【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种增强型DCIK细胞的制备方法,其特征在于:包括以下步骤: 1)从采集患者的外周血中分离得到外周血单个核细胞;将其置于无血培养基中调整细胞浓度3×106/ml的单核细胞,转移至培养瓶中,在温度为37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养2‑3h后,轻轻吹打使之未贴壁的细胞重悬,并转移至新的培养瓶中用于CIK细胞的培养,原瓶加入含有IL‑4和GM‑CSF的培养液继续培养,第3天进行半量换液,第5天添加TNF‑α诱导细胞成熟,第7天收货成熟的DC细胞加入CIK细胞的培养袋中进行混合培养;用无血清培养基重悬培养DC细胞时余下的细胞,,得到浓度1~3×106/ml的核细胞,加入IFN‑γ、植物血凝素和PGE2、并转移至培养瓶或培养袋中,在温度为37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养24h;其中:所述IFN‑γ的浓度:100~2000u/ml,PHA的浓度:10ng~50μg/ml,PGE2的浓度:1ng~50μg/ml; 2)然后加入CD3单抗,IL‑2和IL‑1α,继续培养;其中,CD3单抗的浓度:1ng~20μg/ml,IL‑2的浓度:10~10000IU/ml,IL‑1α的浓度:1ng~5 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:许亮,艾伟,石纪刚,柳海洋,张辉,
申请(专利权)人:安德生细胞生物湖北有限公司,
类型:发明
国别省市:湖北;42
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