治疗活性的α-MSH类似物制造技术

本发明专利技术涉及治疗活性的α-MSH类似物。本发明专利技术描述了α-促黑素细胞激素（α-MSH）的肽类似物，所述肽类似物与天然α-MSH肽相比具有提高的功效。与α-MSH相比，α-MSH类似物表现出提高的抗炎效果以及提高的防止局部缺血情况的能力。本发明专利技术进一步公开了该肽用于制备药物组合物的用途，和药物组合物，所述药物组合物用于治疗或预防哺乳动物的一个或多个器官的组织的病况。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及治疗活性的α-MSH类似物。本专利技术描述了α-促黑素细胞激素（α-MSH）的肽类似物，所述肽类似物与天然α-MSH肽相比具有提高的功效。与α-MSH相比，α-MSH类似物表现出提高的抗炎效果以及提高的防止局部缺血情况的能力。本专利技术进一步公开了该肽用于制备药物组合物的用途，和药物组合物，所述药物组合物用于治疗或预防哺乳动物的一个或多个器官的组织的病况。【专利说明】治疗活性的a -MSH类似物本申请是原申请的申请日为2005年8月26日，申请号为200580051680.9，专利技术名称为“治疗活性的a -MSH类似物”的中国专利申请的分案申请。
本专利技术涉及a-促黑素细胞激素(a-MSH)的肽类似物，所述肽类似物与天然a-MSH肽相比具有提高的功效。与a-MSH相比，a-MSH类似物表现出提高的抗炎效果以及提高的治疗或预防与局部缺血或后面是血管再灌注的局部缺血相关的全身损伤、器官损伤或细胞损伤的能力。
技术介绍
天然肽a -促黑素细胞激素(a -MSH)作为I型、3型、4型和5型黑皮质素(MC)受体的天然激动剂已经为人们熟知。MC受体属于G-蛋白偶联受体的类型。所有的受体亚型都被偶联到激活型G-刺激蛋白(G-stimulatory protein),这意味着受体激活涉及到提高的cAMP含量。ACTH是2型受体(MC2)的天然配基。在许多组织中关于MC受体已经进行了大量的研究。已经知道，a -MSH以极大的亲和力结合到其上的I型受体(MCl)在一些组织和细胞例如脑中表达，包括星形细胞、睾丸、卵巢、巨噬细胞和嗜中性粒细胞。然而，MCl可能能在更宽范围的组织中表达，尽管这还需要去建立。MC受体结合不同MSH肽的选择性是变化的。MCl以极大的亲和力结合a-MSH，也以较低的亲和力结合运-MSH、y-MSI^PACTH。据报导，MC2仅结合ACTH，而不结合任何一种MSH肽。对其他受体的配基的最高亲和力包括Y-MSH (MC3-受体)和P-MSH (MC4-受体)。相反，MC5以与MCl相同的方式以非常低的亲和力结合MSH肽(即对a-MSH最高的亲和力)。通过激活MC-受体起作用的MSH-`肽具有各种功能，包括免疫、抗炎、体温调节、痛感、醛固酮合成、血压调节、心率、血管紧张度、脑血流量、神经生长、胎盘发育、许多激素(例如醛固酮、甲状腺素、催乳激素、FSH)的合成/释放。ACTH在激活类固酮生成(steroidoneogenesis)上具有主要作用。a -MSH也诱导皮肤色素形成。需要重点强调的是，MSH肽，特别是a -MSH的关于哪些受体被涉及的许多作用还没有完全建立起来。据推测a-MSH的抗炎作用涉及各种过程包括干扰NO生产、内皮素-1作用、白介素10形成，这又关联到巨噬细胞和单核细胞中表达的MCl受体。已经证实MC受体对a-MSH的激活作用在各种炎症过程中是重要的(Lipton和Catanial997):1)抑制嗜中性粒细胞的趋药性迁移(Cataniaigge)J) a-MSH包括其类似物抑制对LPS处理响应的细胞因子(IL-1，TNF-a )的释放(Goninardl996)。3)抑制对细菌内毒素响应的1,-0(数)叩，1(.￥.等，1997)。4)ICV或IP给药a-MSH抑制通过局部给予LPS而引起的中枢系统的TNF-a生产。5)已经证实0-|^11减轻实验性炎症性肠病(1^]_0^，N.等，1997)和局部缺血诱导的急性肾衰竭(Star，R.A.等，1995)的炎症。6)通过抑制接触性过敏的诱导和激发，a -MSH还具有一定的预防效果以及诱导半抗原耐受性，并且人们推测a-MSH可能介导皮肤炎症和高增生皮肤病的重要的负调节(Luger，T.A.，1997)。最后，a -MSH导致来自皮肤微维管结构的内皮细胞的提高的IL-8释放(Hartmeyer，M.，1997)。低氧症(局部缺血)和再灌注损伤两者在人病理生理学中都是重要的因素。组织低氧症的实例(在再灌注过程中预先处理为损伤)包括循环系统休克、心肌局部缺血、中风、一过性肾局部缺血、大外科手术和器官移植。因为归因于局部缺血的疾病是极其常见的发病率和死亡率原因，并且因为器官移植越来越频繁，为了改善公众的健康水平，非常需要具有限制再灌注损伤能力的治疗策略。局部缺血再灌注损伤的基础病理生理学是复杂的，不仅涉及到对嗜中性粒细胞-浸润的典型的炎症再灌注反应，而且涉及到再灌注组织/器官内细胞因子的基因表达，所述细胞因子包括肿瘤坏死因子-a (TNF-a )、白介素(IL)_1 3、IL-6、IL_8、干扰素-Y和胞间粘附分子-1 (ICAM-1)。此外，人们认为，通过直接抑制收缩性和诱导细胞凋亡，局部产生的TNF-a促成如在梗死后心脏中引起局部缺血后器官机能障碍。由于局部缺血和/或再灌注复杂的性质，已经证实简单的抗炎治疗概念是无效的:因此，大多数实验研究指向这样的事实，即为了保护避免再灌注损伤，需要有与一个以上激活通路的伴行的相互作用。已经证实，a-MSH同时具有抗炎的、抗氧化的和抗细胞凋亡的能力，这对于该化合物为了保护避免再灌注损伤的效力给出了很好的解释。已知a-MSH氨基酸序列的氨基酸残基的特定修饰可导致肽提高的受体亲和力(对例如MC4受体)、延长的生物活性或更多的受体特异性结合分布型(receptor-specificbinding profile) (Schiotil 等，1997 ；Hruby 等，1995 ；Sawyer 等，1980 ；Hiltz 等 1991 ；Scardenings等,2000)。然而，当旨在生产肽药物时,这些肽还具有对酶降解低稳定性的问题。如上所述，开发肽治疗活性的药物的问题是肽快速并且非常高效地被酶降解，通常具有在几分钟范围内的半衰期。蛋白酶和其他蛋白水解酶是无所不在的，特别是在胃肠道中更是如此，因此在口服时肽常常在多个位点对降解敏感，并且在血、肝、肾和血管内皮中在某种程度上也对降解敏感。此外，特定肽常常在主链内的一个以上键上对降解敏感；每一个水解位置由特定蛋白酶介导。即使克服了这些障碍，特别是对于神经肽，已经遇到了在它们跨越血-脑屏障运输方面的困 难。为了提高肽的代谢稳定性，Larsen等1999 (W099/46283)已经开发出了一种被称为SIP (结构诱导探针)的技术。SIP技术基于结构诱导探针的使用，该结构诱导探针以短肽序列为代表，即附加到亲本肽的C-端或N-端或者同时附加到C-端和N-端的(Lys)6。基于分子内的氢键，结构诱导探针强迫亲本肽成为更有序的构象，借此，与处于无规卷曲构象的肽相反，肽嵌合体(连接到探针的肽)对蛋白酶敏感度低。作为结构化的结果，肽嵌合体更难于被蛋白酶降解。附加SIP到生物活性肽常常导致肽的酶稳定性的提高而同时生物活性保持不变(Rizzi等2002)。专利技术概述令人意外的是，本专利技术已经证实，与天然a -MSH肽相比，a -MSH和a -MSH类似物在肽的N-端的SIP-修饰提高了肽的最大功效。与天然a-MSH肽相比，本专利技术的肽显示出了提闻的抗炎效果和提闻的预防局部缺血症状的能力。因此，本专利技术涉及特定的肽，所述肽包括在肽的N-端部分的SIP修饰和在肽的C-端本文档来自技高网...

【技术保护点】
肽的制备方法，所述肽的长度为19个氨基酸残基且包括如下氨基酸序列：Lys?Lys?Lys?Lys?Lys?Lys?Ser?Tyr?Ser?Met?Glu?His?Phe?Arg?Trp?Gly?Lys?Pro?Val（序列表序列1），其中，所述肽的氨基端是CH3?C(=O)?，所述肽的羧基端是?C(=O)?NH2，所述肽通过溶液合成法、Merrifield型固相合成法或重组DNA技术来制备。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：托马斯·恩格尔布雷希特·诺克尔德·约纳森，瑟伦·尼尔森，约尔延·弗洛基尔，比亚内迪尤·拉尔森，
申请(专利权)人：艾伯维有限公司，
类型：发明
国别省市：