操作步骤如下: (1)将新鲜的蛋壳洗净、晾干、碾碎，置于容器中，向蛋壳中加入质量分数1%的氯化钠溶液浸泡，氯化钠溶液的体积与蛋壳体积相同； (2)用2%的稀盐酸调节上述混合溶液的PH值至6.0，加热至40°C，保温I小时，然后用尼龙纱布过滤，收集滤液； (3)将滤渣按照步骤(1)和(2)的方法提取两次，合并三次滤液，用5%乳酸将滤液PH值调至5.0，再水浴加热至75 °C，搅拌均匀，使其快速冷却至室温，以3000r/min的转速离心15分钟，去除沉淀，收集上清液A ； (4)用20%的氢氧化钠将上清液A的PH值调至6.0,然后向上清液A中缓慢加入聚丙烯酸，边加边搅拌，直至有凝聚物沉淀时，倒去上清液B，收集凝聚物； (5)用20%的氢氧化钠将PH值调至9.5-10，溶解凝聚物，加5%氯化钙溶液，解离溶菌酶聚丙烯酸，静置15分钟，再用2%的稀盐酸将PH值调至6.0,过滤得澄清液； (6)澄清液用5%的氢氧化钠将PH值调至8.5-10.5，沉淀4小时，将白色沉淀过滤除去，取出清液，再加入等量5%的氯化钠溶液静置12小时，滤取晶体，喷雾干燥； (7)再用5%的氯化钠重结晶一次，过滤得溶菌酶晶体，喷雾干燥。本专利技术具有以下有益效果:本专利技术利用微不足道的蛋壳提取溶菌酶，实现资源的充分利用，变废为宝，节约生产成本，使鸡蛋在同等重量的情况下提高了溶菌酶的产量。【具体实施方式】本实施例，其操作步骤如下: (I)将I公斤新鲜的蛋壳洗净、晾干、碾碎，置于容器中，向蛋壳中加入质量分数1%的氯化钠溶液浸泡，氯化钠溶液的体积与蛋壳体积相同；(2)用2%的稀盐酸调节上述混合溶液的PH值至6.0，加热至40°C，保温I小时，然后用尼龙纱布过滤，收集滤液； (3)将滤渣按照步骤(1)和(2)的方法提取两次，合并三次滤液，用5%乳酸将滤液PH值调至5.0，再水浴加热至75°C，搅拌均匀，使其快速冷却至室温，以3000r/min的转速离心15分钟，去除沉淀，收集上清液A ； (4)用20%的氢氧化钠将上清液A的PH值调至6.0,然后向上清液A中缓慢加入聚丙烯酸，边加边搅拌，直至有凝聚物沉淀时，倒去上清液B，收集凝聚物； (5)用20%的氢氧化钠将PH值调至9.5-10，溶解凝聚物，加5%氯化钙溶液，解离溶菌酶聚丙烯酸，静置15分钟，再用2%的稀盐酸将PH值调至6.0,过滤得澄清液； (6)澄清液用5%的氢氧化钠将PH值调至8.5-10.5，沉淀4小时，将白色沉淀过滤除去，取出清液，再加入等量5%的氯化钠溶液静置12小时，滤取晶体，喷雾干燥； (7)再用5%的氯化钠重结晶一次，过滤得溶菌酶晶体，喷雾干燥，干燥塔进口温度控制在，100-14(TC，出口温度控制在50-65 °C，本实施例可得溶菌酶0.88克。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本专利技术的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本专利技术的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的权利要求范围当中。本文档来自技高网...

【技术保护点】
从蛋壳中提取溶菌酶的方法，其特征在于，其操作步骤如下：（1）将新鲜的蛋壳洗净、晾干、碾碎，置于容器中，向蛋壳中加入质量分数1%的氯化钠溶液浸泡，氯化钠溶液的体积与蛋壳体积相同；（2）用2%的稀盐酸调节上述混合溶液的PH值至6.0，加热至40℃，保温1小时，然后用尼龙纱布过滤，收集滤液；（3）将滤渣按照步骤（1）和（2）的方法提取两次，合并三次滤液，用5%乳酸将滤液PH值调至5.0，再水浴加热至75℃，搅拌均匀，使其快速冷却至室温，以3000r/min的转速离心15分钟，去除沉淀，收集上清液A；（4）用20%的氢氧化钠将上清液A的PH值调至6.0，然后向上清液A中缓慢加入聚丙烯酸，边加边搅拌，直至有凝聚物沉淀时，倒去上清液B，收集凝聚物；（5）用20%的氢氧化钠将PH值调至9.5‑10，溶解凝聚物，加5%氯化钙溶液，解离溶菌酶聚丙烯酸，静置15分钟，再用2%的稀盐酸将PH值调至6.0，过滤得澄清液；（6）澄清液用5%的氢氧化钠将PH值调至8.5‑10.5，沉淀4小时，将白色沉淀过滤除去，取出清液，再加入等量5%的氯化钠溶液静置12小时，滤取晶体，喷雾干燥；（7）再用5%的氯化钠重结晶一次，过滤得溶菌酶晶体，喷雾干燥。...

【技术特征摘要】
1.从蛋壳中提取溶菌酶的方法，其特征在于，其操作步骤如下: (1)将新鲜的蛋壳洗净、晾干、碾碎，置于容器中，向蛋壳中加入质量分数1%的氯化钠溶液浸泡，氯化钠溶液的体积与蛋壳体积相同； (2)用2%的稀盐酸调节上述混合溶液的PH值至6.0，加热至40°C，保温I小时，然后用尼龙纱布过滤，收集滤液； (3)将滤渣按照步骤(1)和(2)的方法提取两次，合并三次滤液，用5%乳酸将滤液PH值调至5.0，再水浴加热至75°C，搅拌均匀，使其快速冷却至室温，以3000r/min的转速离心15分钟，去除沉淀，收集上清液A ； (4)用2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王俊伟，
申请(专利权)人：南通康德生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32