环状芽孢杆菌及微生物菌剂和它们的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种环状芽孢杆菌，其保藏编号为CGMCC NO.8910。本发明专利技术还提供了一种微生物菌剂，该微生物菌剂含有菌体和培养基，所述菌体包括保藏编号为CGMCC NO.8910的环状芽孢杆菌。本发明专利技术还提供了如上所述的环状芽孢杆菌和如上所述的微生物菌剂在防治农作物的病害中的应用。通过上述技术方案，本发明专利技术可以更加有效地防治番茄灰霉病等农作物的病害。

【技术实现步骤摘要】
环状芽孢杆菌及微生物菌剂和它们的应用
本专利技术涉及农业生物
，具体地，涉及一种环状芽孢杆菌、一种微生物菌剂和它们的应用。
技术介绍
番茄灰霉病是番茄上危害较重且常见的病害，各菜区都发生。除危害番茄外，还可危害茄子、辣椒、黄瓜、瓠瓜等20多种作物。低温、连续阴雨天气多的年份危害严重。发病严重时造成茎叶枯死和大量的烂花、烂果，直接影响产量。遭受番茄灰霉病侵染的番茄一般减产20％-30％，有时减产高达50％左右，严重时甚至造成番茄绝产。番茄灰霉病病原为半知菌亚门的葡萄孢菌。病菌主要以菌核(寒冷地区)或菌丝体及分孢梗(温暖地区)随病残体遗落在土中越夏或越冬，条件适宜时，萌发菌丝，产生分生孢子，借气流、雨水和人们生产活动进行传播。分生孢子依靠气流传播，从寄主伤口或衰老器官侵入致病。病菌为弱寄生菌，可在有机物上营腐生生活。目前，番茄灰霉病的防治主要采用化学药剂法，化学药剂例如聚砹嘧霉胺、氯溴异氰尿酸、丙环唑、恶霜菌酯、多菌灵、速克灵、扑海因、甲基嘧菌胺、菌核净、嘧菌酯、百菌清、甲基托布津和噻菌灵等。生物防治法也有望应用于番茄灰霉病的防治，其相比化学药剂法具有低残留等优点，但是目前生物防治法所用的微生物菌株的防治效果仍然不高。
技术实现思路
为了克服现有的微生物菌株防治番茄灰霉病的效果较差的缺陷，本专利技术提供了一种环状芽孢杆菌，该环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)的保藏编号为CGMCCNO.8910。本专利技术还提供了一种微生物菌剂，该微生物菌剂含有菌体和培养基，所述菌体包括保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌。本专利技术还提供了如上所述的环状芽孢杆菌和如上所述的微生物菌剂在防治农作物的病害中的应用。通过上述技术方案，本专利技术可以更加有效地防治番茄灰霉病等农作物的病害。本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。生物材料保藏本专利技术的环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)是本专利技术的专利技术人从四川泸州白酒生产厂的下层窖泥样品中分离的纯培养物，其保藏编号为CGMCCNO.8910，保藏日期为2014年3月12日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)。具体实施方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。本专利技术提供了一种环状芽孢杆菌，该环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)的保藏编号为CGMCCNO.8910。本专利技术还提供了一种微生物菌剂，该微生物菌剂含有菌体和培养基，所述菌体包括保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌。其中，所述微生物菌剂中含有的菌体的量可以在很大范围内改变，例如每克所述微生物菌剂中，保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌的活菌数可以为(2-200)×107CFU，优选情况下，每克所述微生物菌剂中，保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌的活菌数可以为(20-120)×107CFU。根据本专利技术，所述培养基的种类可以在很大范围内改变，可以将各种能够用于培养环状芽孢杆菌的培养基，例如，可以为牛肉膏蛋白胨培养基、肉汤培养基、LB培养基等常用培养基作为种子培养基，用于菌种的保存；而发酵的培养基一般用于生产，这些培养基的种类也为本领域技术人员所公知。上述培养基能够商购得到或者根据“微生物培养基手册”(MicrobiologyCultureMediaManual)的记载制备得到。例如，种子培养基可以为牛肉膏蛋白胨培养基，其含有1-3g/L的牛肉膏、5-15g/L的蛋白胨、3-8g/L的氯化钠、15-20g/L的琼脂。例如发酵培养基可以含有：3-7g/L的淀粉、0.5-2g/L的蔗糖、0.5-2g/L的碳酸钙、1-3g/L的硫酸铵、0.5-2g/L的磷酸二氢钾和0.3-0.8g/L的氯化镁。又例如，所述发酵培养基可以含有：10-40g/L的蔗糖、1-5g/L的豆饼粉、1-4g/L的硫酸铵、0.1-0.3g/L的酵母粉、0.5-1g/L的磷酸氢二铵、0.01-0.1g/L的氯化镁和0.05-0.2g/L的氯化钠。其中，上述各种培养基可以按照常规的灭菌方法进行灭菌后备用，例如在115-125℃和1.5-2个标准大气压的条件下灭菌10-30分钟。其中，所述微生物菌剂的制备方法可以包括：将CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌接种于发酵培养基中进行培养。优选情况下，通过培养使得到的每克所述微生物菌剂中，保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌的活菌数可以为(1-50)×107CFU，更优选为(2-20)×107CFU。其中，培养的温度可以为30-35℃，培养的时间可以为24-48小时。本专利技术还提供了如上所述的环状芽孢杆菌和如上所述的微生物菌剂在防治农作物的病害中的应用。特别优选地，所述农作物的病害包括由灰葡萄孢菌(Botrytiscinerea)引发的灰霉病。例如，所述灰霉病包括番茄灰霉病、黄瓜灰霉病、葡萄灰霉病、草莓灰霉病、苣荬菜灰霉病、茄子灰霉病、辣椒灰霉病、桃灰霉病和甜瓜灰霉病中的至少一种。以下通过实施例进一步详细说明本专利技术：实施例1本实施例用于说明本专利技术的环状芽孢杆菌的培养及微生物菌剂的制备。将保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)接种到LB培养基(含10g/L的胰蛋白胨、5g/L的酵母提取物和10g/L的NaCl)中，在30℃和180转/分振荡下培养至菌密度OD600值为0.6-0.8，得到种子菌液。将100mL上述种子菌液加入100L发酵培养基中(发酵培养基含有30g/L的蔗糖、3g/L的豆饼粉、2g/L的硫酸铵、0.2g/L的酵母粉、0.8g/L的磷酸氢二铵、0.08g/L的氯化镁和0.1g/L的氯化钠)，在30℃下培养，在培养过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至每克培养液中的环状芽孢杆菌的活菌数为108CFU，所得到的培养液即为本实施例的微生物菌剂。实施例2按照实施例1的方法制备微生物菌剂，不同的是，所用的发酵培养基为含有5g/L的淀粉、1g/L的蔗糖、1g/L的碳酸钙、2g/L的硫酸铵、1g/L的磷酸二氢钾和0.5g/L的氯化镁的培养基。对比例1将购自中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC)的商品号为11078的环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)接种到LB培养基(含10g/L的胰蛋白胨、5g/L的酵母提取物和10g/L的NaCl)中，在30℃和180转/分振荡下培养至菌密度OD600值为0.6-0.8，得到种子菌液。将100mL上述种子菌液加入100L发酵培养基中(发酵培养基含有30g/L的蔗糖、3g/L的豆饼粉、2g/L的硫酸铵、0.2g/L的酵母粉、0.8g/L的磷酸氢二铵、0.08g/L的氯化镁和0.1g/L的氯化钠)，在30℃下培养，在培养过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至每克培养液中的环状芽孢杆菌的活菌数为108CFU，所得到的培养液即为本对比例的微生物菌剂。测试实施例1本测试实施例中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环状芽孢杆菌，其特征在于：该环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)的保藏编号为CGMCC NO.8910。

【技术特征摘要】
1.一种环状芽孢杆菌，其特征在于：该环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)的保藏编号为CGMCCNO.8910。2.一种微生物菌剂，该微生物菌剂含有菌体和培养基，其特征在于：所述菌体包括保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌。3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于：每克所述微生物菌剂中，保藏编号为CGMCCNO.8910的环状芽孢杆菌的活菌数为(2-200)×107CFU。4.根据权利要求2或3所述的微生物菌剂，其特征在于：所述培养基包括牛肉膏蛋白胨培养基、肉汤培养基和LB培养基中的至少一种。5.根据权利要求2或3所述的微生物菌剂，其特征在于：所述培养基含有3-7g/L的淀粉、0.5-2g/L的蔗糖、0.5-2g/L的碳酸钙、1-3g/L的硫...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵君才，阮志勇，赵秉强，王慧敏，赵文勇，吕昭辉，刘慧，宋昭，王彦伟，刘小飞，
申请(专利权)人：烟台海上传奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37